發(fā)布時間：2017-09-24 04:09

  本文關(guān)鍵詞：RNA結(jié)合蛋白HuR對NF-κB抑制因子α轉(zhuǎn)錄后調(diào)控機制的初步研究

  更多相關(guān)文章： HuR蛋白 NF-κB抑制因子α 轉(zhuǎn)錄后調(diào)控

【摘要】：目的:探討RNA結(jié)合蛋白HuR對NF-κB抑制因子α(IκB-α)轉(zhuǎn)錄后調(diào)控機制。方法:構(gòu)建IκB-αmRNA 3'UTR報告基因真核表達質(zhì)粒,并轉(zhuǎn)染3T3細胞;體外生物素標(biāo)記IκB-αmRNA 3'UTR并進行RNA pull-down;過表達及干擾HuR后,qPCR檢測其對IκB-αmRNA穩(wěn)定性的影響,Western bltting檢測其對IκB-α蛋白表達的影響。結(jié)果:(1)IκB-αmRNA 3'UTR報告基因真核表達質(zhì)粒構(gòu)建成功;(2)報告基因檢測:共轉(zhuǎn)染pcDNA3-HA-HuR質(zhì)粒及IκB-αmRNA 3'UTR報告基因質(zhì)粒后與對照組相比其數(shù)值明顯增高;(3)用生物素標(biāo)記的IκB-αmRNA3'UTR探針進行RNA pull-down,可以檢測到特異性結(jié)合的HuR蛋白;(4)過表達HuR,IκB-αmRNA穩(wěn)定性無明顯變化,蛋白表達明顯上調(diào);干擾HuR表達后,IκB-αmRNA穩(wěn)定性無明顯變化,蛋白表達明顯下調(diào)。結(jié)論:(1)HuR可以與IκB-αmRNA 3'UTR特異性結(jié)合并參與調(diào)節(jié)IκB-αmRNA 3'UTR的功能;(2)HuR對IκB-αmRNA穩(wěn)定性無明顯影響,其主要調(diào)控IκB-α蛋白表達,使其表達上調(diào)。
【作者單位】： 新疆醫(yī)科大學(xué)病理生理學(xué)教研室;南方醫(yī)科大學(xué)病理生理學(xué)教研室;武警新疆總隊醫(yī)院普外科;武警新疆總隊醫(yī)院神經(jīng)外科;寧波大學(xué)醫(yī)學(xué)院組織學(xué)教研室;新疆醫(yī)科大學(xué)機能中心;
【關(guān)鍵詞】： HuR蛋白 NF-κB抑制因子α 轉(zhuǎn)錄后調(diào)控
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(No.81171476) 浙江省杰出青年科學(xué)基金資助項目(No.R2101166) 寧波市創(chuàng)新團隊項目(No.2011B82014)
【分類號】：R346
【正文快照】： RNA結(jié)合蛋白(RNA-binding proteins,RBPs)是近年來發(fā)現(xiàn)的具有多種生物學(xué)作用的分子家族,其中HuR屬于胚胎致死異常視覺家族的RBPs,在體內(nèi)表達廣泛。最初發(fā)現(xiàn)HuR與神經(jīng)分化相關(guān),通過與靶mRNA 3'UTR的ARE結(jié)合,在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控RNA的穩(wěn)定性和蛋白表達。近年發(fā)現(xiàn),HuR與細胞增殖、炎

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本文編號：909256