本文關(guān)鍵詞：乙酰肝素酶可變剪接體Splice 5在CHO細(xì)胞中的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染及其亞細(xì)胞定位研究

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【摘要】：目的建立乙酰肝素酶可變剪接體Splice 5穩(wěn)定轉(zhuǎn)染中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(CHO)細(xì)胞株,并進(jìn)行亞細(xì)胞定位分析。方法將表達(dá)乙酰肝素酶全長(zhǎng)的質(zhì)粒和乙酰肝素酶可變剪接體Splice 5質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入CHO細(xì)胞,經(jīng)G418進(jìn)行篩選后,挑取單克隆進(jìn)行培養(yǎng),RT-PCR檢測(cè)篩選克隆。用激光共聚焦顯微鏡測(cè)定其亞細(xì)胞定位。結(jié)果成功獲得乙酰肝素酶可變剪接體Splice 5穩(wěn)定轉(zhuǎn)染株,并研究了其亞細(xì)胞定位情況。野生型乙酰肝素酶以顆粒狀分布于細(xì)胞質(zhì)中,Splice 5以彌散狀分布于細(xì)胞質(zhì)中,且在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶酶體、細(xì)胞膜均有分布。結(jié)論 Splice 5和野生型乙酰肝素酶在CHO細(xì)胞中分布形式和定位的不同,提示Splice 5可能具有其他的生物學(xué)功能。
【作者單位】： 廣西醫(yī)科大學(xué);軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院野戰(zhàn)輸血研究所;
【關(guān)鍵詞】： 乙酰肝素酶 可變剪接體 轉(zhuǎn)染 亞細(xì)胞定位
【分類(lèi)號(hào)】：R341
【正文快照】： 乙酰肝素酶(heparanase,HPA)是腫瘤細(xì)胞擴(kuò)散與轉(zhuǎn)移過(guò)程中的一種重要的功能酶,是體內(nèi)唯一能分解細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜中硫酸肝素側(cè)鏈的β-葡萄糖苷內(nèi)切酶,可特異性地識(shí)別硫酸肝素側(cè)鏈上的特異性位點(diǎn),降解特異性位點(diǎn)上的硫酸肝素蛋白聚糖,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移、黏附和

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1 王銳;李繼梅;;乙酰肝素酶在中樞神經(jīng)系統(tǒng)表達(dá)調(diào)控的研究進(jìn)展[J];中國(guó)藥物與臨床;2008年10期

2 李燕杰;李淑蓮;;乙酰肝素酶的分子特性及其在生理病理過(guò)程中的作用[J];河南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2008年03期

3 高紅偉;田曙光;崔真源;李素波;檀英霞;王璇琳;冉菘余;宮鋒;;重組人乙酰肝素酶在大腸桿菌中的表達(dá)、純化[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;2009年05期

4 張文娟;任明姬;;乙酰肝素酶研究進(jìn)展[J];內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志;2010年02期

5 劉玉;辛?xí)匝?毛敬;張濰;;乙酰肝素酶shRNA雙基因共表達(dá)真核載體的構(gòu)建和篩選[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2006年01期

6 許立薇;劉陽(yáng);霍強(qiáng);王愛(ài)紅;王啟光;;針對(duì)乙酰肝素酶基因的短發(fā)夾RNA干擾載體的構(gòu)建[J];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2011年01期

7 彭冬先;乙酰肝素酶與細(xì)胞侵襲[J];醫(yī)學(xué)綜述;2003年04期

8 張新華,鐘翠平;樹(shù)突狀細(xì)胞與移植免疫的研究進(jìn)展[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;2003年01期

9 張麗君 ,郭勇 ,丁煥文 ,王捷 ,張宏斌 ,鄭文嶺;pEGFP-bFGF重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞的條件優(yōu)化[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2003年01期

10 邱江鋒,吳志勇,羅春霞;誘導(dǎo)型一氧化氮合酶基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建與表達(dá)[J];肝膽外科雜志;2003年06期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 傅新巧;張?zhí)K明;褚倩;肖文伍;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞轉(zhuǎn)染人TH基因的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

2 李成仁;蔡文琴;李巍;蘇炳銀;;NOV基因轉(zhuǎn)染對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞增殖、分化的影響[A];解剖學(xué)雜志——中國(guó)解剖學(xué)會(huì)2002年年會(huì)文摘匯編[C];2002年

3 傅躍先;張強(qiáng);康權(quán);甘立強(qiáng);羅慶;劉燕;;腺病毒介導(dǎo)骨形態(tài)蛋白-9基因轉(zhuǎn)染脂肪干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)燒傷外科學(xué)分會(huì)2009年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

4 秦書(shū)儉;鄭仕杰;單偉;鄭德宇;;siRNA沉默HLA-A2表達(dá)的hBMSCs對(duì)人異體T淋巴細(xì)胞分泌功能及其誘導(dǎo)成骨能力的影響[A];中國(guó)解剖學(xué)會(huì)2011年年會(huì)論文文摘匯編[C];2011年

5 劉學(xué)政;侯陽(yáng);左中夫;;pEGFP/Ang-1轉(zhuǎn)染大鼠BMSCs對(duì)高糖環(huán)境中視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用[A];中國(guó)解剖學(xué)會(huì)2011年年會(huì)論文文摘匯編[C];2011年

6 陳衛(wèi)華;王躍閩;;沉默cb1-b siRNA轉(zhuǎn)染對(duì)小鼠淋巴細(xì)胞免疫活性的影響[A];華東六省一市泌尿外科學(xué)術(shù)年會(huì)暨2011年浙江省泌尿外科、男科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2011年

7 李蕾;王潤(rùn)田;王兆源;楊永杰;葛錫銳;王蕙芬;;模擬mIL—18天然生成的真核表達(dá)體系的構(gòu)建3—A—W5—78—P及其生物學(xué)活性的初步研究[A];中國(guó)免疫學(xué)會(huì)第四屆學(xué)術(shù)大會(huì)會(huì)議議程及論文摘要集[C];2002年

8 袁即山;利天增;祁少海;謝舉臨;徐盈斌;潘姝;張瓏娟;孔慶瑜;;人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞最佳轉(zhuǎn)染條件：α_1(Ⅰ)型前膠原基因反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染的實(shí)驗(yàn)[A];第八屆全國(guó)燒傷外科學(xué)年會(huì)論文匯編[C];2007年

9 胡大海;湯朝武;陳璧;;脂質(zhì)體介導(dǎo)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染角朊細(xì)胞的影響因素[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第六屆全國(guó)燒傷外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

10 薛美思;劉毅;;攜帶人胰島素基因慢病毒載體轉(zhuǎn)染臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)整形外科學(xué)分會(huì)第十一次全國(guó)會(huì)議、中國(guó)人民解放軍整形外科學(xué)專業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)交流會(huì)、中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)醫(yī)學(xué)美容專業(yè)委員會(huì)全國(guó)會(huì)議論文集[C];2011年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 白毅;上海創(chuàng)建大規(guī)模細(xì)胞DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)平臺(tái)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2005年

2 張中橋;NDRG2可誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞HepG2凋亡[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2004年

3 吳軍　楊太成;主動(dòng)特異性免疫療法治療腫瘤[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2003年

4 吳一福;川大成功建立人新基因PCIA1細(xì)胞株[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

5 馬昕皓;癌癥基因治療傳遞系統(tǒng)現(xiàn)狀[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2004年

6 婁彥艷 魏于全;腫瘤基因與分子疫苗面面觀[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2001年

7 王全楚;組織工程化血管離臨床有多遠(yuǎn)[N];健康報(bào);2005年

8 李杰;抗原特異TCR基因修飾T細(xì)胞技術(shù)的建立和應(yīng)用[N];科技日?qǐng)?bào);2007年

9 ;Fas／FasL途徑在造血干細(xì)胞移植免疫中的實(shí)驗(yàn)研究[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2003年

10 本報(bào)記者 靖九江;探尋病毒性肝炎的未知世界[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2002年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 馬天容;對(duì)新型內(nèi)皮脂酶價(jià)值的初步研究[D];山東大學(xué);2005年

2 饒小泉;MBD2基因缺陷促進(jìn)血管生成并改善小鼠下肢缺血損傷[D];華中科技大學(xué);2011年

3 江n;低強(qiáng)度脈沖超聲波對(duì)大鼠脂肪干細(xì)胞增殖和成骨分化的影響及成骨機(jī)制的初步研究[D];華中科技大學(xué);2012年

4 張利軍;IQGAP1在肺炎衣原體感染誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞粘附和遷移中的作用[D];天津醫(yī)科大學(xué);2011年

5 劉家云;siRNA對(duì)HepG2 2.2.15細(xì)胞和轉(zhuǎn)基因小鼠中HBV的基因表達(dá)及復(fù)制的抑制作用研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

6 黃清玲;乙型肝炎病毒全基因水平對(duì)HepG2細(xì)胞的影響及其機(jī)制的初步研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2008年

7 張貴星;光誘導(dǎo)表達(dá)載體的構(gòu)建及其在鹽藻除草劑抗性轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用[D];鄭州大學(xué);2003年

8 陳健;預(yù)缺氧的神經(jīng)保護(hù)作用及其線粒體機(jī)制[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2004年

9 郭冬平;超聲/微泡法介導(dǎo)外源性基因在細(xì)胞系和動(dòng)物體內(nèi)定向性表達(dá)的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2006年

10 桂伶俐;核因子-κB亞基p50和p65對(duì)永生化神經(jīng)前體細(xì)胞存活的影響及機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2007年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 劉春江;大鼠胎腦神經(jīng)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及電穿孔轉(zhuǎn)染[D];中南大學(xué);2009年

2 閆德雄;整合素β1在人表皮細(xì)胞分化中作用的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2006年

3 宋曉妍;人生長(zhǎng)激素真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其瞬時(shí)表達(dá)[D];鄭州大學(xué);2006年

4 譚琪;SV40T熒光真核表達(dá)載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)染大鼠胰島細(xì)胞的研究[D];暨南大學(xué);2008年

5 邵明斌;轉(zhuǎn)染外源性prohibitin在缺氧性腎小管上皮細(xì)胞損傷中的作用及機(jī)制[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2012年

6 壽奮勇;脂質(zhì)體介導(dǎo)的pIRES2-EGFP-NT-3轉(zhuǎn)染骨髓基質(zhì)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2010年

7 姚曦;蛋白激酶C-α對(duì)水通道蛋白2轉(zhuǎn)運(yùn)的調(diào)節(jié)作用研究[D];華中科技大學(xué);2011年

8 惠捷;上調(diào)Twist基因?qū)W480細(xì)胞株體外增殖及侵襲性影響的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

9 許勝貴;BMP-2慢病毒載體的構(gòu)建及轉(zhuǎn)染后骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞骨軟骨分化的研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2012年

10 楊鈺興;pcDNA3.1（+）/VEGF_（165）質(zhì)粒轉(zhuǎn)染內(nèi)皮祖細(xì)胞的體外培養(yǎng)[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年

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