本文關(guān)鍵詞：肺保護(hù)液灌注豬供肺后低溫保存肺泡細(xì)胞凋亡的動態(tài)觀察

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【摘要】：目的 研究離體豬肺經(jīng)Celsior液灌注后低溫保存中肺組織細(xì)胞凋亡的動態(tài)過程,及細(xì)胞凋亡、壞死與肺組織損傷的相關(guān)性。方法采用巴馬小香豬雙肺離體冷缺血模型,分別于離體低溫保存0h、8h、12h、24h取肺組織標(biāo)本：通過測定肺組織干/濕重比、透射電鏡觀察組織細(xì)胞亞顯微結(jié)構(gòu)及形態(tài)改變,以判斷凋亡是否發(fā)生；通過PCR檢測肺組織中凋亡基因caspase-3的表達(dá)水平及TUNEL法測定肺泡細(xì)胞凋亡水平；通過HE染色檢測肺組織細(xì)胞死亡率,并結(jié)合上述凋亡率計(jì)算出細(xì)胞壞死率。結(jié)果1.供肺濕/干重(W/D)隨著低溫保存時間的延長呈遞增的趨勢,保存8h、12h、24h顯著高于保存Oh(P0.05)。HE染色供肺死亡率隨保存時間延長逐漸增加,保存8h、12h、24h顯著高于保存0h(P0.05)。Tunel法供肺組織凋亡率隨保存時間的延長線增高后降低,在保存12h到達(dá)峰值,保存8h、12h、24h凋亡率顯著高于保存Oh(P0.05),且保存8h、12h、24h組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),但保存12h與保存24h差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。細(xì)胞內(nèi)Caspase-3的表達(dá)水平先增高后降低,在保存8h后逐漸增高(F=11.16),保存12h后表達(dá)量逐漸下降。透射電鏡下保存8h開始出現(xiàn)凋亡,保存12h后超微結(jié)構(gòu)變化明顯,可見大量早中期凋亡細(xì)胞,保存24h后細(xì)胞凋亡較保存12h變化不明顯,但出現(xiàn)大量凋亡晚期細(xì)胞。結(jié)論：1.供肺經(jīng)器官保存液灌注后低溫保存,隨保存時間延長凋亡率先增高后降低,在保存12h后達(dá)到峰值。2.供肺保存24h,供肺W/D與細(xì)胞死亡關(guān)系顯著,其中保存0～8h,肺缺血性損傷與細(xì)胞凋亡顯著相關(guān)；保存12～24h,肺缺血性損傷與細(xì)胞壞死顯著相關(guān)。3.Caspase-3 RNA逆轉(zhuǎn)錄-實(shí)時PCR結(jié)合Tunel法為更全面、客觀地評價細(xì)胞凋亡的方法,可反應(yīng)組織凋亡早、中、晚各期總體凋亡情況。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R655.3

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

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本文編號：1256641