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心臟特異表達綠色熒光斑馬魚模型的建立與評估

發(fā)布時間:2017-08-15 22:07

  本文關鍵詞:心臟特異表達綠色熒光斑馬魚模型的建立與評估


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【摘要】:本課題組前期研究中,利用斑馬魚cmlc2(Cardiac myosin light chain 2)基因啟動子構建了一個用于斑馬魚心臟組織特異表達外源基因的轉基因表達載體pTol2-cmlc2-IRES-EGFP。文章利用該載體構建了一個穩(wěn)定表達EGFP的轉基因斑馬魚品系,并初步分析了EGFP的表達對該轉基因斑馬魚品系的心臟發(fā)育和功能的影響。結果表明,在建立的轉基因斑馬魚品系早期胚胎發(fā)育過程中,綠色熒光信號在心臟中特異表達,該表達模式與原位雜交分析的cmlc2的表達模式結果相同;該轉基因斑馬魚品系的心臟形態(tài)及發(fā)育生長正常;進一步通過M-Mode分析心臟生理學功能的結果表明:該轉基因品系心動周期、心率、收縮與舒張表面積及表面積縮短率等重要生理指標與正常野生型的斑馬魚對照組相比沒有顯著差別。以上結果表明該轉基因品系中綠色熒光蛋白的表達對斑馬魚心臟的發(fā)育和功能沒有影響。研究結果為進一步利用該載體建立外源目的基因轉基因表達模型,研究心臟表達基因的功能奠定了重要基礎。
【作者單位】: 湖南師范大學心臟發(fā)育研究中心 發(fā)育生物學與蛋白質(zhì)組學教育部重點實驗室;
【關鍵詞】斑馬魚 轉基因 EGFP Tol轉座子
【基金】:國家自然科學基金項目(編號:81170088,30970245,3093005,31171402)資助
【分類號】:R-332
【正文快照】: cmlc2基因在心臟發(fā)育、胚胎和成體穩(wěn)態(tài)的維持過程中發(fā)揮著著重要作用。cmlc2基因表達始于雙邊心臟中胚層,之后逐漸增強表達于心管,最終在分化的心室與心房均特異表達[1]。斑馬魚cmlc2啟動子是構建心臟組織中特異表達目的基因的轉基因斑馬魚模型理想啟動子之一。Huang等[2]最

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