本文關(guān)鍵詞：大豆24 kDa油體蛋白基因與aFGF融合轉(zhuǎn)化紅花的研究

  更多相關(guān)文章： aFGF 油體蛋白 紅花

【摘要】：目的:利用紅花表達(dá)酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(acidic fibroblast growth factor,aFGF),為利用植物生物反應(yīng)器規(guī)�；a(chǎn)aFGF奠定基礎(chǔ)。方法:將人源aFGF基因改造為植物偏好性的aFGF基因序列,通過PCR搭橋技術(shù)克隆植物偏好的aFGF基因,利用酶切連接方法構(gòu)建植物油體表達(dá)載體,通過凍融法轉(zhuǎn)到根瘤農(nóng)桿菌EHA105,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)化到塔城紅花中,對(duì)轉(zhuǎn)化紅花進(jìn)行PCR,Southern雜交,RT-PCR分子檢測(cè)。結(jié)果:擴(kuò)增出植物偏好的aFGF基因的全長(zhǎng)序列,并與大豆油體蛋白基因Doil基因融合,成功地插入到改造好的含有大豆油體蛋白啟動(dòng)子表達(dá)載體中,探索了進(jìn)行紅花遺傳轉(zhuǎn)化的最佳條件,成功獲得單位點(diǎn)插入的3個(gè)獨(dú)立轉(zhuǎn)化紅花植株,在轉(zhuǎn)錄水平都有大小一致的aFGF的表達(dá)。結(jié)論:該實(shí)驗(yàn)成功構(gòu)建了含aFGF植物油體表達(dá)載體,并篩選出最佳的遺傳轉(zhuǎn)化條件,A為0.6,侵染時(shí)間為10 min,共培養(yǎng)3 d,獲得了aFGF轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)的轉(zhuǎn)基因紅花植株,這將紅花油體蛋白本身的皮膚保護(hù)作用,與FGFs的創(chuàng)傷修復(fù)作用累加,快速開發(fā)出外用創(chuàng)傷藥物奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院;長(zhǎng)春師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)生物反應(yīng)器與藥物開發(fā)教育部工程研究中心;
【關(guān)鍵詞】： aFGF 油體蛋白 紅花
【基金】：國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863)項(xiàng)目(SQ2010AA1000691008) 教育部科技創(chuàng)新工程重大項(xiàng)目培育基金項(xiàng)目(70S018) 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)2012年校內(nèi)基金項(xiàng)目
【分類號(hào)】：R346
【正文快照】： 酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(acidic fibroblastgrowth factor,aFGF)可促進(jìn)表皮細(xì)胞的有絲分裂,從而促進(jìn)表皮細(xì)胞的增殖,加速創(chuàng)面愈合[1-3]。它在多種疾病中表現(xiàn)出了神經(jīng)保護(hù)作用,修復(fù)損傷的神經(jīng)元[4-6]。目前對(duì)aFGF的表達(dá),純化研究主要集中在微生物表達(dá)系統(tǒng)中,利用植物生產(chǎn)aFGF

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 周云;楊松杰;;紅花的組織培養(yǎng)及基因工程研究[J];安康學(xué)院學(xué)報(bào);2008年02期

2 馬艷;金小寶;朱家勇;;酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子及其在創(chuàng)傷愈合中的應(yīng)用[J];廣東醫(yī)學(xué);2006年12期

3 陳再剛;劉仁華;胡廷章;;農(nóng)桿菌介導(dǎo)法的植物遺傳轉(zhuǎn)化[J];重慶三峽學(xué)院學(xué)報(bào);2006年03期

4 楊晶;李天航;熊麗東;龐實(shí)峰;李校X;;植物生物反應(yīng)器的研究進(jìn)展[J];生物工程學(xué)報(bào);2009年05期

5 秦玲,李明,王永熙,韓禮星,黃貞光,趙改榮;根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)蘋果遺傳轉(zhuǎn)化研究進(jìn)展[J];西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2002年04期

6 楊晶;李海燕;付宏歧;劉秀明;李校X;;紅花遺傳轉(zhuǎn)化受體系統(tǒng)的建立及轉(zhuǎn)酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子aFGF的初步研究[J];中國(guó)中藥雜志;2010年04期

7 付小兵;生長(zhǎng)因子促(抑)創(chuàng)傷修復(fù)的臨床應(yīng)用與展望[J];中華創(chuàng)傷雜志;1998年06期

8 李洪清,李美茹;影響農(nóng)桿菌介導(dǎo)植物基因轉(zhuǎn)化的因素問題[J];植物生理學(xué)通訊;1999年02期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉靜;張?jiān)?劉慶忠;高玉嬌;;抗生素對(duì)青香蕉蘋果葉片再生的影響[J];山東農(nóng)業(yè)科學(xué);2009年07期

2 張曉東;李利斌;宋宜現(xiàn);李化銀;劉立峰;高玲;高建偉;;大白菜高效穩(wěn)定遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立[J];山東農(nóng)業(yè)科學(xué);2010年02期

3 張寶瓊;范眸天;屈云慧;于麗霞;李涵;;利用卡那霉素篩選非洲菊轉(zhuǎn)基因植株的技術(shù)研究[J];安徽農(nóng)學(xué)通報(bào)(上半月刊);2009年03期

4 劉淑芳;賀永明;;梨遺傳轉(zhuǎn)化研究進(jìn)展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2007年09期

5 邢瑞丹;劉慶忠;陳新;李亞東;;越橘組織培養(yǎng)及基因工程的研究進(jìn)展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2009年20期

6 徐巖;肖艷雙;杜金霞;汪洪;鄭偉;李營(yíng);龐實(shí)鋒;;農(nóng)桿菌介導(dǎo)油菜油體基因與堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子融合基因轉(zhuǎn)化油菜研究[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2009年27期

7 任佑華;任佐華;;基因工程技術(shù)在油菜遺傳改良中的應(yīng)用[J];現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技;2008年08期

8 曹慧穎;夏潤(rùn)璽;呂淑霞;馬鏑;姜義仁;秦萍;;提高農(nóng)桿菌介導(dǎo)番茄遺傳轉(zhuǎn)化效率的研究[J];北方園藝;2008年01期

9 卞錦國(guó),董戴玉,鄧曉輝,任梅玉;局部應(yīng)用rhGM-CSF治療化療后口腔粘膜炎[J];白血病.淋巴瘤;2001年01期

10 程林梅,曹秋芬,高洪文,黃靜,孟玉平;菊苣再生體系建立及轉(zhuǎn)AFL2基因的研究[J];草地學(xué)報(bào);2004年03期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 楊廣東;李艷娥;上官曉霞;;大白菜遺傳轉(zhuǎn)化系統(tǒng)優(yōu)化的研究[A];中國(guó)園藝學(xué)會(huì)第四屆青年學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];2000年

2 金萬梅;鞏振輝;呂元紅;;芥菜植株原位真空滲入遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)的研究[A];中國(guó)園藝學(xué)會(huì)第六屆青年學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];2004年

3 張麗;王國(guó)英;張玉星;賈志國(guó);;生物技術(shù)在梨樹研究中的應(yīng)用[A];全國(guó)第四屆梨科研、生產(chǎn)與產(chǎn)業(yè)化學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2005年

4 全國(guó)良;汪紀(jì)紅;陳毅麗;;CO_2激光治療71例化膿性肉芽腫的療效觀察[A];上海市激光學(xué)會(huì)2005年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2005年

5 楊晶;李海燕;李校X;;含有aFGF-GFP融合基因的植物表達(dá)載體的構(gòu)建及其在紅花中的瞬時(shí)表達(dá)研究[A];2010年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十屆中國(guó)藥師周論文集[C];2010年

6 張立平;楊靜華;李天然;姚裕琪;張鶴齡;;表達(dá)葡萄糖氧化酶基因抗晚疫病馬鈴薯的培育[A];中國(guó)作物學(xué)會(huì)馬鈴薯專業(yè)委員會(huì)2000年年會(huì)論文集[C];2000年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 趙鑫;優(yōu)質(zhì)藍(lán)莓轉(zhuǎn)LEA基因及耐寒性分析研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2011年

2 付宏歧;利用轉(zhuǎn)基因煙草和紅花表達(dá)成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子21（FGF21）的研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

3 尚霄麗;獼猴桃、棗高效再生體系的建立及農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化研究[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

4 詹亞光;白樺的組織培養(yǎng)和遺傳轉(zhuǎn)化研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2001年

5 尹明安;胡蘿卜（Daucus carota）抗凍蛋白基因的克隆及其對(duì)番茄（Lycopersicon esculentum）的轉(zhuǎn)化[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2001年

6 曹必好;結(jié)球甘藍(lán)抗病基因克隆和分離的研究[D];西南農(nóng)業(yè)大學(xué);2002年

7 曾黎輝;農(nóng)桿菌介導(dǎo)荔枝（Litchi chinensis Sonn.）遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立及導(dǎo)入LEAFY基因研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2002年

8 陳廷速;人表皮生長(zhǎng)因子基因的克隆、表達(dá)及其在植物中的遺傳轉(zhuǎn)化研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2002年

9 陶晶;東北主要楊樹抗鹽機(jī)理及抗性品種選育的研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2002年

10 劉寶輝;玉米蔗糖磷酸合成酶（SPS）基因的克隆及對(duì)甜菜遺傳轉(zhuǎn)化的研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 盧小三;兩個(gè)楊樹無性系再生體系的建立及抗蟲基因Cry1C+9C轉(zhuǎn)化的初步研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

2 王長(zhǎng)憲;利用基因工程創(chuàng)造香樟抗寒樹種新種質(zhì)技術(shù)研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

3 高琳娜;黃金菊組織培養(yǎng)及植株再生體系的建立[D];遼寧師范大學(xué);2010年

4 程明珠;楊樹優(yōu)良無性系再生體系的建立及轉(zhuǎn)Bt基因的研究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

5 趙鑫;特異性啟動(dòng)子調(diào)控ACC氧化酶反義基因載體構(gòu)建及對(duì)甜瓜‘玉金香’的轉(zhuǎn)化[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

6 李杜娟;堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)環(huán)磷酰胺致小鼠生精功能損害促修復(fù)作用及其機(jī)制的研究[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2005年

7 劉洪超;民間驗(yàn)方地骨膏藥效學(xué)的初步研究[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2010年

8 劉瑩;根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的rolB基因轉(zhuǎn)化煙草的研究[D];中南林業(yè)科技大學(xué);2010年

9 羅園園;農(nóng)桿菌介導(dǎo)無標(biāo)記耐鹽基因水稻高效轉(zhuǎn)化系統(tǒng)的建立[D];浙江工商大學(xué);2011年

10 陳佳平;小麥與葉銹菌互作體系中TaHIR2基因克隆及其特性分析[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 高俊山,林毅,葉興國(guó),馬傳喜;植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)和方法概述[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2003年05期

2 周云;楊松杰;;紅花的組織培養(yǎng)及基因工程研究[J];安康學(xué)院學(xué)報(bào);2008年02期

3 郭欽麗,汪小鳳,孟娟,鄭青;非促有絲分裂型人酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)細(xì)胞增殖活性的影響[J];廣東醫(yī)學(xué);2005年06期

4 潘增光,鄧秀新;蘋果組織培養(yǎng)再生技術(shù)研究進(jìn)展[J];果樹科學(xué);1998年03期

5 師校欣,杜國(guó)強(qiáng),高儀,馬寶qk,肖建會(huì),賈建航;蘋果離體葉片高效再生不定芽技術(shù)研究[J];果樹科學(xué);1999年04期

6 程備久,田秋元,李展,周立人;離子注入法導(dǎo)入外源DNA引起陸地棉性狀變異的研究[J];核農(nóng)學(xué)報(bào);1996年03期

7 陳喜文,范暉,裘立群,王其會(huì);AgNO_3對(duì)蘋果葉片培養(yǎng)的影響及其與乙烯產(chǎn)生的關(guān)系[J];核農(nóng)學(xué)報(bào);1997年01期

8 王國(guó)英,杜天兵,張宏,謝友菊,戴景瑞,米景九,李太源,田穎川,喬利亞,莽克強(qiáng);用基因槍將Bt毒蛋白基因轉(zhuǎn)入玉米及轉(zhuǎn)基因植株再生[J];中國(guó)科學(xué)(B輯 化學(xué) 生命科學(xué) 地學(xué));1995年01期

9 許華,鄭青,姚成燦,楊曉明,王艷萍,李校;重組人酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子促進(jìn)大鼠燙傷愈合的研究[J];暨南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版);2003年02期

10 李衛(wèi),郭光沁,鄭國(guó)，

本文編號(hào)：901197