本文關(guān)鍵詞：幽門螺桿菌CagA轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白CagE、Cagδ及Cagβ的克隆表達(dá)及免疫反應(yīng)性分析

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【摘要】：目的構(gòu)建幽門螺桿菌IV型分泌系統(tǒng)組分中與CagA轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白cagE(HP0544)、cagδ(HP0522)及cagβ(HP0524)編碼基因重組質(zhì)粒,在大腸埃希菌中表達(dá)并分析表達(dá)蛋白的免疫反應(yīng)性。方法根據(jù)在線預(yù)測(cè)的3種蛋白信號(hào)肽及跨膜區(qū)特征,以標(biāo)準(zhǔn)菌株HP26695染色體DNA為模板擴(kuò)增相關(guān)蛋白編碼片段,與表達(dá)載體pET28a及pGEX4t-1連接后轉(zhuǎn)入大腸埃希菌BL21(DE3)中誘導(dǎo)表達(dá),分析蛋白表達(dá)狀態(tài),用Western blot檢測(cè)表達(dá)蛋白與HP26695全菌蛋白免疫血清的反應(yīng)。結(jié)果測(cè)序及飛行質(zhì)譜鑒定表明成功構(gòu)建CagE、Cagδ及Cagβ的表達(dá)載體,其中Cagδ可大量可溶表達(dá),CagE及Cagβ主要以包涵體形式表達(dá)。Westernblot顯示3種表達(dá)蛋白均能被HP26695全菌蛋白免疫血清識(shí)別,但Cagδ的免疫反應(yīng)性較弱。結(jié)論成功獲得HP26695的與CagA轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)CagE、Cagδ及Cagβ重組蛋白,其中CagE和Cagβ具有較好的免疫反應(yīng)性,是潛在的藥物靶點(diǎn)和診斷生物標(biāo)志物。
【作者單位】： 中國(guó)疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所 傳染病預(yù)防控制國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 幽門螺桿菌 蛋白表達(dá) 抗原性
【基金】："十二五國(guó)家科技支撐計(jì)劃"和"幽門螺桿菌感染診治的多種因素一次性檢驗(yàn)技術(shù)平臺(tái)的研究"項(xiàng)目(No.2012BAI06B02)
【分類號(hào)】：R392.1
【正文快照】： 幽門螺桿菌(Helicobacter pylori)是微需氧的革蘭陰性菌,能引起嚴(yán)重的胃十二指腸疾病,如消化性潰瘍、胃炎及胃癌等,WHO將其確定為Ⅰ類致癌因子,世界人口中約半數(shù)處于慢性感染狀態(tài)[1]。從不同患者體內(nèi)分離的Hp具有高度的遺傳多樣性,最顯著的差異就是cag致病島(CagPAI)的有無[2]

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 鄧穎;楊致邦;王勇;黃進(jìn);張紹蘭;葉翠蓮;;幽門螺桿菌napA-ctxB融合蛋白的基因克隆與表達(dá)[J];免疫學(xué)雜志;2007年02期

2 張建光;段廣才;宋春花;李艷青;王淑玲;張衛(wèi)東;郗園林;;幽門螺桿菌超氧化物歧化酶基因克隆及表達(dá)[J];中國(guó)公共衛(wèi)生;2010年03期

3 范凱,陳學(xué)奎,秦敏,周富昌,涂小萍,雒小玲,楊宗新,楊國(guó)友;幽門螺桿菌尿素酶的純化和鑒定[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;1999年04期

4 白楊;張亞歷;陳燁;王繼德;楊云生;張兆山;周殿元;;幽門螺桿菌粘附素保守區(qū)蛋白的制備及其免疫原性、安全性和粘附作用的體外評(píng)價(jià)[J];現(xiàn)代消化及介入診療;2002年04期

5 宋光耀,高志安,聶洪材,齊鳳杰,席崢,李春宏,孔慶儒;HP感染與胃粘膜腸化中CDX2蛋白表達(dá)的關(guān)系[J];錦州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2005年04期

6 陳陽,李健峰,姬秋彥,閆玲梅,龍海亭,徐維明;幽門螺桿菌oipA基因的克隆及其生物信息學(xué)分析[J];世界華人消化雜志;2005年07期

7 寧云山;李妍;龍敏;董文其;李明;;幽門螺桿菌5種候選疫苗抗原基因的克隆、表達(dá)及抗原性的鑒定[J];世界華人消化雜志;2006年26期

8 寧云山;李妍;羅軍;董文其;李明;;幽門螺桿菌Lpp20抗原的原核表達(dá)及其臨床應(yīng)用[J];廣東醫(yī)學(xué);2007年08期

9 趙玉霞;齊建華;章涵;段廣才;郗園林;;幽門螺桿菌UreB-Omp11融合蛋白的重組疫苗候選株構(gòu)建和融合蛋白的表達(dá)、純化及免疫學(xué)活性[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2007年10期

10 李鵬;劉真;王芳英;;蛋白質(zhì)組學(xué)及其在幽門螺桿菌研究中的應(yīng)用[J];山東醫(yī)藥;2008年19期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 龍敏;;幽門螺桿菌新的疫苗候選抗原NAP蛋白的克隆、表達(dá)和功能鑒定[A];2006中國(guó)微生物學(xué)會(huì)第九次全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2006年

2 白楊;張亞歷;王繼德;陳燁;張兆山;;幽門螺桿菌黏附素AlpA中四種黏附素保守區(qū)蛋白的制備及其免疫原性、安全性和黏附作用的體外評(píng)價(jià)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)消化病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（上冊(cè)）[C];2007年

3 趙卓;陳立;羅萍;余抒;吳超;鄒全明;;幽門螺桿菌尿素酶B亞單位的分段表達(dá)及免疫學(xué)性質(zhì)分析[A];重慶微生物學(xué)會(huì)第九屆會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2009年

4 葉嗣穎;李耿;田擁軍;張正茂;崔斌;宋啟發(fā);熊萍;;幽門螺桿菌對(duì)甲硝唑耐藥性及多重相關(guān)基因DNA和氨基酸序列分析[A];第6次全國(guó)微生物學(xué)與免疫學(xué)大會(huì)論文摘要匯編[C];2004年

5 邵偉;劉成國(guó);楊更發(fā);沈永芳;楊寧敏;許國(guó)強(qiáng);徐誠(chéng)富;厲有名;;幽門螺桿菌分離培養(yǎng)基的質(zhì)量研究[A];2006華東地區(qū)消化病學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編（浙江省分冊(cè)）[C];2006年

6 馮百歲;姚雪華;趙國(guó)強(qiáng);;幽門螺桿菌CagA綠色熒光蛋白真核表達(dá)載體的構(gòu)建[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)消化病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（上冊(cè)）[C];2007年

7 龐智;蕭樹東;;幽門螺桿菌27kDa外膜蛋白的基因克隆及表達(dá)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)消化病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（上冊(cè)）[C];2007年

8 李晶;閆笑梅;孟凡亮;郭風(fēng)華;趙飛;張建中;李寧;湯波;;幽門螺桿菌轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型的建立和初步評(píng)價(jià)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)消化病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（上冊(cè)）[C];2007年

9 龔芳紅;賀松;張德純;劉明方;郭亞楠;;幽門螺桿菌熱休克蛋白A在乳酸乳球菌中的表達(dá)及免疫學(xué)活性分析[A];重慶微生物學(xué)會(huì)第九屆會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2009年

10 張萬岱;徐智民;;幽門螺桿菌中西醫(yī)結(jié)合研究的現(xiàn)狀與展望[A];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)第十三次全國(guó)消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2001年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 本報(bào)記者 馬飛　實(shí)習(xí)生 楊俊堅(jiān);抗原性設(shè)計(jì)或成攻堅(jiān)突破口[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2009年

2 記者謝衛(wèi)群;中國(guó)完成SARS病毒主要基因克隆和蛋白表達(dá)[N];人民日?qǐng)?bào)海外版;2003年

3 記者 錢錚;人體內(nèi)病菌演化,內(nèi)藏遠(yuǎn)古人類遷徙歷程[N];新華每日電訊;2009年

4 胡德榮;生物體內(nèi)痛覺誘發(fā)和維持新機(jī)制被揭示[N];健康報(bào);2008年

5 張宇;開發(fā)可以吃的疫苗[N];無錫日?qǐng)?bào);2010年

6 欣華;肝螺桿菌基因組破譯成功[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2003年

7 王立峰;SOD的市場(chǎng)狀況分析[N];中國(guó)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2003年

8 通訊員 肖鑫 記者 朱智堂;曹雪濤等發(fā)現(xiàn)新型免疫分子[N];健康報(bào);2000年

9 通訊員 朱智堂 肖鑫;我國(guó)免疫學(xué)研究取得重要進(jìn)展[N];科技日?qǐng)?bào);2000年

10 記者 駱紅初;隔離SARS與人體“第三者”露面 全球首個(gè)人源抗體基因庫(kù)建成[N];上�？萍紙�(bào);2003年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 丁紅雷;幽門螺桿菌CagT及CagM蛋白的生物學(xué)性質(zhì)及功能研究[D];西南大學(xué);2010年

2 王華;幽門螺桿菌cag致病島cagI基因功能的研究[D];江蘇大學(xué);2011年

3 曲銀娥;COXⅦa在中老年男子部分雄激素缺乏綜合征中的作用及機(jī)理研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2010年

4 何津巖;人類p100蛋白對(duì)HeLa細(xì)胞周期的影響及其機(jī)制研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2008年

5 邵春紅;幽門螺桿菌響應(yīng)環(huán)境脅迫的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];山東大學(xué);2008年

6 曲偉;幽門螺桿菌在NO壓力下的巰基亞硝基化修飾及蛋白質(zhì)組反應(yīng)特征[D];山東大學(xué);2009年

7 陳曉華;拮抗幽門螺桿菌益生菌的篩選及其干預(yù)機(jī)制的研究[D];江南大學(xué);2011年

8 江紅;幽門螺桿菌空泡毒素基因分段克隆、表達(dá)和活性研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2001年

9 顧青;幽門螺桿菌抗原UreB的基因工程及免疫原性研究[D];浙江大學(xué);2005年

10 康巧珍;幽門螺桿菌中性白細(xì)胞激活蛋白基因克隆表達(dá)及免疫評(píng)價(jià)[D];鄭州大學(xué);2005年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 趙玉霞;幽門螺桿菌融合蛋白UreB-Omp11在大腸桿菌中的表達(dá)與鑒定[D];鄭州大學(xué);2006年

2 王寧;表達(dá)幽門螺桿菌鞭毛粘附素的重組大腸桿菌ghost型疫苗的制備及鑒定[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2005年

3 黃琛;幽門螺桿菌CagA蛋白肽段的基因克隆和表達(dá)[D];福建醫(yī)科大學(xué);2002年

4 劉淼;幽門螺桿菌vacA基因毒性片段與hpaA基因的原核表達(dá)及初步應(yīng)用[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2003年

5 毛小琴;重組VacA蛋黃抗體的制備和體外抗幽門螺桿菌作用的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2005年

6 李海俠;幽門螺桿菌尿素酶B亞單位（UreB）一個(gè)新的B細(xì)胞抗原表位的鑒定[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2007年

7 楊麗娟;幽門螺桿菌H.pylori尿素通道蛋白UreI基因疫苗的初步研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2008年

8 姚蕾;幽門螺桿菌ureB基因及其片段的表達(dá)和免疫研究[D];浙江工商大學(xué);2006年

9 張任飛;幽門螺桿菌重組VacA-CtxB蛋白的原核表達(dá)及免疫原性研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2007年

10 邵春紅;幽門螺桿菌適應(yīng)性蛋白的初步研究[D];山東大學(xué);2005年

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