本文關(guān)鍵詞： 干細胞 組織工程 腦損傷 移植 人促紅細胞生成素 干細胞移植 人羊膜間充質(zhì)干細胞 大鼠 生長相關(guān)蛋白 水通道蛋白 基因 修飾 神經(jīng)功能　出處：《中國組織工程研究》2016年23期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：背景:有研究表明促紅細胞生成素是一種調(diào)節(jié)骨髓造血功能的糖蛋白,不僅具有調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育作用,還可以營養(yǎng)神經(jīng)及保護神經(jīng),但實驗結(jié)果證實促紅細胞生成素基因修飾人羊膜間充質(zhì)干細胞移植成為治療腦損傷的新途徑。目的:觀察促紅細胞生成素修飾的人羊膜間充質(zhì)干細胞蛛網(wǎng)膜下腔移植對腦損傷大鼠神經(jīng)損傷后功能恢復(fù)的影響。方法:體外培養(yǎng)人羊膜間充質(zhì)干細胞,構(gòu)建真核表達質(zhì)粒pcD NA3.1促紅細胞生成素,并轉(zhuǎn)染入人羊膜間充質(zhì)干細胞。用Western blot檢測人羊膜間充質(zhì)干細胞在轉(zhuǎn)染前后人促紅細胞生成素蛋白的表達。構(gòu)建大腦中動脈閉塞模型大鼠,用促紅細胞生成素修飾的人羊膜間充質(zhì)干細胞尾靜脈移植,并設(shè)模型組和人羊膜間充質(zhì)干細胞組作對比。結(jié)果與結(jié)論:(1)轉(zhuǎn)染結(jié)果鑒定:Western blot結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染人促紅細胞生成素基因的人羊膜間充質(zhì)干細胞體外能表達人促紅細胞生成素;(2)行為學(xué)變化、生長相關(guān)蛋白43及水通道蛋白9表達:神經(jīng)功能評分,RT-PCR和Western blot檢測結(jié)果顯示,人促紅細胞生成素基因+人羊膜間充質(zhì)干細胞組改良的神經(jīng)功能缺損評分、腦組織生長相關(guān)蛋白43及水通道蛋白9基因及蛋白的表達明顯小于其他2組(P0.05);(3)細胞存活情況:人促紅細胞生成素+人羊膜間充質(zhì)干細胞組CM-Dil的陽性細胞數(shù)最多(P0.05),人羊膜間充質(zhì)干細胞組次之(P0.05),腦損傷組最少(P0.05)。(4)結(jié)果證實,促紅細胞生成素基因修飾人羊膜間充質(zhì)干細胞移植可降低腦損傷區(qū)周圍生長相關(guān)蛋白43及水通道蛋白9基因及蛋白的表達,抑制神經(jīng)細胞的凋亡,促進神經(jīng)功能恢復(fù)。
[Abstract]:Background: erythropoietin is a glycoprotein that regulates hematopoietic function in bone marrow. It not only regulates the development of the central nervous system, but also nourishes and protects the nerve. However, the experimental results confirmed that the transplantation of human amniotic mesenchymal stem cells modified with erythropoietin gene was a new way to treat brain injury. Objective: to observe the subarachnoid space of erythropoietin modified human amniotic mesenchymal stem cells. Effects of transplantation on functional recovery after nerve injury in rats with brain injury methods: human amniotic mesenchymal stem cells were cultured in vitro. The eukaryotic expression plasmid pcD NA3.1 erythropoietin was constructed. Western blot was used to detect the expression of human erythropoietin protein before and after transfection of human amniotic mesenchymal stem cells. Erythropoietin modified human amniotic mesenchymal stem cells were transplanted into caudal vein and compared with model group and human amniotic mesenchymal stem cell group. Human erythropoietin gene transfected human amniotic mesenchymal stem cells could express human erythropoietin (EPO) 2) in vitro. The expression of growth-associated protein 43 and aquaporin 9 were detected by RT-PCR and Western blot. Modified neurological impairment score of human erythropoietin gene human amniotic mesenchymal stem cells group, The expression of brain growth-associated protein 43 and aquaporin 9 gene and protein were significantly lower than those of other two groups (P 0.05). The number of CM-Dil positive cells in human erythropoietin human amniotic mesenchymal stem cells group was the highest (P 0.05). Human amniotic mesenchymal stem cells (HMMSCs) group was followed by P0.05, and brain injury group was the least (P0.05N. 4). Transplantation of human amniotic mesenchymal stem cells modified with erythropoietin gene can reduce the expression of growth-associated protein 43 and aquaporin-9 gene and protein around the brain injury area, inhibit the apoptosis of nerve cells and promote the recovery of nerve function.
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學(xué)研究生院;天津市津南區(qū)咸水沽醫(yī)院腦系科;
【分類號】：R651.15

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本文編號：1499021