5-Fu聯(lián)合順鉑對種植VX-2細胞家兔模型化療研究
本文關(guān)鍵詞:5-Fu聯(lián)合順鉑對種植VX-2細胞家兔模型化療研究
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【摘要】:目的:1.通過構(gòu)建家兔外置大腸癌模型,觀察腫瘤浸泡化療對腫瘤的作用,用以作為臨床治療中腸腔灌注化療的參考,評價是否可通過術(shù)前常規(guī)洗腸與腸腔化療相結(jié)合的方式,達到更好的治療大腸癌的效果。2.通過MTT法檢測VX-2細胞存活率,觀察體外聚乙二醇聯(lián)合5-fu、順鉑的抗腫瘤作用。方法:第一部分:制備家兔外置大腸癌模型:選取健康家兔,雄性,體重1.8-2.5kg,對其行大腸外置手術(shù),對術(shù)后家兔外置的大腸采用腫瘤細胞懸液注射法制備造外置大腸癌模型,造模術(shù)后每天觀察腫瘤生長情況,同時對造外置大腸腫瘤行體積大小測定,選出腫瘤大小相似的模型20只家兔隨機分為4組。將4組家兔分為3個治療組及1個聚乙二醇對照組:聚乙二醇對照組(A組,n=5),聚乙二醇+5-Fu浸泡化療組(0.75g/L),(B組,n=5),聚乙二醇+順鉑(400mg/L)浸泡化療組(C組,n=5),聚乙二醇+5-Fu(0.75g/L)+順鉑(400mg/L)浸泡化療組(D組,n=5)。治療組行2次浸泡化療,間隔時間為3天。浸泡前一天及結(jié)束后第三天均行血常規(guī)、電解質(zhì)、肝腎功能檢查,對比浸泡化療前后變化情況,取腫瘤組織送病檢,經(jīng)免疫組化方法檢測各組血管內(nèi)皮生長因子、增殖細胞核抗原表達水平并比較。第二部分:聚乙二醇聯(lián)合不同濃度的5-fu及順鉑,VX-2細胞懸液200μl接種于96孔板內(nèi),設(shè)一個空白對照組(1640培養(yǎng)液)和8個藥物實驗組,每組設(shè)4個副空,細胞培養(yǎng)24小時后將不同濃度的藥物20μl加入實驗組,置于37.0℃培養(yǎng)箱中,分別于細胞培養(yǎng)24h后加入MMT 20μl,觀察不同濃度的藥物溶物作用細胞培養(yǎng)24小時后細胞的生存率狀況。結(jié)果:1.術(shù)后三周內(nèi),約70%家兔種植腫瘤后外置大腸部分出現(xiàn)腫瘤灶,表明腫瘤細胞懸液注射法能成功造模且較為穩(wěn)定;2.各治療組在腫瘤浸泡化療前后的血紅蛋白、白細胞、紅細胞等血常規(guī)指標(biāo),總蛋白、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、血肌酐等肝腎功能及鈉、鉀、鈣離子等電解質(zhì)指標(biāo)不具統(tǒng)計學(xué)意義(P0.5),各組實驗動物在行造模手術(shù)后10天內(nèi)呈現(xiàn)精神不振,食欲、體重下降;3.實驗組中動物生存期相對于對照組延長,實驗組中D組生存期最長,D、B、C組對照A組(P0.05),D組分別對照B組、C組(P0.05);4.B、C、D組血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)灰度值均高于A組,B、C、D組與A組兩兩對比(P0.05),D組與B、C組對比(P0.05);5.B、C、D增殖細胞核抗原(PCNA)灰度值均高于A組,B、C、D組與A組兩兩對比(P0.05),D組與B、C組對比(P0.05);6.聚乙二醇與不同濃度的5-fu及順鉑搭配作用細胞24h后對VX-2細胞均具有一定的抑制作用。結(jié)論:1.VX-2細胞懸液注射法制備家兔外置大腸癌模型成功率較高,模型穩(wěn)定能滿足實驗需求。2.5-Fu、順鉑及5-Fu聯(lián)合順鉑溶解于聚乙二醇溶液中對腫瘤浸泡化療方案均安全有效,對腫瘤細胞有直接殺傷作用,延長實驗動物生存時間,且順鉑聯(lián)合5-Fu對腫瘤浸泡化療的療效優(yōu)于單藥組。3.體外實驗中,5-fu及順鉑對VX-2細胞的殺傷作用與濃度呈正比,并且當(dāng)兩者聯(lián)合使用時有一定協(xié)同作用。
【關(guān)鍵詞】:VX-2細胞 腫瘤浸泡化療 外置大腸癌
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R735.34;R-332
【目錄】:
- 中文摘要4-7
- Abstract7-12
- 主要英文縮略語索引12-14
- 前言14-18
- 第一部分 5-Fu聯(lián)合順鉑對種植VX-2 細胞家兔模型化療研究18-36
- 1 實驗材料18-19
- 2 實驗流程與方法19-26
- 3 統(tǒng)計分析26
- 4 實驗結(jié)果26-36
- 第二部分 聚乙二醇聯(lián)合 5 - f u、順鉑的抗腫瘤作用研究36-44
- 1 實驗材料36
- 2 實驗設(shè)計36-37
- 3 實驗方法37-38
- 4 實驗結(jié)果38-40
- 討論40-44
- 第三部分 結(jié)論44-46
- 參考文獻46-50
- 綜述50-54
- 參考文獻53-54
- 碩士研究生期間發(fā)表的論文54-56
- 致謝56-57
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,本文編號:636671
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