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人外周血單核細(xì)胞源性朗格漢斯細(xì)胞和表皮炎癥樣樹突狀細(xì)胞的誘導(dǎo)及表型分析

發(fā)布時間:2017-08-12 10:32

  本文關(guān)鍵詞:人外周血單核細(xì)胞源性朗格漢斯細(xì)胞和表皮炎癥樣樹突狀細(xì)胞的誘導(dǎo)及表型分析


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【摘要】:目的利用人外周血單核細(xì)胞體外誘導(dǎo)培養(yǎng)朗格罕氏細(xì)胞(Mo-LC)和炎癥性樹突狀表皮細(xì)胞(Mo-IDEC)并觀察其表型特點。方法聯(lián)合應(yīng)用LymphoPrepTM梯度離心試劑和CD14+磁珠分離和篩選外周血CD14+單核細(xì)胞;在重組人粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)和重組人白介素4(IL-4)的基礎(chǔ)上分別于第0、2、4天加入人天然TGF-β1或β-巰基乙醇(β-ME)。培養(yǎng)第6天時收集細(xì)胞,通過相差顯微鏡觀察其形態(tài),并利用單克隆抗體和流式細(xì)胞術(shù)對誘導(dǎo)細(xì)胞亞群檢測細(xì)胞表面分子的表達(dá)水平。結(jié)果 CD14+單核細(xì)胞體外誘導(dǎo)培養(yǎng)6 d后可形成具有樹突狀外觀的Mo-LC和Mo-IDEC,2種細(xì)胞均不同程度表達(dá)CD1a、FcεRI、FcεRII、TLR1、TLR2;Mo-LC表達(dá)CD207,Mo-IDEC表達(dá)CD206。特應(yīng)性皮炎患者來源的Mo-IDEC表面CD1a表達(dá)高于Mo-LC,且CD23、TLR2、FcεRI的表達(dá)水平顯著高于健康對照組。結(jié)論利用外周血單核細(xì)胞可在體外成功誘導(dǎo)Mo-LC和Mo-IDEC,這2種細(xì)胞表型特點與體內(nèi)分離的細(xì)胞在形態(tài)和表型上類似,為體外進(jìn)一步研究這2類細(xì)胞的功能打下基礎(chǔ)。
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院皮膚科;
【關(guān)鍵詞】朗格罕氏細(xì)胞 表皮炎癥性樹突狀細(xì)胞 高親和力IgE受體 Toll樣受體
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(81072447)
【分類號】:R392
【正文快照】: 特應(yīng)性皮炎(atopic dermatitis,AD)是一種慢性復(fù)發(fā)性炎癥性皮膚病,累及約25%兒童及1%~3%成人[1]。朗格漢斯細(xì)胞(Langerhans cells,LC)和炎癥樣樹突狀表皮細(xì)胞(inflammatory dendritic epidermalcells,IDEC)是在AD皮損中出現(xiàn)的2種樹突狀細(xì)胞(dendritic cells,DCs)。其中IDEC

【二級參考文獻(xiàn)】

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本文編號:661158

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