本文關鍵詞：痰瘀互結證代謝綜合征大鼠模型代謝組學研究

  更多相關文章： 代謝組學 大鼠模型 代謝綜合征 痰瘀互結證

【摘要】：目的:本實驗擬通過建立痰瘀互結證代謝綜合征大鼠模型,進而運用代謝組學技術對模型的血液標本進行分析,嘗試尋找出痰瘀互結證代謝綜合征病變的特征性代謝產物,觀察代謝物的變化與生理、病理的相關聯(lián)系,探尋痰瘀互結證代謝綜合征病變的機制,從而進一步揭示痰瘀互結證代謝綜合征本質。材料與方法:1.大鼠疾病模型的復制健康雄性SPF級Wistar大鼠(動物合格證號:SCXK(遼)2010-0001)38只,體重(180士20)g,適應性喂養(yǎng)1周之后稱取體重,然后按重量進行編號,運用隨機數(shù)字表法隨機分成兩組:空白對照組大鼠(n=10)和模型組(n=28)。空白組自由喂水,基礎飼料喂養(yǎng);模型組自由喂水,高脂高糖飼料喂養(yǎng)。喂養(yǎng)16周后,模型組進行小劑量多次STZ腹腔注射,復制痰瘀互結證代謝綜合征大鼠模型。整個造模時間持續(xù)20周。2.代謝組學研究隨機選取復制成功的痰瘀互結證代謝綜合征大鼠模型8只與空白對照組大鼠模型8只,進行代謝組學研究。運用美國生產的Agilent7890氣相色譜-飛行時間質譜聯(lián)用儀,進行大鼠血清GC-MS代謝組學檢測分析。通過使用LECO Chroma TOF4.3X軟件,并結合Fiehn Rtx5數(shù)據(jù)庫,對原始下機數(shù)據(jù)進行峰提取、數(shù)據(jù)基線過濾和校正、峰對齊、解卷積分析、代謝物物質鑒定和峰面積計算。然后用SIMCA軟件(V14,Umetrics AB,Umea,Sweden)對歸一化后的數(shù)據(jù)進行模式識別多變量分析,并對所得到的代謝指紋圖譜進行主成分分析(PCA),正交偏最小二乘法-判別分析(OPLS-DA),接著利用METLIN、HMDB數(shù)據(jù)庫篩選具有差異的特征性代謝產物,辨識疾病證型潛在的生物標志物。結果:1.大鼠疾病模型的復制:模型組大鼠從造模第4周開始后,與空白組相比較,體重明顯增加,6周后大便異味重,精神困倦,毛色變暗,舌出現(xiàn)瘀斑,質暗。造模8周后模型組大鼠血脂成分的含量與空白對照組大鼠相比,均顯著改變,兩組之間存在統(tǒng)計學差異(P0.05)。造模結束后模型組大鼠出現(xiàn)血液流變學改變,同時出現(xiàn)高血糖、血胰島素升高、胰島素抵抗等診斷指征,符合本研究擬建立的痰瘀互結證代謝綜合征的評估標準。2.代謝組學研究結果:通過代謝組學技術研究,能夠很好的將模型組大鼠與空白對照組大鼠血液代謝產物區(qū)分,兩組有明顯差異性。3.主要標記物:尋找到了與痰瘀互結證代謝綜合征大鼠模型相關聯(lián)的主要生物標記物,主要為N-乙酰-D-葡萄糖胺、3-羥基丁酸、同型半胱氨酸、纈氨酸、亮氨酸、反油酸等20多種代謝物,上述主要標記物共同構成了痰瘀互結證代謝綜合征大鼠模型的代謝組學特征,而這些小分子物質正是體內蛋白質、糖類、脂類等物質代謝紊亂的結果。結論:1.通過長期嗜食肥甘厚味(高糖高脂飼料),結合多次小劑量STZ腹腔注射的造模方法可成功復制出痰瘀互結證代謝綜合征大鼠模型。2.運用代謝組學技術分析痰瘀互結證代謝綜合征大鼠模型的血液樣本,得到的代謝物圖譜明顯有別于正常組大鼠模型代謝物圖譜,找到了與痰瘀互結證代謝綜合征大鼠模型相關的潛在生物標記物。3.發(fā)現(xiàn)了N-乙酰-D-葡萄糖胺、3-羥基丁酸、同型半胱氨酸、纈氨酸、亮氨酸、反油酸等痰瘀互結證代謝綜合征大鼠模型的潛在生物標志物,揭示了痰瘀互結證代謝綜合征的發(fā)生與脂類、糖類、蛋白質代謝紊亂有關,而體內這些小分子化合物可能為痰瘀互結證代謝綜合征中醫(yī)證候的物質基礎。4.代謝組學技術能更好的揭示疾病的中醫(yī)證候模型的本質內涵,代謝組學技術的運用,對于中醫(yī)的科學本質化研究有著深遠的意義。
【關鍵詞】：代謝組學 大鼠模型 代謝綜合征 痰瘀互結證
【學位授予單位】：遼寧中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R259;R-332
【目錄】：

• 中文論著摘要4-6
• 英文論著摘要6-9
• 英文縮略詞表9-10
• 前言10-12
• 論文一 痰瘀互結證代謝綜合征大鼠模型的復制12-21
• 材料與方法12-16
• 實驗結果16-19
• 討論19-20
• 小結20-21
• 論文二 痰瘀互結證代謝綜合征大鼠模型代謝組學研究21-38
• 材料與方法21-25
• 實驗結果25-32
• 討論32-37
• 小結37-38
• 結論38-39
• 本研究創(chuàng)新性的自我評價39-40
• 參考文獻40-42
• 附錄42-60
• 文獻綜述一 代謝綜合征中醫(yī)病因病機研究進展42-50
• 參考文獻48-50
• 文獻綜述二 代謝組學技術在中醫(yī)證候本質研究中概況50-60
• 參考文獻57-60
• 個人簡介60-61
• 在學期間科研成績61-62
• 致謝62

，

本文編號：919360