心臟特異表達(dá)綠色熒光斑馬魚模型的建立與評(píng)估
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更多相關(guān)文章: 斑馬魚 轉(zhuǎn)基因 EGFP Tol轉(zhuǎn)座子
【摘要】:本課題組前期研究中,利用斑馬魚cmlc2(Cardiac myosin light chain 2)基因啟動(dòng)子構(gòu)建了一個(gè)用于斑馬魚心臟組織特異表達(dá)外源基因的轉(zhuǎn)基因表達(dá)載體pTol2-cmlc2-IRES-EGFP。文章利用該載體構(gòu)建了一個(gè)穩(wěn)定表達(dá)EGFP的轉(zhuǎn)基因斑馬魚品系,并初步分析了EGFP的表達(dá)對(duì)該轉(zhuǎn)基因斑馬魚品系的心臟發(fā)育和功能的影響。結(jié)果表明,在建立的轉(zhuǎn)基因斑馬魚品系早期胚胎發(fā)育過(guò)程中,綠色熒光信號(hào)在心臟中特異表達(dá),該表達(dá)模式與原位雜交分析的cmlc2的表達(dá)模式結(jié)果相同;該轉(zhuǎn)基因斑馬魚品系的心臟形態(tài)及發(fā)育生長(zhǎng)正常;進(jìn)一步通過(guò)M-Mode分析心臟生理學(xué)功能的結(jié)果表明:該轉(zhuǎn)基因品系心動(dòng)周期、心率、收縮與舒張表面積及表面積縮短率等重要生理指標(biāo)與正常野生型的斑馬魚對(duì)照組相比沒有顯著差別。以上結(jié)果表明該轉(zhuǎn)基因品系中綠色熒光蛋白的表達(dá)對(duì)斑馬魚心臟的發(fā)育和功能沒有影響。研究結(jié)果為進(jìn)一步利用該載體建立外源目的基因轉(zhuǎn)基因表達(dá)模型,研究心臟表達(dá)基因的功能奠定了重要基礎(chǔ)。
【作者單位】: 湖南師范大學(xué)心臟發(fā)育研究中心 發(fā)育生物學(xué)與蛋白質(zhì)組學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: 斑馬魚 轉(zhuǎn)基因 EGFP Tol轉(zhuǎn)座子
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號(hào):81170088,30970245,3093005,31171402)資助
【分類號(hào)】:R-332
【正文快照】: cmlc2基因在心臟發(fā)育、胚胎和成體穩(wěn)態(tài)的維持過(guò)程中發(fā)揮著著重要作用。cmlc2基因表達(dá)始于雙邊心臟中胚層,之后逐漸增強(qiáng)表達(dá)于心管,最終在分化的心室與心房均特異表達(dá)[1]。斑馬魚cmlc2啟動(dòng)子是構(gòu)建心臟組織中特異表達(dá)目的基因的轉(zhuǎn)基因斑馬魚模型理想啟動(dòng)子之一。Huang等[2]最
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):680097
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