發(fā)布時(shí)間：2017-08-30 12:00

  本文關(guān)鍵詞：人副流感病毒3型HN糖蛋白N-糖鏈的功能研究

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【摘要】：為了研究人副流感病毒3型(hPIV3)HN糖蛋白N-糖鏈的功能,采用基因定點(diǎn)突變技術(shù)構(gòu)建糖基化位點(diǎn)突變體,然后檢測(cè)各突變株的蛋白電泳速率、細(xì)胞表面表達(dá)量、受體結(jié)合活性、神經(jīng)氨酸酶活性和促細(xì)胞融合活性。HN分子的G1、G2、G3和G4 4個(gè)糖基化位點(diǎn)分別和聯(lián)合突變后發(fā)現(xiàn)G1、G2和G4及其聯(lián)合突變株(G12、G14、G24和G124)電泳速率加快,而G3突變株電泳速率沒(méi)有變化。各突變株的表達(dá)效率,神經(jīng)氨酸酶活性與野毒株相比差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),但受體結(jié)合活性和促細(xì)胞融合活性均有不同程度的降低(P0.05)。G1、G2和G4位點(diǎn)突變后受體結(jié)合活性分別為突變前的83.94%、76.45%和55.32%,而促細(xì)胞融合活性降為突變前的80.84%、77.83%和64.16%。聯(lián)合突變株G12、G14、G24和G124血吸附活性進(jìn)一步降低,為突變前的33.07%、20.67%、19.96%和15.11%,促細(xì)胞融合活性進(jìn)一步降低為突變前的46.36%、12.04%、13.43%和4.05%。結(jié)果表明:hPIV3HN糖蛋白的糖鏈對(duì)HN糖蛋白的受體結(jié)合活性和促細(xì)胞融合活性有重要影響,推斷糖鏈的丟失可能會(huì)引起HN糖蛋白頭部結(jié)構(gòu)(受體結(jié)合活性位點(diǎn)所在區(qū)域)或者方向的改變或者無(wú)法與宿主細(xì)胞膜表面的凝集素受體(一種與N-糖鏈結(jié)合的受體)結(jié)合,進(jìn)而導(dǎo)致受體結(jié)合活性和促細(xì)胞融合活性的降低。
【作者單位】： 山東大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院病毒學(xué)研究室;山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)核醫(yī)學(xué)研究所;山東大學(xué)實(shí)驗(yàn)畸形學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;山東省疾病預(yù)防控制中心;山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院生化與分子生物學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 副流感病毒型 人 HN蛋白質(zhì) 細(xì)胞融合 血細(xì)胞吸附 神經(jīng)氨酸酶
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(30970142和81271806) 山東大學(xué)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)資助項(xiàng)目 山東省自然科學(xué)基金(2009ZRB019VW) 中國(guó)博士后科學(xué)基金(20090461219)
【分類號(hào)】：R373
【正文快照】： 人副流感病毒3型(Human parainfluenza virustype 3,hPIV3)屬于副粘病毒科副粘病毒屬,是引起嬰幼兒下呼吸道感染的重要病原[1],可造成反復(fù)感染的下呼吸道疾病[2]。hPIV3包膜上和感染的宿主細(xì)胞表面鑲嵌有兩種糖蛋白,即血凝素-神經(jīng)氨酸酶(Hemagglutinin-neuraminidase,HN)和融

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1 鄭國(guó)，

本文編號(hào)：759158