本文關(guān)鍵詞：HBV融合抗原真核表達(dá)載體pIRES-neo-HBAg的構(gòu)建及表達(dá)

  更多相關(guān)文章： 乙型肝炎病毒 HBV融合抗原 真核表達(dá) pIRES-neo T細(xì)胞

【摘要】：目的構(gòu)建HBV融合抗原真核表達(dá)質(zhì)粒pIRES-neo-HBAg,并驗(yàn)證其在293T細(xì)胞中的表達(dá)。方法以含有HBV融合抗原的質(zhì)粒pVAX1-HBV為模板,PCR擴(kuò)增該融合基因。PCR產(chǎn)物經(jīng)純化后,將其克隆至載體pMD18-T中,構(gòu)建pMD18-T-HBV質(zhì)粒,經(jīng)酶切和測(cè)序鑒定后,將其定向克隆入真核表達(dá)載體pIRES-neo,獲得真核表達(dá)質(zhì)粒pIRES-neo-HBAg。將該重組表達(dá)質(zhì)粒瞬時(shí)轉(zhuǎn)染人293T細(xì)胞,采用Western blot法、流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光細(xì)胞化學(xué)技術(shù)驗(yàn)證HBV融合抗原的表達(dá)。結(jié)果成功構(gòu)建了HBV融合抗原真核表達(dá)質(zhì)粒pIRES-neo-HBAg,Western blot法、流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光細(xì)胞化學(xué)技術(shù)結(jié)果顯示融合抗原能夠在293T細(xì)胞中表達(dá)。結(jié)論成功構(gòu)建了HBV融合抗原真核表達(dá)質(zhì)粒pIRES-neo-HBAg。
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)細(xì)胞工程研究中心;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 乙型肝炎病毒 HBV融合抗原 真核表達(dá) pIRES-neo T細(xì)胞
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(31100655)
【分類(lèi)號(hào)】：R392.12
【正文快照】： 慢性乙型肝炎治療性藥物的研發(fā)取得了長(zhǎng)足發(fā)展,但是卻不能徹底消除肝細(xì)胞中乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)持續(xù)感染的主要元兇共價(jià)閉合環(huán)狀DNA(covalently closed circular DNA,cccD-NA),導(dǎo)致病毒反復(fù)反彈[1-3]。治療性疫苗則能夠通過(guò)激活細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(cytotoxic T

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 蘇雯靜;乙型肝炎疫苗聯(lián)合B7-H1蛋白疫苗對(duì)HBV轉(zhuǎn)基因小鼠抗HBsAg免疫應(yīng)答的影響[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2012年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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3 楊安鋼;劉家云;馬龍洋;李慶霞;黃紅艷;賈林濤;王成濟(jì);;RNAi穩(wěn)定抑制HepG2 2.2.15細(xì)胞中乙型肝炎病毒S基因的表達(dá)[A];中國(guó)生物工程學(xué)會(huì)第四次會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要集[C];2005年

4 孟忠吉;李磊;李新宇;張正茂;張振華;田擁軍;王寶菊;張s，

本文編號(hào)：954948