本文關(guān)鍵詞：尼古丁對(duì)大鼠髕腱肌腱干細(xì)胞生物學(xué)特性影響的實(shí)驗(yàn)研究

  更多相關(guān)文章： 尼古丁 肌腱干細(xì)胞 肌腱病變 延遲愈合 成肌腱分化

【摘要】：目的:探討體外尼古丁對(duì)大鼠髕腱肌腱干細(xì)胞(tendon-derived stem cells,TDSCs)的細(xì)胞活力、細(xì)胞早期凋亡以及肌腱相關(guān)基因表達(dá)的影響,揭示吸煙導(dǎo)致肌腱病變以及損傷肌腱延遲愈合的潛在細(xì)胞學(xué)發(fā)病機(jī)制。方法:無菌條件下取8周齡SD大鼠的髕腱,I型膠原酶消化分離獲得單個(gè)有核細(xì)胞,以最適密度(50個(gè)/cm2)進(jìn)行接種,細(xì)胞呈克隆樣生長(zhǎng),獲得原代TDSCs�；A(chǔ)培養(yǎng)細(xì)胞至第3代,將其分為兩組,實(shí)驗(yàn)組用不同濃度的尼古丁培養(yǎng)基(10-7 M,10-6 M,10-5 M,10-4 M和10-2 M)干預(yù),對(duì)照組繼續(xù)采用基礎(chǔ)培養(yǎng)基(0M)培養(yǎng)。處理6 h、24 h、48 h和72 h后分別應(yīng)用四唑鹽(MTT)比色法檢測(cè)尼古丁對(duì)TDSCs體外存活的影響,72h后應(yīng)用Annexin V-FITC/PI雙染法檢測(cè)尼古丁對(duì)TDSCs體外早期凋亡的影響,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Realtime PCR)檢測(cè)肌腱相關(guān)基因Col1a1和Scx的表達(dá)。結(jié)果:與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組不同濃度的尼古丁干預(yù)下,TDSCs的細(xì)胞活力呈下降趨勢(shì),呈時(shí)間依賴性和濃度依賴性,濃度高于10-4 M時(shí)作用顯著,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。流式細(xì)胞儀檢測(cè)TDSCs早期凋亡(Annexin V+/PI-)的數(shù)量隨著尼古丁濃度的增加而增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。同時(shí),Realtime PCR檢測(cè)結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組中Col1a1和Scx的m RNA表達(dá)水平均降低,濃度高于10-5 M時(shí)作用顯著,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:體外尼古丁可抑制大鼠髕腱TDSCs的細(xì)胞活力,導(dǎo)致TDSCs早期凋亡,同時(shí)抑制TDSCs中成肌腱分化轉(zhuǎn)錄、細(xì)胞外基質(zhì)合成相關(guān)基因的表達(dá)。這可能是吸煙導(dǎo)致肌腱病變以及損傷肌腱延遲愈合的潛在細(xì)胞學(xué)發(fā)病機(jī)制。
【作者單位】： 東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院骨科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金青年基金項(xiàng)目(81201422) 江蘇省自然科學(xué)基金青年基金項(xiàng)目(BK2012334) 東南大學(xué)基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)“創(chuàng)新基金”項(xiàng)目(3290002401) 國(guó)家大學(xué)生創(chuàng)新訓(xùn)練計(jì)劃(1210286090) 中國(guó)博士后基金資助(2012M520983) 江蘇省“六大人才高峰”資助項(xiàng)目(2013-WSW-054)
【分類號(hào)】：R965
【正文快照】： 吸煙可導(dǎo)致骨質(zhì)疏松[1]、骨折延遲愈合或不愈合[2]、骨骼肌肌力下降[3]等骨骼肌肉系統(tǒng)疾患。有研究報(bào)道,吸煙會(huì)導(dǎo)致肌腱病變和損傷肌腱的延遲愈合[4,5]。然而,其潛在的細(xì)胞學(xué)發(fā)病機(jī)制尚未闡明。肌腱組織中的肌腱干細(xì)胞在維持肌腱穩(wěn)態(tài)與修復(fù)中發(fā)揮重要作用。吸煙是否對(duì)肌腱干細(xì)

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

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【相似文獻(xiàn)】

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3 楊運(yùn)發(fā);徐達(dá)傳;;L-PRP對(duì)體外培養(yǎng)的肌腱干細(xì)胞(TSCs)影響的研究[A];中國(guó)解剖學(xué)會(huì)2013年年會(huì)論文文摘匯編[C];2013年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

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3 倪明;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成肌腱分化促進(jìn)肌腱愈合的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2011年

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5 胡丹;駕駛員手部骨骼肌肉生物力學(xué)建模研究[D];吉林大學(xué);2014年

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

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3 李偉;MRI和CT能譜成像在手足肌腱病變中的應(yīng)用及對(duì)照分析[D];山東大學(xué);2012年

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本文編號(hào)：1230425