本文關(guān)鍵詞：小鼠巨噬細(xì)胞內(nèi)表達(dá)結(jié)核分枝桿菌CFP10-ESAT6融合蛋白對細(xì)胞增殖和凋亡的影響

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【摘要】：目的:建立培養(yǎng)濾液蛋白10-早期分泌性抗原靶6(CFP10-ESAT6)真核表達(dá)質(zhì)粒并轉(zhuǎn)染RAW264.7巨噬細(xì)胞,觀察胞內(nèi)表達(dá)CFP10-ESAT6對細(xì)胞活性及凋亡的影響,并初步探討其機(jī)制。方法:將CFP10-ESAT6融合基因插入真核表達(dá)質(zhì)粒pEGFP-N1,構(gòu)建重組質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染RAW264.7巨噬細(xì)胞。采用MTT的方法測定CFP10-ESAT6融合蛋白對RAW264.7巨噬細(xì)胞活性的影響,采用結(jié)核分枝桿菌19 kD脂蛋白和十字孢堿(staurosporine)處理RAW264.7巨噬細(xì)胞,并以流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率以及Toll樣受體2(TLR2)的表達(dá)。結(jié)果:成功構(gòu)建了重組質(zhì)粒pEGFP-N1/CFP10-ESAT6并轉(zhuǎn)染至RAW264.7巨噬細(xì)胞;與對照組相比,胞內(nèi)表達(dá)CFP10-ESAT6不能影響巨噬細(xì)胞的活性,但可以明顯抑制結(jié)核分枝桿菌19 kD脂蛋白所造成的凋亡(P0.05),并顯著抑制了TLR2的表達(dá)(P0.05)。結(jié)論:巨噬細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的CFP10-ESAT6融合蛋白不具有細(xì)胞毒性作用,但可以通過下調(diào)TLR2的表達(dá)來抑制結(jié)核分枝桿菌19 kD脂蛋白所造成的凋亡。
【作者單位】： 河南省人民醫(yī)院感染控制科 細(xì)菌室;
【關(guān)鍵詞】： 結(jié)核分枝桿菌 培養(yǎng)濾液蛋白 早期分泌性抗原靶 巨噬細(xì)胞 細(xì)胞增殖 細(xì)胞凋亡
【基金】：河南省醫(yī)學(xué)科技攻關(guān)計(jì)劃普通項(xiàng)目(No.201203094)
【分類號】：R363
【正文快照】： 結(jié)核分枝桿菌是一種典型的胞內(nèi)致病菌,可以通過多種不同的機(jī)制逃逸機(jī)體免疫細(xì)胞的殺傷及清除,從而在宿主細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行復(fù)制和繁殖,并長期存活于機(jī)體內(nèi)。有證據(jù)顯示宿主可以通過誘導(dǎo)受感染巨噬細(xì)胞的凋亡來抑制胞內(nèi)結(jié)核分枝桿菌的生長[1-2]。進(jìn)一步的研究表明分枝桿菌毒力株抑制

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本文編號：642336