本文關(guān)鍵詞：四重PCR檢測(cè)致病性嗜水氣單胞菌

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【摘要】：目的建立一種能夠快速準(zhǔn)確地檢測(cè)致病性嗜水氣單胞菌的四重PCR方法。方法根據(jù)致病性嗜水氣單胞菌的絲氨酸蛋白酶(ahpA)基因、氣溶素(aerA)基因和溶血素(hlyA)基因的保守序列以及嗜水氣單胞菌的16SrRNA基因種屬特異性序列分別設(shè)計(jì)4對(duì)特異性引物,通過優(yōu)化各引物濃度、退火溫度和Mg2+濃度,確定了四重PCR的最佳反應(yīng)條件;然后進(jìn)行特異性和敏感性試驗(yàn),并比較其與常規(guī)微生物學(xué)方法對(duì)不同菌株和臨床樣本的檢出率。結(jié)果該方法特異性好,能特異性檢測(cè)并鑒別出嗜水氣單胞菌致病性菌株;檢測(cè)靈敏度高,最低可檢測(cè)到約100fg的嗜水氣單胞菌基因組DNA;對(duì)9株嗜水氣單胞菌的檢測(cè)結(jié)果與常規(guī)微生物學(xué)方法一致,對(duì)56份送檢的水產(chǎn)動(dòng)物樣品的檢出率為21.4%,高于常規(guī)微生物學(xué)方法的16.1%,兩者檢測(cè)結(jié)果符合率為94.6%。結(jié)論成功建立了能同時(shí)檢測(cè)嗜水氣單胞菌16SrRNA、aerA、ahpA和hlyA基因的四重PCR方法,能快速、準(zhǔn)確地對(duì)嗜水氣單胞菌進(jìn)行檢測(cè)并區(qū)分致病性與非致病性菌株。
【作者單位】： 廣西水產(chǎn)研究所;上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院國(guó)家水生動(dòng)物病原庫(kù);
【關(guān)鍵詞】： 嗜水氣單胞菌 S rRNA基因 ahpA基因 aerA基因 hlyA基因 四重PCR
【基金】：廣西科技攻關(guān)項(xiàng)目(桂科攻1123006-5,1355010-3)資助~~
【分類號(hào)】：S852.6;R37
【正文快照】： 致病性嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophila)屬于氣單胞菌科(Aeromonadaceae)氣單胞菌屬(Aeromonas),是一種廣泛存在于水環(huán)境中的病原菌,常引起我國(guó)淡水養(yǎng)殖魚類的暴發(fā)性敗血癥,也能引起爬行類、兩棲類、鳥類以及哺乳類等多種動(dòng)物發(fā)病及感染人類引起腹瀉、敗血癥等,屬典型的人

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 楊守明;王民生;;嗜水氣單胞菌及其對(duì)人的致病性[J];疾病控制雜志;2006年05期

2 沈錦玉;;嗜水氣單胞菌的研究進(jìn)展[J];浙江海洋學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2008年01期

3 儲(chǔ)衛(wèi)華,陸承平;PCR擴(kuò)增特異性16SrDNA和溶血素基因檢測(cè)致病性嗜水氣單胞菌[J];水產(chǎn)學(xué)報(bào);2005年01期

4 付喬芳;邱軍強(qiáng);胡鯤;楊先樂;安健;;嗜水氣單胞菌國(guó)內(nèi)分離株的毒力因子分布與致病性相關(guān)性分析[J];生物學(xué)雜志;2011年06期

5 王遠(yuǎn)微;湯承;于學(xué)輝;王英;岳華;;三重PCR檢測(cè)魚類致病性嗜水氣單胞菌[J];微生物學(xué)報(bào);2008年07期

6 孟雙;白雪梅;王艷;葉長(zhǎng)蕓;;嗜水氣單胞菌實(shí)時(shí)熒光三重TaqMan PCR快速檢測(cè)體系的建立[J];中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào);2012年03期

7 饒靜靜;李壽崧;黃克和;江樹勛;潘群興;;致病性嗜水氣單胞菌多重PCR檢測(cè)方法的建立[J];中國(guó)水產(chǎn)科學(xué);2007年05期

8 朱大玲;李愛華;汪建國(guó);李明;蔡桃珍;胡靖;;嗜水氣單胞菌毒力與毒力基因分布的相關(guān)性[J];中山大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2006年01期

9 盧強(qiáng),任瑞文,王文東,劉明遠(yuǎn),吳秀萍,李學(xué)勤;致病性嗜水氣單胞菌氣溶素基因PCR檢測(cè)方法的建立[J];中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào);2001年04期

10 儲(chǔ)衛(wèi)華;;嗜水氣單胞菌臨床分離株胞外毒力因子的檢測(cè)[J];中國(guó)獸醫(yī)雜志;2006年01期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 林居純;羅忠俊;舒剛;呂程;;嗜水氣單胞菌臨床分離菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性調(diào)查[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2009年15期

2 高建忠;魏雪;童琰;黃玉邦;;MGB探針實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)致病性嗜水氣單胞菌[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2009年19期

3 吳燕燕;李來好;李鳳霞;楊賢慶;;春夏季養(yǎng)殖羅非魚體內(nèi)食源性致病菌分析[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2010年04期

4 葛晨霞;李月紅;張培軍;吳東明;付云紅;;致病性嗜水氣單胞菌氣溶素基因PCR檢測(cè)方法的建立[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2010年34期

5 周光;周群蘭;謝駿;習(xí)丙文;徐跑;;嗜水氣單胞菌流行病學(xué)研究進(jìn)展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2011年23期

6 胡王;蔣啟歡;范騰飛;江河;葉應(yīng)旺;;鳊魚出血病嗜水氣單胞菌的分離·鑒定與ERIC-PCR指紋圖譜研究[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2012年04期

7 蔣啟歡;葉應(yīng)旺;胡王;江河;陸劍鋒;;嗜水氣單胞菌毒力因子及病害控制技術(shù)研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技;2012年06期

8 郭闖,王永坤;嗜水氣單胞菌研究進(jìn)展[J];水產(chǎn)科學(xué);2003年06期

9 鄭偉,盧強(qiáng),韓文瑜,張雅斌,劉艷輝;耐喹諾酮類藥物嗜水氣單胞菌的分離鑒定及電鏡觀察[J];水產(chǎn)科學(xué);2004年04期

10 劉雙鳳;鄒作宇;韓志忠;曲立;董宏偉;徐連偉;蔡勛;;施氏鱘病原嗜水氣單胞菌ELISA快速檢測(cè)方法的研究[J];淡水漁業(yè);2009年06期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 潘曉藝;沈錦玉;郝貴杰;;嗜水氣單胞菌TPS-30株絲氨酸蛋白酶基因與溶血素基因在大腸桿菌中的融合表達(dá)[A];經(jīng)濟(jì)發(fā)展方式轉(zhuǎn)變與自主創(chuàng)新——第十二屆中國(guó)科學(xué)技術(shù)協(xié)會(huì)年會(huì)（第三卷）[C];2010年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 陳德芳;斑點(diǎn)叉尾洶海豚鏈球菌病病原學(xué)、病理學(xué)和診斷方法研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

2 盧春霞;復(fù)方植物提取物對(duì)嗜水氣單胞菌抑菌作用的研究[D];江南大學(xué);2011年

3 徐海圣;中華絨螯蟹常見病原的分離鑒定、致病及免疫機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2004年

4 朱大玲;嗜水氣單胞菌毒力基因及基因工程疫苗[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院（水生生物研究所）;2006年

5 高玉瓊;十九種植物的揮發(fā)油成分及部分生物活性研究[D];貴州大學(xué);2008年

6 程方俊;黃顙魚潰瘍綜合征病原菌及主要毒力因子研究[D];西南大學(xué);2012年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 田甜;魚源嗜水氣單胞菌的分離鑒定及耐藥性研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

2 孫婧;坎氏弧菌TLH溶血素基因的克隆表達(dá)、蛋白純化及活性研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2010年

3 王月娜;南方人工養(yǎng)殖史氏鱘大量死亡的病理學(xué)研究[D];集美大學(xué);2011年

4 王春瑞;嗜水氣單胞菌的分子流行病學(xué)調(diào)查及其兩種分型方法的研究[D];寧波大學(xué);2011年

5 劉筍;海水細(xì)菌分泌性蛋白的篩選、分析及其在載體疫苗中的應(yīng)用[D];上海海洋大學(xué);2011年

6 張波;青魚腸道出血病病原菌的分離鑒定與疫苗的初步研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

7 王美珍;耐藥嗜水氣單胞菌的外膜結(jié)構(gòu)和免疫原性變化的初步研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

8 肖丹;射陽(yáng)鹽場(chǎng)地區(qū)鯽源嗜水氣單胞菌分子流行病學(xué)研究[D];上海海洋大學(xué);2011年

9 付喬芳;嗜水氣單胞菌毒力特性研究[D];上海海洋大學(xué);2011年

10 李小勇;海洋魚類細(xì)菌性病原微生物GAPDH蛋白的定位和功能初步研究[D];華東理工大學(xué);2011年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 郭闖,王永坤;嗜水氣單胞菌研究進(jìn)展[J];水產(chǎn)科學(xué);2003年06期

2 馬家好,李學(xué)勤,王振英,楊振國(guó),王文東;Dot-ELISA快速檢測(cè)魚類運(yùn)動(dòng)性氣單胞菌的研究[J];大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào);1997年03期

3 儲(chǔ)衛(wèi)華,于勇;鱘魚嗜水氣單胞菌的分離與鑒定[J];淡水漁業(yè);2003年02期

4 賀路，艾曉輝，，左文功;牛蛙腹水病病原研究[J];淡水漁業(yè);1995年03期

5 齊彩霞，羅遠(yuǎn)忠，吳佩鏈，丁玉娟，湯鴻;鱉穿孔病的病原菌及其防治的研究[J];淡水漁業(yè);1995年04期

6 陶林;牛蛙紅腿病、爛皮病及并發(fā)癥的防治[J];淡水漁業(yè);1998年05期

7 牛勝田;市售瓶裝水的微生物學(xué)質(zhì)量及有關(guān)條例[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).衛(wèi)生學(xué)分冊(cè);1994年01期

8 仉慶文,高婷,馮曉媛;嗜水氣單胞菌污染飲用水引起的急性腹瀉暴發(fā)[J];環(huán)境與健康雜志;1993年03期

9 李學(xué)勤,王振英,馬家好,楊振國(guó),王文東,黎城耀,岳玉環(huán);淡水養(yǎng)殖魚類主要細(xì)菌性傳染病快速診斷的研究——用SPA-CoA檢測(cè)16株魚類致病菌[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);1997年05期

10 徐景野,傅小紅,于梅,樓麗波;用直接分離法檢測(cè)貝(甲)殼類海產(chǎn)品中的致病性氣單胞菌[J];海峽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2002年01期

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 陳懷青;陸承平;;嗜水氣單胞菌S層缺失突變株的構(gòu)建[J];南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);1996年02期

2 任燕;陸承平;姚火春;;嗜水氣單胞菌溫敏胞外蛋白酶基因eprJ的克隆與檢測(cè)[J];中國(guó)水產(chǎn)科學(xué);2006年06期

3 姚祥春;金偉軍;張禮星;鐘衛(wèi)鴻;;單胞菌產(chǎn)幾丁質(zhì)酶的酶學(xué)性質(zhì)研究[J];現(xiàn)代食品科技;2008年03期

4 王建;沈莉萍;徐鋒;葛菲菲;;企鵝源嗜水氣單胞菌的分離鑒定[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2009年05期

5 巢偉;劉永杰;陸承平;;基因組步移技術(shù)擴(kuò)增嗜水氣單胞菌J-1株脂酶基因全長(zhǎng)及原核表達(dá)[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2010年09期

6 秦生巨;舒泉;;噬菌蛭弧菌對(duì)嗜水氣單胞菌裂解作用的研究[J];中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志;1991年02期

7 邱軍強(qiáng);楊先樂;程訓(xùn)佳;;嗜水氣單胞菌毒力因子特性及作用機(jī)理研究進(jìn)展[J];中國(guó)病原生物學(xué)雜志;2009年08期

8 鐘妮娜;王文龍;吳宥析;徐頂;;人工感染西伯利亞鱘體內(nèi)嗜水氣單胞菌分布的免疫組織化學(xué)檢測(cè)[J];中國(guó)獸醫(yī)科學(xué);2010年08期

9 王娜;張小軍;劉永杰;陸承平;;嗜水氣單胞菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)研究進(jìn)展[J];河北科技師范學(xué)院學(xué)報(bào);2011年01期

10 付喬芳;邱軍強(qiáng);胡鯤;楊先樂;安健;;嗜水氣單胞菌毒力基因在傳代過程中的穩(wěn)定性研究[J];生物技術(shù)通報(bào);2011年09期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 吳謀勝;彭宣憲;;采用蛋白質(zhì)組學(xué)方法研究嗜水氣單胞菌的生長(zhǎng)代謝[A];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)第八屆會(huì)員代表大會(huì)暨全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2001年

2 方勤美;林天龍;龔暉;陳紅燕;陳日升;歐陽(yáng)歲東;;嗜水氣單胞菌β-hemA重組菌的優(yōu)化培養(yǎng)及其生長(zhǎng)曲線的測(cè)定[A];福建省科協(xié)第三屆學(xué)術(shù)年會(huì)衛(wèi)星會(huì)議——?jiǎng)?chuàng)建精品畜牧業(yè)研討會(huì)論文集[C];2003年

3 金義文;江建平;謝鋒;鄭中華;徐俊曉;;基于12S和16S rDNA序列的湍蛙屬部分物種的系統(tǒng)關(guān)系[A];四川省動(dòng)物學(xué)會(huì)第八次會(huì)員代表大會(huì)暨第九次學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2004年

4 章戴榮;白林;周東勝;;利用T-RFLP技術(shù)分析微生物的多樣性[A];第三屆第八次全國(guó)學(xué)術(shù)研討會(huì)暨動(dòng)物微生態(tài)企業(yè)發(fā)展戰(zhàn)略論壇論文集[C];2006年

5 武春媛;李芳柏;周順桂;李曉敏;;一株具有偶氮染料還原活性的腐殖質(zhì)還原菌[A];中國(guó)土壤學(xué)會(huì)第十一屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨第七屆海峽兩岸土壤肥料學(xué)術(shù)交流研討會(huì)論文集（下）[C];2008年

6 彭宣憲;陳子s

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