本文關(guān)鍵詞：人TRAF3IP3基因的克隆及真核表達

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【摘要】：目的構(gòu)建人腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子3相互作用蛋白3(TRAF3IP3)基因真核表達載體,并進行表達檢測及鑒定。方法 RT-PCR擴增獲得TRAF3IP3開放讀碼框區(qū)基因,雙酶切連入真核表達載體pIRES2-EGFP,雙酶切和測序鑒定陽性克隆;重組質(zhì)粒磷酸鈣法轉(zhuǎn)染HEK293細胞,熒光顯微鏡觀察綠色熒光蛋白的表達,實時定量PCR和Western blot法鑒定TRAF3IP3基因的表達情況。結(jié)果經(jīng)限制性內(nèi)切酶酶切鑒定和測序證實,成功構(gòu)建了TRAF3IP3真核表達質(zhì)粒,熒光顯微鏡觀察可見轉(zhuǎn)染了重組質(zhì)粒的HEK293細胞有綠色熒光蛋白的表達,實時定量PCR和Western blot結(jié)果證實TRAF3IP3蛋白高水平表達。結(jié)論成功構(gòu)建了pIRES-EGFP-TRAF3IP3真核表達質(zhì)粒,為TRAF3IP3基因功能的研究奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 河北聯(lián)合大學附屬醫(yī)院檢驗科;河北聯(lián)合大學生命科學學院;
【關(guān)鍵詞】： TRAFIP 真核表達 轉(zhuǎn)染 HEK細胞
【基金】：國家自然科學基金(81072093) 河北省青年科學基金(C2012401039)
【分類號】：R346
【正文快照】： TRAF3IP3(TRAF3 interacting protein 3)又被稱作T3JAM[TRAF3-interacting Jun N-terminal kinase(JNK)-activating modulator],是2003年發(fā)現(xiàn)的一個人類基因,因其蛋白產(chǎn)物能夠特異性地與腫瘤壞子因子受體相關(guān)因子3(TNF receptor-associated factor 3,TRAF3)蛋白相互作用而得

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本文編號：636538