本文關鍵詞：不同來源膽鹽水解酶基因在大腸桿菌中的表達

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【摘要】：根據(jù)GenBank上報道的兩歧雙歧桿菌ATCC 29521的膽鹽水解酶基因(BSH)序列和嗜酸乳桿菌NCFM的膽鹽水解酶基因(BSHA和BSHB)序列,設計引物通過PCR擴增獲得BSH基因,將其連接到表達載體pET28a(+),構建pET-BSH表達質粒,經IPTG誘導表達后,聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)檢測表明在分子質量大小約40、43、45kD處有預期條帶出現(xiàn),初步表明蛋白表達成功。重組菌產生的膽鹽水解酶水解甘氨膽酸鈉產生的甘氨酸經茚三酮比色法分析,表明該重組的膽鹽水解酶具有水解活性。
【作者單位】： 東北農業(yè)大學乳品科學教育部重點實驗室;國家乳品工程技術研究中心;
【關鍵詞】： 膽鹽水解酶 克隆表達 活性測定
【基金】：國家自然科學基金項目(31171718) 國家“863”計劃項目(2011AA100902) “十二五”國家科技支撐計劃項目(2012BAK17B04) 黑龍江省教育廳科學技術研究重點項目(12511z005)
【分類號】：R378
【正文快照】： 血清膽固醇濃度過高是引起冠心病等心血管疾病的重要因素[1],人和動物體內的初級膽鹽主要是由膽固醇在肝臟中合成,在碳24位置將甾核和一個甘氨酸或者�；撬嵬ㄟ^酰胺鍵連接。結合膽鹽存儲在膽囊中,通過膽管分泌到小腸,這種結合膽鹽本能的捕捉膳食膽固醇和脂肪,使它們通過腸上

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