本文關(guān)鍵詞：VEGF基因轉(zhuǎn)染對(duì)脂肪組織來源干細(xì)胞成骨定向分化潛能的影響分析

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【摘要】：[目的]研究人血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)轉(zhuǎn)染人脂肪組織來源干細(xì)胞(adipose tissue-derived stem cells,ADSCs)后對(duì)該細(xì)胞成骨分化能力的影響。[方法]采用Trizol法獲取編碼VEGF成熟肽的基因序列,將獲得的目的基因與線性載體pGEM-T Easy連接,測序后與含綠色熒光蛋白的雙順反子表達(dá)載體雙酶切連接成重組質(zhì)粒pSELECT-GFP zeo-VEGF,并轉(zhuǎn)染第2代ADSCs,熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染效率。對(duì)轉(zhuǎn)染后的ADSCs行成骨培養(yǎng),Western Blot及Realtime PCR檢測細(xì)胞對(duì)堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和骨鈣蛋白(osteocalcin,OC)的分泌,分別對(duì)細(xì)胞行Von Kossa及ALP染色。[結(jié)果]熒光顯微鏡下可見與細(xì)胞形態(tài)相似的綠色熒光。成骨條件培養(yǎng)下,Western Blot及Realtime PCR檢測結(jié)果示VEGF轉(zhuǎn)染后的ADSCs組對(duì)ALP和OC的分泌量明顯高于空載體轉(zhuǎn)染組和空白細(xì)胞組,結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。VEGF轉(zhuǎn)染組細(xì)胞經(jīng)Von Kossa及ALP染色可見不透光的鈣結(jié)節(jié)沉著。[結(jié)論]經(jīng)脂質(zhì)體介導(dǎo)將人VEGF目的基因片段轉(zhuǎn)染后的ADSCs成骨分化能力明顯增強(qiáng),轉(zhuǎn)染后的ADSCs可以有效促進(jìn)成骨,從而為基因治療促進(jìn)骨組織工程發(fā)展提供了必要的試驗(yàn)基礎(chǔ)。
【作者單位】： 天津市天津醫(yī)院創(chuàng)傷骨科;天津市天津醫(yī)院骨腫瘤科;
【關(guān)鍵詞】： 血管內(nèi)皮生長因子 脂肪組織 干細(xì)胞 轉(zhuǎn)染 成骨細(xì)胞
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 骨缺損及骨折不愈合的修復(fù)目前在臨床上并不少見,而主要的處理措施即采用自體或異體骨移植。近年來人工骨材料有了迅速發(fā)展,其中以采用組織工程技術(shù)修飾種子細(xì)胞進(jìn)行成骨誘導(dǎo)用以構(gòu)建組織工程骨的方法得到了極大地關(guān)注和肯定[1]。自從2001年Zuk等[2]從脂肪中提取出了具有多分

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中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊立業(yè);黃天華;;脂肪組織干細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];癌變.畸變.突變;2007年02期

2 張衛(wèi)澤;樊艷;陳永清;馬凌;秦勉;哈小琴;李國慶;;成人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞凍存的實(shí)驗(yàn)研究[J];蘭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2008年02期

3 陸偉;金巖;張勇杰;;SD大鼠脂肪組織來源干細(xì)胞體外生物學(xué)特性研究[J];臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志;2006年07期

4 唐少鋒;劉承杏;吳迪;姬林松;馬濤;李世和;;兔脂肪干細(xì)胞分離培養(yǎng)及成脂成骨分化潛能的研究[J];昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2008年04期

5 宋小飛;傅強(qiáng);徐月敏;;原代培養(yǎng)干細(xì)胞前脂肪組織的純化[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2009年01期

6 肖金剛;陳建霖;李曉宇;張勇;田衛(wèi)東;劉磊;;脂肪干細(xì)胞脂向分化過程中miRNA-27b表達(dá)的研究[J];天津醫(yī)藥;2009年09期

7 單秀莉;王青;林志勇;孫鴻義;林秀娟;陳魯沂;;大鼠脂肪干細(xì)胞體外定向誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞的研究[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;2006年08期

8 楊惠林;耿德春;王駿驊;徐耀增;陳亮;唐天駟;;脂肪基質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)及其定向分化為成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞特性的研究[J];中華骨科雜志;2006年10期

9 馮力;王峻;曾亮;雷霆;;腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子基因重組腺病毒體外轉(zhuǎn)染胚胎大鼠神經(jīng)干細(xì)胞及其鑒定[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2007年20期

10 徐松柏;趙剛;趙紅光;許侃;于洪泉;候宜;;VEGF基因修飾兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的研究(英文)[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2008年12期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李賓公;黃紹烈;王夢洪;鄭澤琪;彭景添;;脂肪來源與骨髓來源的基質(zhì)干細(xì)胞的比較[A];第一屆全國中西醫(yī)結(jié)合心血管病中青年醫(yī)師論壇論文匯編[C];2008年

2 鄧展生;沈民仁;鞠洪斌;孫太存;許宇霞;張旋;;大鼠脂肪基質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及生物學(xué)特性的實(shí)驗(yàn)研究[A];第十三屆全國中西醫(yī)結(jié)合骨傷科學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2005年

3 毛峰;;脂肪干細(xì)胞向神經(jīng)元的誘導(dǎo)分化[A];湖北省暨武漢市病理生理學(xué)會(huì)第十四屆學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

4 傅新巧;張?zhí)K明;褚倩;肖文伍;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞轉(zhuǎn)染人TH基因的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

5 金歡;歐陽靜萍;;脂肪干細(xì)胞研究近況[A];湖北省暨武漢市病理生理學(xué)會(huì)第十四屆學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

6 李志勇;田衛(wèi)東;陳希哲;劉磊;鄭嘵輝;湯煒;李聲偉;;牙本質(zhì)涎磷蛋白真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)[A];2005'中國修復(fù)重建外科論壇論文匯編[C];2005年

7 吳齊全;周君梅;張勝利;馬曉榮;高同斌;謝華;陳方;;人羊水來源干細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國小兒外科學(xué)術(shù)會(huì)論文集[C];2010年

8 劉祖梅;韓毅;杜心靈;胡燕;金滿文;;成年小鼠心臟干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)鑒定和離子通道特性[A];2008心血管藥理學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2008年

9 余細(xì)勇;;干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化的表觀調(diào)控研究[A];第七屆海峽兩岸心血管科學(xué)研討會(huì)論文集[C];2009年

10 趙春華;;原始體性干細(xì)胞組織分化與再生實(shí)驗(yàn)研究[A];第九屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要匯編[C];2003年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 華信;抽脂手術(shù)“抽”出干細(xì)胞[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2002年

2 本報(bào)記者 吳潔;思考干細(xì)胞——研究、臨床應(yīng)用與產(chǎn)業(yè)化[N];科技日?qǐng)?bào);2001年

3 周向東;可以讓你有一個(gè)備用的臟器[N];中國醫(yī)藥報(bào);2001年

4 記者王俊鳴;科學(xué)家說用干細(xì)胞可修補(bǔ)腦部損傷[N];科技日?qǐng)?bào);2002年

5 通訊員 王其玲 記者 羅堅(jiān)梅;干細(xì)胞，燃起人類絕處逢生新希望[N];杭州日?qǐng)?bào);2005年

6 鄭曉春;干細(xì)胞的用處或許更大[N];科技日?qǐng)?bào);2003年

7 陸志城;肌干細(xì)胞——再續(xù)神奇[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2002年

8 柳筠;干細(xì)胞能成長為腦細(xì)胞[N];大眾科技報(bào);2000年

9 ;美發(fā)現(xiàn)心臟干細(xì)胞新“資源”[N];新華每日電訊;2008年

10 曲俊雅;不用胚胎獲取干細(xì)胞，可能嗎[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2005年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 金丹;逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)hBMP-7基因轉(zhuǎn)染兔骨髓基質(zhì)干細(xì)胞體內(nèi)外成骨實(shí)驗(yàn)研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2002年

2 江小霞;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)樹突狀細(xì)胞免疫功能的影響[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2004年

3 孔祥永;人胎兒肺上皮細(xì)胞的發(fā)育分化及其干細(xì)胞的初步鑒定[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2004年

4 方利君;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為皮膚組織的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2004年

5 史春夢;真皮來源成體多能干細(xì)胞的生物學(xué)性狀與促進(jìn)創(chuàng)傷修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2004年

6 聶鑫;外胚間充質(zhì)干細(xì)胞的多向分化及在組織工程周圍神經(jīng)再生中的應(yīng)用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

7 孫勝;缺氧誘導(dǎo)因子及其調(diào)節(jié)基因在化學(xué)缺氧預(yù)處理保護(hù)中的作用研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2007年

8 蘇立;在體與離體心肌誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化及其機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2004年

9 張翼澾;人間充質(zhì)干細(xì)胞Stro-1～+和Stro-1～-亞群不同的免疫抑制作用[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2004年

10 楊學(xué)義;表皮干細(xì)胞建系及重建角膜緣干細(xì)胞缺損眼表研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2004年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 金杰;脂肪來源具有干細(xì)胞潛能的細(xì)胞的體外生長特性[D];浙江大學(xué);2006年

2 劉丹丹;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2004年

3 喬添柱;BMP-7誘導(dǎo)脂肪干細(xì)胞微團(tuán)培養(yǎng)下成軟骨能力的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2009年

4 王耀晟;表達(dá)hVEGF_（121）/EGFP的間充質(zhì)干細(xì)胞制備及缺氧對(duì)其表達(dá)影響[D];南昌大學(xué);2007年

5 李樹寶;殼聚糖介導(dǎo)真核雙表達(dá)質(zhì)粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4轉(zhuǎn)染兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2009年

6 周德存;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為心肌細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2003年

7 陳偉;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞集落培養(yǎng)及其生物學(xué)特性的研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2004年

8 傅斌;人前列腺干細(xì)胞分離培養(yǎng)及其生物學(xué)特性研究[D];江西醫(yī)學(xué)院;2004年

9 李勇;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性及BMP2在誘導(dǎo)其向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化中的作用[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2004年

10 岑航輝;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定[D];浙江大學(xué);2002年

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