本文關(guān)鍵詞：柯薩奇病毒B5巢式RT-PCR檢測方法的建立

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【摘要】：目的:建立一種快速、靈敏、特異的柯薩奇病毒B5(CVB5)檢測方法。方法:根據(jù)GenBank發(fā)表的CVB5河南分離株全基因組序列,在其VP1區(qū)設(shè)計并合成巢式RT-PCR引物,優(yōu)化PCR反應(yīng)條件,建立檢測CVB5的巢式RT-PCR方法。將已測得TCID50的病毒標(biāo)準(zhǔn)株進(jìn)行10倍梯度稀釋后用上述方法檢測,以評價該方法的靈敏性;將5株不同的CVB5毒株和EV71等4株其他腸道病毒毒株及陰性對照用該方法進(jìn)行擴(kuò)增,以檢測其特異性。用建立的巢式RT-PCR方法對52份病毒性腦炎病例樣本進(jìn)行檢測。結(jié)果:該方法對CVB5的兩輪PCR擴(kuò)增敏感性分別為10TCID50和10-4TCID50;所有CVB5毒株用該方法擴(kuò)增結(jié)果均為陽性,所選其他腸道病毒擴(kuò)增結(jié)果均為陰性。52份臨床病例樣本中檢出10份CVB5陽性,陽性率為19.23%。結(jié)論:所建立的CVB5巢式RT-PCR檢測方法具有良好的靈敏度和特異度。
【作者單位】： 鄭州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院流行病學(xué)教研室;鄭州市疾病預(yù)防控制中心傳染病防治科;河南省疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所;鄭州市兒童醫(yī)院感染性疾病科;
【關(guān)鍵詞】： 柯薩奇病毒B 巢式RT-PCR 檢測
【基金】：河南省醫(yī)學(xué)科技攻關(guān)基金資助重大項目201001015 河南省醫(yī)學(xué)科技攻關(guān)計劃普通項目201102017 河南省醫(yī)學(xué)科技攻關(guān)計劃省部共建項目201201003
【分類號】：R373
【正文快照】： 近年來,河南省暴發(fā)多起病毒性腦炎,經(jīng)檢測主要由柯薩奇病毒B5(coxsackie virus B5,CVB5)引起[1]。CVB5是一種常見的能引起病毒性腦炎的腸道病毒,屬于腸道病毒屬小核糖核酸病毒,無包膜,單股正鏈RNA[2],其引起的病毒性腦炎在我國廣泛存在[3-4]。病毒的分離培養(yǎng)與PCR擴(kuò)增測序是

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 賀榮蓮,杜堅,蘭美益,黃紅梅,吳健敏,蔣冬福,韋志鋒;雞傳染性腔上囊病病毒的提純和檢測[J];中國獸醫(yī)科技;1999年12期

2 劉業(yè)兵,高崧,彭大新,張如寬,劉秀梵;禽病原性大腸桿菌Ⅰ型菌毛單克隆抗體的研制及其對分離株的檢測[J];中國獸醫(yī)學(xué)報;2000年02期

3 辛忠濤,李君文,王新為,宋農(nóng),鄭金來,王中民,靳連群;一步多重PCR同時檢測甲型肝炎和脊髓灰質(zhì)炎病毒研究[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;2000年04期

4 孫逢明;端粒酶活性檢測方法的研究概況[J];海峽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2001年05期

5 李斯明,葉春婷,鄒海燕,彭燕豪,楊小紅;高純度豬軟骨II型膠原的制備與檢測[J];生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志;2001年04期

6 婁沂春;使用中的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)儀的溫度分布及維護(hù)[J];實驗室研究與探索;2001年02期

7 聶練兵;轉(zhuǎn)基因作物及其檢測技術(shù)與安全性評價問題[J];種子科技;2001年03期

8 蔣軍喜,李桂新,周雪平;玉米矮花葉病毒研究進(jìn)展[J];微生物學(xué)通報;2002年05期

9 胡清海,劉曉文,趙世華,張知良,丁鏟,苗晉鋒,劉華雷,趙東偉;應(yīng)用PCR技術(shù)檢測鴨疫里默氏桿菌的研究[J];中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報;2002年06期

10 劉競麗,李勁頻;檢測T細(xì)胞受體重排切除環(huán)的意義及應(yīng)用研究[J];國外醫(yī)學(xué).免疫學(xué)分冊;2002年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 姜伏;劉寶山;何建斌;;環(huán)介導(dǎo)等溫基因擴(kuò)增技術(shù)[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜傳染病學(xué)分會第七屆全國會員代表大會暨第十三次學(xué)術(shù)研討會論文集（上冊）[C];2009年

2 楊波;楊素玲;;植物生長物質(zhì)的測定和定位技術(shù)研究[A];2005年全國植物生長物質(zhì)研討會論文摘要匯編[C];2005年

3 文明;岳筠;周碧君;王開功;;山羊痘病毒P32基因的PCR-RFLP分析[A];第二屆全國人畜共患病學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

4 陳巖;陳洪俊;;如何用分子數(shù)據(jù)進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系分析[A];昆蟲學(xué)研究進(jìn)展[C];2005年

5 李雪梅;程安春;汪銘書;;間接原位RT-PCR檢測石蠟切片中PRRSV核酸方法的建立[A];第六屆全國會員代表大學(xué)暨第11次學(xué)術(shù)研討會論文集（上）[C];2005年

6 侯文生;何琳;吳小鷹;彭承琳;;手指運動生理特征研究[A];2008年醫(yī)療儀器學(xué)術(shù)年會暨理事會論文匯編[C];2008年

7 林居純;馬馳;陳雅莉;覃春紅;張輝建;;禽源金黃色葡萄球菌耐藥性檢測[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)藥理毒理學(xué)分會第十次研討會論文摘要集[C];2009年

8 劉淑英;齊景偉;梁化春;徐萌杰;;綿羊肺腺瘤病毒的斑點雜交技術(shù)檢測[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)病理學(xué)分會第十六次學(xué)術(shù)研討會、中國病理生理學(xué)會動物病理生理專業(yè)委員會第十五次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2009年

9 臧琳;張璐;宋德武;母連志;叢彥龍;丁壯;;檢測鵝源新城疫病毒RT-PCR方法的建立與應(yīng)用[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜傳染病學(xué)分會第七屆全國會員代表大會暨第十三次學(xué)術(shù)研討會論文集（下冊）[C];2009年

10 梅世月;李世博;魏綠;席真;;DNA/RNA熒光探針在示蹤細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程中的應(yīng)用[A];中國化學(xué)會第27屆學(xué)術(shù)年會第03分會場摘要集[C];2010年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 記者 連雅婕　通訊員 于柏林 于洋;長春應(yīng)化所 檢測蛋白質(zhì)有了新方法[N];長春日報;2010年

2 本報記者 張淑義　通訊員 李冬燕;H5亞型禽流感病毒檢測再提速[N];中國國門時報;2010年

3 楊蕾;蛋白質(zhì)分離檢測關(guān)鍵技術(shù)研究獲突破[N];中國食品報;2010年

4 記者 姚琳　通訊員 韋萬春;靈長類實驗動物檢測重點實驗室通過驗收[N];廣西日報;2011年

5 通訊員 梁淡麗　記者 劉傳書;為人類基因組結(jié)構(gòu)變異檢測提供新方法[N];科技日報;2011年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 張煥容;偽狂犬病病毒、豬細(xì)小病毒和流行性乙型腦炎病毒檢測基因芯片的構(gòu)建及檢測技術(shù)研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

2 馬孟根;豬源致病性沙門氏菌耐藥基因PCR和基因芯片檢測技術(shù)研究[D];四川大學(xué);2005年

3 劉金華;曲霉多基因系統(tǒng)發(fā)育分析及病原性曲霉快速檢測方法的建立[D];吉林大學(xué);2009年

4 王瑞琳;SARS冠狀病毒分離鑒定、疫苗構(gòu)建及免疫血清制備研究[D];吉林大學(xué);2006年

5 徐桂云;DNA電化學(xué)傳感器的制備及其在轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)品檢測中的應(yīng)用[D];中國海洋大學(xué);2007年

6 丁天兵;日本腦炎病毒抗獨特型單克隆抗體雜交瘤的建立及其初步應(yīng)用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2000年

7 沈宏輝;脊髓灰質(zhì)炎病毒Sabin Ⅰ在SARS患者中的檢測及其病毒拯救[D];吉林大學(xué);2012年

8 徐麗廣;基于納米材料自組裝的DNA檢測及應(yīng)用研究[D];江南大學(xué);2012年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 鄭林英;間接夾心ELISA檢測鴨腫頭敗血癥病毒的研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

2 陽玉彪;我國小型豬內(nèi)源性反轉(zhuǎn)錄病毒的檢測與五指山毒株全長cDNA克隆的構(gòu)建[D];廣西大學(xué);2005年

3 田相軍;豬水泡病病毒RNA的檢測及VP1基因在原核中的表達(dá)[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

4 萬志香;應(yīng)用DNA-納米金探針的目視化甲型肝炎病毒檢測基因芯片的研究[D];武漢大學(xué);2005年

5 樓凱凱;ATP生物發(fā)光法檢測微生物總量及其自動原位分析的研究[D];浙江大學(xué);2006年

6 馬志科;秦川牛心肌細(xì)胞色素C和輔酶Q_（10）提取純化及檢測的研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2006年

7 岳田芳;海藻希瓦氏菌發(fā)酵產(chǎn)生河豚毒素的提取與檢測[D];中國海洋大學(xué);2008年

8 田明堯;多亞型流感和新城疫病毒診斷基因芯片的初步研究[D];吉林大學(xué);2008年

9 王宏魁;河南株P(guān)PV的分離鑒定及VP2基因的克隆與序列分析[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

10 逯美紅;太赫茲技術(shù)在毒品及玉米種子鑒定識別中的應(yīng)用[D];首都師范大學(xué);2006年

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本文編號：901415