本文關鍵詞：脂聯(lián)素對膿毒癥大鼠肺組織線粒體氧化應激和生物合成功能的影響

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【摘要】：目的： 研究脂聯(lián)素(Adiponectin, APN)預處理對膿毒癥急性肺損傷大鼠肺組織線粒體氧化應激的影響。 方法： 雄性Wistar大鼠120只,7-8周齡,體重180～220g,取60只大鼠,采用隨機數(shù)字表法,分為3組：對照組(C組)、膿毒癥模型組(CLP組)和APN預處理組(APN/CLP組),每組20只。CLP組和APN/CLP組采用盲腸結扎穿孔(Cecal ligation and puncture, CLP)法建立膿毒癥動物模型。APN/CLP組于CLP術前12h經(jīng)腹腔注射基因重組脂聯(lián)素6mg/kg。觀察每組大鼠一般情況：包括一般狀態(tài)、呼吸、心率、體溫、反應情況及飲食等。比較3組大鼠造模后7d的生存率。另取其中60只大鼠,隨機分為3組,分組方法同上。各組于造模成功后6h和24h隨機抽取大鼠各10只,處死后留取肺組織,觀察C組、CLP組和APN/CLP組肺組織病理變化并進行肺損傷評分；檢測肺組織中白介素-6(Interlukin-6, IL-6)、高遷移率族蛋白B1(High mobility group box1,HMGB1)水平；分離肺組織線粒體,檢測線粒體腫脹程度；測定線粒體膜電位、線粒體錳超氧化物歧化酶(Manganese superoxide dismutase, Mn-SOD)活性、丙二醛(Malondialdehyde, MDA)含量及谷胱甘肽(Glutathione, GSH)含量；對CLP組大鼠術后24h肺組織IL-6、HMGB1水平與肺組織線粒體Mn-SOD、MDA、GSH含量分別行相關性分析。 結果： 1、與C組比較,CLP組和APN/CLP組術后均出現(xiàn)明顯的膿毒癥表現(xiàn),造模后7d大鼠存活率顯著降低(P0.05)；術后24h肺損傷病理學評分、肺組織IL-6和HMGB1的水平均明顯升高(P0.05)；術后6h及24h,肺組織線粒體腫脹程度顯著增加(P0.05)；線粒體膜電位及線粒體Mn-SOD活性均顯著降低(P0.05)；線粒體MDA含量明顯升高(P0.05)；線粒體GSH含量降低(P0.05)。 2、與CLP組比較,APN/CLP組CLP術后膿毒癥表現(xiàn)較輕微,術后7d大鼠存活率顯著升高(P0.05)；術后24h肺損傷病理學評分、肺組織IL-6和HMGB1水平均明顯下降(P0.05)；術后6h及24h,肺組織線粒體腫脹減輕(P0.05)；線粒體膜電位及Mn-SOD活性均升高(P0.05)；線粒體MDA含量明顯降低(P0.05):GSH含量增加(P0.05)。 3、與術后6h比較,CLP組及APN/CLP組大鼠CLP術后24h肺組織線粒體腫脹程度增加(P0.05)；線粒體膜電位下降(P0.05)；線粒體Mn-SOD活性及GSH含量均升高(P0.05)；線粒體MDA含量差別無統(tǒng)計學意義(P0.05)。 4、CLP組術后24h肺組織勻漿IL-6、HMGB1水平與肺組織線粒體MDA含量呈正相關(r=0.744,P=0.014:r=0.785,P=0.007),肺組織IL-6、HMGB1水平與線粒體Mn-SOD活性呈負相關(r=-0.781,P=0.008:r=-0.832,P=0.003),且IL-6、HMGB1水平與線粒體GSH含量呈負相關(r=-0.754,P=0.012;r=-0.907,P=0.000)。 結論： 給予APN處理可能通過抑制膿毒癥急性肺損傷大鼠肺組織炎癥反應和氧化應激,減輕線粒體損傷,改善線粒體功能,發(fā)揮肺保護作用。 目的： 研究脂聯(lián)素(Adiponectin, APN)預處理對膿毒癥急性肺損傷大鼠肺臟線粒體生物合成功能的影響。 方法： 采用盲腸結扎穿孔(Cecal ligation and puncture, CLP)法建立膿毒癥動物模型。雄性Wistar大鼠60只,7-8周齡,體重180～220g,采用隨機數(shù)字表法,分為3組：對照組(C組)、膿毒癥模型組(CLP組)和APN預處理組(APN/CLP組),每組20只。APN/CLP組于CLP術前12h經(jīng)腹腔注射基因重組脂聯(lián)素6mg/kg。各組于造模成功后6h和24h分別隨機抽取每組各10只大鼠,斷頭處死后,留取肺組織標本。觀察C組、CLP組和APN/CLP組肺組織病理學改變并記錄肺損傷病理學評分,檢測肺組織線粒體mtDNA相對拷貝數(shù),線粒體生物合成相關因子過氧化物酶體增殖物受體γ輔助激活因子-1α(Peroxisome proliferators activated receptor γ coactivator-1α, PGC-1α) mRNA及蛋白表達,核呼吸因子-1(Nuclear respiratory factor1, NRF-1)、核呼吸因子-2(Nuclear respiratory factor2, NRF-2)、線粒體轉錄因子A (Mitochondrial transcription factor A, Tfam) mRNA及8-羥基鳥嘌呤DNA糖苷酶(8-oxoguannine DNA glycosidase,OGG1) mRNA的表達水平。 結果： 1、CLP術后6h,與C組比較,CLP組、APN/CLP組肺損傷病理學評分明顯升高(P0.05),肺組織線粒體mtDNA相對拷貝數(shù)顯著降低(P0.05),肺組織線粒體生物合成相關因子PGC-1α、NRF-1、NRF-2及OGG1mRNA表達均明顯升高(P0.05), Tfam mRNA表達水平無顯著變化(P0.05), PGC-1α蛋白水平未見明顯差異(P0.05)；與CLP組比較,APN/CLP組肺損傷病理學評分降低(P0.05),肺組織線粒體mtDNA相對拷貝數(shù)、肺組織PGC-1α. NRF-1、NRF-2及OGGl mRNA表達均增加(P0.05), Tfam mRNA表達水平無顯著變化(P0.05),肺組織PGC-1α蛋白含量無明顯改變(P0.05)。 2、CLP術后24h,與C組比較,CLP組、APN/CLP組肺損傷病理學評分明顯升高(P0.05),肺組織線粒體mtDNA相對拷貝數(shù)顯著降低(P0.05),肺組織線粒體生物合成相關因子PGC-1α、NRF-1、NRF-2、Tfam及OGGlmRNA表達均明顯增加(P0.05)；與CLP組比較,APN/CLP組肺損傷評分降低(P0.05),肺組織線粒體mtDNA相對拷貝數(shù)、肺組織PGC-1α、NRF-1、 NRF-2、Tfam及OGG1mRNA表達均增加(P0.05); PGC-1α蛋白含量未見明顯改變(P0.05)。 3、與CLP術后6h比較,CLP組及APN/CLP組術后24h肺組織線粒體mtDNA相對拷貝數(shù)、PGC-1α、NRF-1、NRF-2及OGG1mRNA表達均明顯減少(P0.05), Tfam mRNA表達水平顯著增加(P0.05)。 結論： APN可能通過上調肺組織PGC-1α、NRF-1、NRF-2、Tfam及OGG1mRNA的表達,增加損傷后mtDNA的拷貝及修復,減輕肺組織損傷,對膿毒癥大鼠肺損傷發(fā)揮保護作用。
【關鍵詞】：脂聯(lián)素 膿毒癥 肺損傷 線粒體 氧化應激 脂聯(lián)素 膿毒癥 肺損傷 線粒體損傷 線粒體生物合成
【學位授予單位】：南京醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R459.7
【目錄】：

• 目錄3-4
• 英文縮略詞表4-6
• 第一部分：脂聯(lián)素對膿毒癥大鼠肺組織線粒體氧化應激的影響6-41
• 中文摘要6-8
• Abstract8-11
• 前言11-14
• 材料和方法14-26
• 結果26-36
• 討論36-40
• 結論40-41
• 第二部分：脂聯(lián)素對膿毒癥大鼠肺組織線粒體生物合成功能的影響41-71
• 中文摘要41-43
• Abstract43-45
• 前言45-47
• 材料和方法47-58
• 結果58-66
• 討論66-70
• 結論70-71
• 全文結論71-72
• 展望與不足72-73
• 參考文獻73-80
• 綜述80-96
• 參考文獻89-96
• 攻讀學位期間發(fā)表文章情況96-98
• 致謝98-99

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 尚濤;張建新;李蘭芳;;提取分離肺臟線粒體的方法研究[J];河北醫(yī)藥;2006年04期

2 張建新;李蘭芳;尚濤;;NG-硝基-L-精氨酸和L-精氨酸對內毒素性肺損傷大鼠肺臟線粒體損傷的影響[J];河北醫(yī)藥;2010年17期

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本文編號：1060373