本文關(guān)鍵詞：幽門螺桿菌CagA轉(zhuǎn)運相關(guān)蛋白CagE、Cagδ及Cagβ的克隆表達及免疫反應(yīng)性分析

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【摘要】：目的構(gòu)建幽門螺桿菌IV型分泌系統(tǒng)組分中與CagA轉(zhuǎn)運相關(guān)蛋白cagE(HP0544)、cagδ(HP0522)及cagβ(HP0524)編碼基因重組質(zhì)粒,在大腸埃希菌中表達并分析表達蛋白的免疫反應(yīng)性。方法根據(jù)在線預(yù)測的3種蛋白信號肽及跨膜區(qū)特征,以標準菌株HP26695染色體DNA為模板擴增相關(guān)蛋白編碼片段,與表達載體pET28a及pGEX4t-1連接后轉(zhuǎn)入大腸埃希菌BL21(DE3)中誘導(dǎo)表達,分析蛋白表達狀態(tài),用Western blot檢測表達蛋白與HP26695全菌蛋白免疫血清的反應(yīng)。結(jié)果測序及飛行質(zhì)譜鑒定表明成功構(gòu)建CagE、Cagδ及Cagβ的表達載體,其中Cagδ可大量可溶表達,CagE及Cagβ主要以包涵體形式表達。Westernblot顯示3種表達蛋白均能被HP26695全菌蛋白免疫血清識別,但Cagδ的免疫反應(yīng)性較弱。結(jié)論成功獲得HP26695的與CagA轉(zhuǎn)運相關(guān)CagE、Cagδ及Cagβ重組蛋白,其中CagE和Cagβ具有較好的免疫反應(yīng)性,是潛在的藥物靶點和診斷生物標志物。
【作者單位】： 中國疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所 傳染病預(yù)防控制國家重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 幽門螺桿菌 蛋白表達 抗原性
【基金】："十二五國家科技支撐計劃"和"幽門螺桿菌感染診治的多種因素一次性檢驗技術(shù)平臺的研究"項目(No.2012BAI06B02)
【分類號】：R392.1
【正文快照】： 幽門螺桿菌(Helicobacter pylori)是微需氧的革蘭陰性菌,能引起嚴重的胃十二指腸疾病,如消化性潰瘍、胃炎及胃癌等,WHO將其確定為Ⅰ類致癌因子,世界人口中約半數(shù)處于慢性感染狀態(tài)[1]。從不同患者體內(nèi)分離的Hp具有高度的遺傳多樣性,最顯著的差異就是cag致病島(CagPAI)的有無[2]

【相似文獻】

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