本文關(guān)鍵詞： 脂聯(lián)素 膿毒癥 肺損傷 JAK2/STAT3 血紅素氧化酶-1　出處：《蘇州大學(xué)》2014年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：第一部分脂聯(lián)素對膿毒癥大鼠肺損傷及炎癥介質(zhì)的影響 目的： 探討脂聯(lián)素(APN)對膿毒癥大鼠肺損傷及炎癥介質(zhì)的影響。 方法： 采用CLP法建立膿毒癥模型。雄性Wistar大鼠54只,隨機(jī)分為對照組(C組)、膿毒癥模型組(CLP組)、APN預(yù)處理組(APN組)。各組隨機(jī)抽取8只大鼠行5天生存率分析。APN組于CLP前12h i.p. APN (6mg/kg)。CLP后動脈血?dú)夥治�、測定血漿TNF-α、IL-6、HMGB1水平及血清ALT、AST、BUN、Cr、CK濃度；測定肺W/D比值,觀察肺組織病理變化及肺損傷病理學(xué)評分；檢測肺泡灌洗液(BALF)中總蛋白含量、白細(xì)胞總數(shù)和分類以及TNF-α、IL-6水平；檢測肺組織MPO、SOD及HMGB1mRNA水平。 結(jié)果： 1、與C組比較,CLP和APN組大鼠5天生存率和血?dú)釶a02均下降(P0.05)；血漿TNF-α、IL-6和HMGB1水平及血清生化指標(biāo)均升高(P0.05)；肺W/D比值、肺損傷病理學(xué)評分升高(P0.05); BALF中蛋白含量、白細(xì)胞總數(shù)和PMN%及TNF-α、IL-6水平均升高(P0.05)；肺組織SOD活性下降(P0.05),MPO活性和HMGB1mRNA水平表達(dá)均升高(P0.05)。 2、與CLP組比較,APN組大鼠5天生存率及血?dú)釶aO2升高(P0.05)；血漿TNF-α、IL-6和HMGB1水平及血清生化指標(biāo)降低(P0.05)；肺W/D比值、肺損傷病理學(xué)評分均下降(P0.05); BALF中蛋白含量、白細(xì)胞總數(shù)和PMN%及TNF-α、IL-6水平均下降(P0.05)；肺組織SOD活性升高(P0.05),MPO活性及HMGB1mRNA水平均有所下降(P0.05)。 結(jié)論： APN通過減少肺水含量,減輕肺病理損傷程度,抑制中性粒細(xì)胞聚集,提高膿毒癥大鼠生存率,抑制炎癥因子的釋放,對膿毒癥大鼠肺損傷具有保護(hù)作用。 第二部分脂聯(lián)素通過IL-6及JAK2/STAT3信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響膿毒癥大鼠肺損傷的研究 目的： 觀察脂聯(lián)素是否通過抑制IL-6/JAK/STAT通路中的作用位點(diǎn)發(fā)揮對膿毒癥大鼠肺組織的保護(hù)作用。 方法： 選用120只雄性Wistar大鼠,隨機(jī)分為：對照組(C組)、膿毒癥模型組(CLP組)、脂聯(lián)素組(APN組)、脂聯(lián)素+抗IL-6單克隆抗體組(APN+ANTI-IL-6組)、脂聯(lián)素+雷帕霉素組(APN+RPM組)。APN組、APN+ANTI-IL-6組及APN+RPM組于CLP前12h i.p. APN (6mg/kg)。APN+ANTI-IL-6組大鼠于CLP前1h i.p.ANTI-IL-6(0.5mg/kg)。APN+RPM組于CLP前1hi.p. RPM (0.4mg/kg)。各組隨機(jī)抽取8只大鼠行5d生存率分析。CLP后各組隨機(jī)抽取10只大鼠進(jìn)行肺組織病理學(xué)檢查,測定各組肺W/D比；肺組織MPO活性；使用ELISA測定血漿TNF-α、IL-6和HMGB1水平；使用EMSA測定肺組織STAT3DNA結(jié)合活性；Real-timePCR測定肺組織TLR4mRNA及HMGB1mRNA表達(dá)水平。 結(jié)果： 1、與C組比較,CLP組、APN組、APN+ANTI-IL-6組、APN+RPM組大鼠5d生存率降低(P0.05),血漿TNF-α、IL-6和HMGB1水平顯著升高(P0.05),肺損傷病理學(xué)評分、肺組織W/D比、MPO活性、STAT3DNA結(jié)合活性以及TLR4mRNA、HMGB1mRNA水平在CLP后均增加(P0.05)。 2、與CLP組比較,APN組和APN+RPM組5d生存率升高(P0.05),APN組、APN+ANTI-IL-6組、APN+RPM組血漿TNF-α、IL-6和HMGB1水平,肺損傷病理學(xué)評分、肺組織W/D比、MPO活性、STAT3DNA結(jié)合活性、TLR4mRNA水平以及]HMGB1mRNA水平均降低(P0.05)。 3.與APN組比較,APN+ANTI-IL-6組和APN+RPM組5d生存率降低(P0.05)。APN+ANTI-IL-6組、APN+RPM組血漿TNF-α、IL-6和HMGB1水平、肺損傷病理學(xué)評分、肺W/D比、MPO活性、STAT3DNA結(jié)合活性以及TLR4mRNA、HMGB1mRNA水平均增高(P0.05)。 結(jié)論： 脂聯(lián)素通過抑制膿毒癥大鼠IL-6及STAT3的表達(dá),影響膿毒癥肺損傷及炎癥反應(yīng)。給予ANTI-IL-6及RPM干預(yù)后膿毒癥大鼠肺組織STAT3和TRL4mRNA表達(dá)水平升高,炎癥反應(yīng)及肺損傷加重。提示脂聯(lián)素的肺保護(hù)作用可能與抑制IL-6/JAK2/STAT3信號通路有關(guān)。 第三部分脂聯(lián)素介導(dǎo)IL-10/HO-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響膿毒癥大鼠急性肺損傷及機(jī)制研究 目的： 研究IL-10/HO-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在脂聯(lián)素影響膿毒癥大鼠急性肺損傷中的作用,探討脂聯(lián)素肺保護(hù)的可能分子機(jī)制。 方法： 采用CLP法建立膿毒癥模型。100只雄性Wistar大鼠,隨機(jī)分為對照組(C組)、膿毒癥模型組(CLP組)、APN預(yù)處理組(APN組)、IL-10預(yù)處理組(IL-10組)和ZnPPⅨ干預(yù)組(Zn組)。APN組于CLP前12h i.p.APN (6mg/kg), Zn組于APN前12h i.p. ZnPPⅨ(10mg/kg), IL-10組在APN前30min i.p. IL-10(1μg/kg)。各組隨機(jī)抽取10只大鼠進(jìn)行5天生存率分析。CLP后動脈血?dú)夥治?測定肺W/D比,HE染色觀察肺組織病理變化及肺損傷病理學(xué)評分；檢測BALF中總蛋白含量、白細(xì)胞總數(shù)和分類以及TNF-α、IL-6水平；檢測肺組織MPO、SOD活性及IL-10、HO-1蛋白表達(dá)。 結(jié)果： 1、與C組比較,CLP組、APN組和Zn組大鼠5d生存率及血?dú)釶aO2均下降(P0.05)；肺W/D比、肺損傷病理學(xué)評分均升高(P0.05)；BALF中蛋白含量、白細(xì)胞總數(shù)和PMN%及TNF-α、IL-6水平均升高(P0.05)；肺組織SOD活性下降,MPO活性升高(P0.05)。IL-10組上述指標(biāo)及生存率與C組比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 2、與CLP組比較,APN組、Zn組和IL-10組血?dú)釶a02均升高(P0.05)；肺W/D比、肺損傷病理學(xué)評分均下降(P0.05);BALF中蛋白含量、白細(xì)胞總數(shù)和PMN%及TNF-α、IL-6水平均下降(P0.05)；肺組織SOD活性升高,MPO活性下降(P0.05)。 3、與C組比較,CLP組、APN組、IL-10組和Zn組肺組織IL-10和HO-1蛋白表達(dá)水平升高(P0.05)；其中APN組和IL-10組肺組織IL-10和HO-1蛋白表達(dá)水平顯著升高(P0.05) 4、與APN組比較,Zn組血?dú)釶a02下降(P0.05)；肺W/D比、肺損傷病理學(xué)評分均升高(P0.05)；BALF中蛋白含量、白細(xì)胞總數(shù)和PMN%及TNF-α、IL-6水平均升高(P0.05)；肺組織SOD活性下降(P0.05),MPO活性升高(P0.05)。而IL-10組血?dú)釶a02升高(P0.05)；肺W/D比、肺損傷病理學(xué)評分均降低(P0.05)；BALF中蛋白含量、白細(xì)胞總數(shù)和PMN%及TNF-α、IL-6水平均降低(P0.05)；肺組織SOD活性升高,MPO活性降低(P0.05)。 結(jié)論： 1、APN通過上調(diào)膿毒癥大鼠肺組織IL-10、HO-1蛋白表達(dá),減少肺水含量,減輕肺病理損傷程度以及炎性反應(yīng),保護(hù)膿毒癥大鼠肺組織。而HO-1抑制劑ZnPPIX能夠部分逆轉(zhuǎn)APN的上述肺保護(hù)作用。 2、預(yù)先給予外源性IL-10, APN可明顯提高膿毒癥大鼠肺組織HO-1表達(dá)及生存率,降低炎性因子及肺損傷,表明APN的肺保護(hù)作用可能與IL-10/HO-1通路有關(guān)。
[Abstract]:The effect of the first part of adiponectin on lung injury and inflammatory mediators in rats with sepsis
Objective:
To investigate the effect of adiponectin (APN) on lung injury and inflammatory mediators in rats with sepsis.
Method錛，

本文編號：1468785