發(fā)布時間：2018-02-24 20:14

  本文關(guān)鍵詞： 膿毒癥 B1細(xì)胞 邊緣區(qū)B細(xì)胞 濾泡B細(xì)胞 記憶性B細(xì)胞　出處：《第二軍醫(yī)大學(xué)》2014年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：【研究目的】 本實(shí)驗(yàn)擬研究膿毒癥小鼠外周血、脾臟、腹腔中的B淋巴細(xì)胞表型、共刺激分子的表達(dá)以及分泌功能的變化，初步闡明膿毒癥時B淋巴細(xì)胞是否發(fā)生功能異常。 【研究方法】 1、通過CLP法制作膿毒癥小鼠模型。將24只C57BL/6小鼠分為假手術(shù)組（sham, n=6）和CLP組（CLP，n=18），后者再分為CLP6h組（n=6）、CLP24h組（n=6）和CLP48h組（n=6）。手術(shù)后6h、24h與48h時，流式細(xì)胞術(shù)檢測外周血、脾臟和腹腔中CD19+CD5+B細(xì)胞、CD19+CD21+B細(xì)胞、CD19+CD23+B細(xì)胞和CD19+CD27+B細(xì)胞的百分比變化；以及B淋巴細(xì)胞上CD40、CD69、CD80、CD86百分比的變化和mIgM、mIgD平均熒光強(qiáng)度的變化。 2、通過CLP法制作膿毒癥小鼠模型。將24只C57BL/6小鼠分為假手術(shù)組（sham, n=6）和CLP組（CLP，n=18），后者再分為CLP6h組（n=6）、CLP24h組（n=6）和CLP48h組（n=6）。手術(shù)后6h、24h、48h時，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測血漿和（或）腹腔中GM-CSF、IL-10、IgM的水平。 【結(jié)果】 1、膿毒癥小鼠外周血中，CD19+CD5+B細(xì)胞無變化；CD19+CD21+B細(xì)胞和CD19+CD23+B細(xì)胞CLP術(shù)后減少，48h降至最低（p0.01）；CD19+CD27+B細(xì)胞在CLP術(shù)后6h升高（p0.05），48h顯著降低（p0.05）。功能性相關(guān)分子：CD40表達(dá)在CLP術(shù)后明顯升高，6h達(dá)到高峰（p0.05）；CD69僅在CLP24h有所升高（p0.01）；CD80在CLP術(shù)后均顯著升高，但48h較6h輕微降低（p0.01）；CD86于CLP術(shù)后6h升高，24h降低且低于正常，48h又恢復(fù)至正常水平（p0.01）。B細(xì)胞上mIgM的表達(dá)在CLP術(shù)后6h開始升高，24h降低，48h恢復(fù)至正常水平（p0.01）； mIgD的平均熒光強(qiáng)度在CLP術(shù)后24h降低，48h恢復(fù)正常水平（p0.01）。 2、膿毒癥小鼠脾臟中，CD19+CD5+B細(xì)胞和CD19+CD21+B細(xì)胞CLP術(shù)后無變化；CD19+CD23+B細(xì)胞CLP術(shù)后24h和48h降低（p0.01）；CD19+CD27+B細(xì)胞在CLP術(shù)后48h升高（p0.01）。功能相關(guān)分子：CD40和mIgM的表達(dá)無改變；CD69在CLP術(shù)后6h開始升高，在24h達(dá)到高峰，48h時明顯降低但仍高于假手術(shù)組和6h組（p0.01）；CD80在CLP術(shù)后24h開始升高（p0.01），48h達(dá)到高峰（p0.01）；CD86于手術(shù)后24h升高，48h略微下降但仍高于比其他組（p0.01）。mIgD在術(shù)后48h升高（p0.01）。 3、膿毒癥小鼠腹腔中，CD19+CD5+B細(xì)胞在6h和24h減少（p0.05），48h后升高恢復(fù)至正常水平（p0.01）。功能相關(guān)分子： CD40在CLP術(shù)后無變化；CD69在CLP術(shù)后持續(xù)升高（p0.01）；CD80在CLP術(shù)后24h開始升高（p0.01）；CD86于手術(shù)后6h和24h明顯升高（p0.05），48h下降（p0.01）且顯著低于其他組（p0.01）。mIgM和mIgD在CLP術(shù)后6h開始降低，分別于24h和48h降至最低水平（p0.01）。 4、小鼠血漿中IgM表達(dá)在CLP術(shù)后48h降低（p0.05）。腹腔中IgM表達(dá)在CLP術(shù)后6h升高（p0.01），48h達(dá)到最高水平（p0.01）；腹腔中GM-CSF和IL-10水平在CLP術(shù)后升高，24小時達(dá)到最高峰，而在48h降低恢復(fù)至正常水平（p0.01）。 【結(jié)論】 膿毒癥時受影響的B淋巴細(xì)胞可能主要是CD19+CD23+B細(xì)胞，可能提示參與獲得性免疫反應(yīng)的B細(xì)胞功能受損；腹腔中CD19+CD5+B1細(xì)胞一過性降低，可能與抵抗感染所致數(shù)量丟失有關(guān)，但B1細(xì)胞似乎可通過自我更新恢復(fù)正常。 膿毒癥時各部位B細(xì)胞均處于活化狀態(tài)，共刺激分子CD40、CD80和CD86在CLP術(shù)后早期均上調(diào)，但之后均有不同程度降低，甚至低于正常水平，，進(jìn)一步提示膿毒癥時B細(xì)胞獲得性免疫反應(yīng)能力降低。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R459.7

【參考文獻(xiàn)】

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1 李軼男;周立新;方濱;毛克江;溫偉標(biāo);譽(yù)鐵鷗;鄒毅成;黎文研;黎昌;;重度膿毒癥患者單核細(xì)胞HLA-DR表達(dá)與器官功能不全的相關(guān)性研究[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2009年07期

本文編號：1531562