發(fā)布時間：2024-06-29 06:18

　　目的用振蕩法制備脊髓脫細胞支架修復同種異體大鼠脊髓缺損,觀察術(shù)后大鼠行為學及組織再生情況。為脊髓缺損后修復提供新的研究思路。方法將30只SD大鼠脊髓分別用50 ml 3%聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)和2%脫氧膽酸鈉溶液在搖床上做振蕩處理,對比處理前后細胞殘留情況及組織的空間結(jié)構(gòu),了解支架本身的組織構(gòu)成。將90只SD大鼠隨機分成空白對照組、單純脊髓缺損組和支架移植組。切除單純脊髓缺損組和支架移植組大鼠腰椎9～10節(jié)段,移植脫細胞支架至支架移植組大鼠。術(shù)后飼養(yǎng)12周,期間進行行為學評分觀察,分別在4、8及12周時取大鼠損傷部位的脊髓進行HE染色及神經(jīng)再生相關(guān)蛋白免疫熒光檢測。結(jié)果通過HE、Masson、甲苯胺藍染色顯示,脫細胞處理后的脊髓脫細胞支架上神經(jīng)細胞及軸突徹底清除,保留了脊髓細胞外基質(zhì)。掃描電子顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn),支架保留一定多孔網(wǎng)狀支架結(jié)構(gòu)。脫細胞支架在體實驗中,Basso-BeattieBresnahan(BBB)評分顯示,移植有脫細胞支架的大鼠后肢運動功能恢復優(yōu)于單純損傷組大鼠。組織學HE染色顯示,脫細胞支架能夠填補缺損的脊髓節(jié)段,加快損傷脊髓的修復過程。免疫熒...

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圖3脊髓組織HE染色標尺示2mm

綜上所述，脊髓脫細胞支架在脫除細胞后保留了一定的細胞外基質(zhì)，其由膠原蛋白組成，并含有一定的神經(jīng)髓鞘。脊髓脫細胞支架自身可以為損傷部位提供一定的空間結(jié)構(gòu)，填補了缺損部位的脊髓，減少了損傷部位空洞的形成，加快了損傷部位的再生修復，促進損傷部位神經(jīng)軸突的再生，改善大鼠后肢運動功能的恢復....

圖2行為學Basso-Beattie-Bresnahan評分

圖3脊髓組織HE染色標尺示2mm圖4NF200(紅光)和GFAP(綠光)免疫熒光染色分析標尺示50μm

圖4NF200(紅光)和GFAP(綠光)免疫熒光染色分析標尺示50μm

圖2行為學Basso-Beattie-Bresnahan評分

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