目的建立人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)向間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化的模型并探討其可能的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。方法以HUVECs為研究對(duì)象,分組如下:對(duì)照組、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)模型組、TGF-β1+DMSO組以及TGF-β1+抑制劑干預(yù)組。TGF-β1模型組應(yīng)用5ng/mL TGF-β1刺激HUVECs 72h;TGF-β1+DMSO組應(yīng)用5ng/mL TGF-β1及1μL/mL DMSO刺激HUVECs 72h;TGF-β1+抑制劑干預(yù)組分別應(yīng)用p38MAPK抑制劑SB203580(5mmol/L)或ERK抑制劑U0126(10mmol/L)或JNK抑制劑SP600125(5mmol/L)干預(yù)TGF-β1誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞,倒置顯微鏡觀察內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài),應(yīng)用免疫熒光法檢測(cè)VE-鈣粘蛋白(VE-cadherin)和α-肌動(dòng)蛋白(α-SMA)在細(xì)胞內(nèi)的分布情況;并應(yīng)用Western blot法檢測(cè)VE-cadherin和α-SMA的蛋白表達(dá)情況。結(jié)果 TGF-β1(5ng/mL)刺激HUVECs 72h后,內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)由卵圓形鋪路石狀向梭形轉(zhuǎn)變,與0h相比,VE-cadherin蛋白表達(dá)顯著下調(diào)(P...

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)和干預(yù)
    1.3 Western blot法檢測(cè)細(xì)胞蛋白表達(dá)
    1.4 免疫熒光法檢測(cè)細(xì)胞蛋白表達(dá)
    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 TGF-β1可誘導(dǎo)HUVECs向間充質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化
    2.2 p38 MAPK的活化對(duì)EndoMT的影響
    2.3 JNK的活化對(duì)EndoMT的影響
    2.4 ERK1/2的活化對(duì)EndoMT的影響
3 討論



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