本文關(guān)鍵詞：尿道致病性大腸桿菌fimA基因的克隆與表達(dá)

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【摘要】：目的對(duì)尿道致病性大腸桿菌(UPEC)132編碼Ⅰ型菌毛的結(jié)構(gòu)基因fimA進(jìn)行克隆與表達(dá),建立免疫學(xué)檢測(cè)方法。方法采用PCR方法擴(kuò)增fimA基因,定向克隆pET32a載體,原核表達(dá)獲得FimA重組蛋白;免疫小鼠制備FimA多克隆抗體;建立全菌ELISA方法,檢測(cè)UPEC132的Ⅰ型菌毛表型。結(jié)果 PCR擴(kuò)增fimA全基因,構(gòu)建重組質(zhì)粒pET32a-fimA,經(jīng)轉(zhuǎn)化構(gòu)建重組菌E.coli BL21(DE3)/pET32a-fimA;經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)及鎳親和層析純化獲得重組蛋白FimA;制備的FimA多克隆抗體效價(jià)≥1∶51 200,Western blot顯示其良好的特異性;全菌ELISA獲得滿意結(jié)果。結(jié)論成功地克隆UPECⅠ型菌毛的結(jié)構(gòu)基因fimA,制備的多克隆抗體為UPEC的檢測(cè)和致病性的研究奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 天津市疾病預(yù)防控制中心病原生物檢測(cè)所;天津醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 尿道致病性大腸桿菌 fimA 克隆 表達(dá) 全菌ELISA
【基金】：教育部高等學(xué)校博士點(diǎn)基金(20070062010)
【分類號(hào)】：R378
【正文快照】： 泌尿道感染(urinary tract infection,UTI)是臨床常見病。大腸桿菌是UTI的主要致病菌,引起泌尿道感染的大腸桿菌被稱為尿道致病性大腸桿菌(uropathogenic Escherichia coli,UPEC)。菌毛是UPEC的主要毒力因子之一,主要包括P菌毛(P fimbriae)和Ⅰ型菌毛(typeⅠfimbriae)。菌毛

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1 牛亞梅,王e，

本文編號(hào)：863848