本文關(guān)鍵詞：人TRAF3IP3基因的克隆及真核表達(dá)

  更多相關(guān)文章： TRAFIP 真核表達(dá) 轉(zhuǎn)染 HEK細(xì)胞

【摘要】：目的構(gòu)建人腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子3相互作用蛋白3(TRAF3IP3)基因真核表達(dá)載體,并進(jìn)行表達(dá)檢測(cè)及鑒定。方法 RT-PCR擴(kuò)增獲得TRAF3IP3開(kāi)放讀碼框區(qū)基因,雙酶切連入真核表達(dá)載體pIRES2-EGFP,雙酶切和測(cè)序鑒定陽(yáng)性克隆;重組質(zhì)粒磷酸鈣法轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞,熒光顯微鏡觀察綠色熒光蛋白的表達(dá),實(shí)時(shí)定量PCR和Western blot法鑒定TRAF3IP3基因的表達(dá)情況。結(jié)果經(jīng)限制性?xún)?nèi)切酶酶切鑒定和測(cè)序證實(shí),成功構(gòu)建了TRAF3IP3真核表達(dá)質(zhì)粒,熒光顯微鏡觀察可見(jiàn)轉(zhuǎn)染了重組質(zhì)粒的HEK293細(xì)胞有綠色熒光蛋白的表達(dá),實(shí)時(shí)定量PCR和Western blot結(jié)果證實(shí)TRAF3IP3蛋白高水平表達(dá)。結(jié)論成功構(gòu)建了pIRES-EGFP-TRAF3IP3真核表達(dá)質(zhì)粒,為T(mén)RAF3IP3基因功能的研究奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 河北聯(lián)合大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科;河北聯(lián)合大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： TRAFIP 真核表達(dá) 轉(zhuǎn)染 HEK細(xì)胞
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81072093) 河北省青年科學(xué)基金(C2012401039)
【分類(lèi)號(hào)】：R346
【正文快照】： TRAF3IP3(TRAF3 interacting protein 3)又被稱(chēng)作T3JAM[TRAF3-interacting Jun N-terminal kinase(JNK)-activating modulator],是2003年發(fā)現(xiàn)的一個(gè)人類(lèi)基因,因其蛋白產(chǎn)物能夠特異性地與腫瘤壞子因子受體相關(guān)因子3(TNF receptor-associated factor 3,TRAF3)蛋白相互作用而得

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李蕾,王潤(rùn)田,王兆源,楊永杰,葛錫銳,王蕙芬;模擬mIL-18天然生成真核表達(dá)體系的構(gòu)建及生物活性初探[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2003年12期

2 杜德偉,賈戰(zhàn)生,秦鴻雁,劉秋平,周永興,韓驊;HCV E1/E2-Fc融合基因真核載體的構(gòu)建及表達(dá)產(chǎn)物的鑒定[J];胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志;2004年03期

3 楊高云,李芳,蔣明,狄春輝,黃家強(qiáng);真核表達(dá)質(zhì)粒pBK-IL-1ra的構(gòu)建及表達(dá)[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào);2000年04期

4 王露,張穎妹,曹麗,王鶯,宋泉聲,馬大龍;血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子促進(jìn)成年小鼠胸腺細(xì)胞的增殖與分化[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2003年02期

5 劉承利,竇科峰,臧曉霞,朱幫福,柴玉波,杜可軍,陳蘇民;小鼠4-1BBL基因真核表達(dá)載體構(gòu)建及其在COS-7細(xì)胞中的表達(dá)[J];西北國(guó)防醫(yī)學(xué)雜志;2003年06期

6 左澤華,李輝,伍欣星;pEGFP-HPV16 E7重組融合蛋白質(zhì)粒的構(gòu)建及其表達(dá)[J];中國(guó)病毒學(xué);2003年04期

7 李紅華,劉厚奇,湯淑萍,熊俊,湯瑞寶,胡凱猛;hVEGF_(121)基因轉(zhuǎn)染對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)的作用[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2004年10期

8 王春艷,謝鑫,宋朝君,金鎮(zhèn)勛,歐陽(yáng)為明,金伯泉;人上皮細(xì)胞黏附分子融合蛋白真核表達(dá)載體的構(gòu)建、表達(dá)及初步鑒定[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2004年06期

9 沈定文,李雍龍,劉文琪,龍小純,劉娟;日本血吸蟲(chóng)真核表達(dá)重組質(zhì)粒pcDNA3-Sj26的構(gòu)建及其在樹(shù)突狀細(xì)胞中的表達(dá)[J];寄生蟲(chóng)與醫(yī)學(xué)昆蟲(chóng)學(xué)報(bào);2005年02期

10 徐華國(guó);盧春;程林;曾怡;秦娣;呂志剛;陳秀英;;KSHV包膜糖蛋白編碼基因K8.1、K8.1A和gL的克隆及真核表達(dá)[J];南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2007年05期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 劉忠泉;邢愛(ài)英;賈紅彥;李自慧;鄭曉靜;曹庭明;杜風(fēng)嬌;杜博平;古淑香;張宗德;;結(jié)核分枝桿菌復(fù)蘇因子E的真核表達(dá)及鑒定[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)結(jié)核病學(xué)分會(huì)2010年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2010年

2 王應(yīng);張穎妹;韓文玲;馬大龍;;人CKLF1是人CC趨化因子受體4的功能配體[A];中國(guó)免疫學(xué)會(huì)第四屆學(xué)術(shù)大會(huì)會(huì)議議程及論文摘要集[C];2002年

3 傅新巧;張?zhí)K明;褚倩;肖文伍;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞轉(zhuǎn)染人TH基因的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

4 李巍;劉玉峰;付萌;王剛;韓驊;;天然抗角蛋白自身抗體重鏈轉(zhuǎn)基因質(zhì)粒的構(gòu)建及真核表達(dá)[A];2003中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2003年

5 余自強(qiáng);董寧征;白霞;阮長(zhǎng)耿;;人血小板糖蛋白Ⅵ真核表達(dá)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)血液學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

6 許利軍;吳南屏;姚航平;范俊;;人類(lèi)巨細(xì)胞病毒胞膜磷酸化蛋白65的真核表達(dá)[A];2005年浙江省醫(yī)學(xué)病毒學(xué)、醫(yī)學(xué)微生物與免疫學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2005年

7 房亞?wèn)|;黃躍生;黨永明;張家平;陳渝;張瓊;;大鼠MAP4重組腺病毒載體的構(gòu)建及其在細(xì)胞中的表達(dá)鑒定[A];第四屆全國(guó)燒傷救治專(zhuān)題研討會(huì)燒傷感染救治新進(jìn)展論文匯編[C];2006年

8 袁順宗;譚江琳;馬兵;彭旭;賀偉峰;黃正根;程文廣;賈雄飛;王曉娟;胡婕;甘成軍;陳希煒;胡曉紅;張小容;羅高興;吳軍;;激光共聚焦技術(shù)檢測(cè)ITGB4BP與P311間的相互作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)燒傷外科學(xué)分會(huì)2009年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

9 李志勇;田衛(wèi)東;陳希哲;劉磊;鄭嘵輝;湯煒;李聲偉;;牙本質(zhì)涎磷蛋白真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)[A];2005'中國(guó)修復(fù)重建外科論壇論文匯編[C];2005年

10 許利軍;吳南屏;姚航平;范俊;;人類(lèi)巨細(xì)胞病毒胞膜磷酸化蛋白65的真核表達(dá)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)全國(guó)第九次感染病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 白毅;上海創(chuàng)建大規(guī)模細(xì)胞DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)平臺(tái)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2005年

2 張中橋;NDRG2可誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞HepG2凋亡[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2004年

3 王全楚;組織工程化血管離臨床有多遠(yuǎn)[N];健康報(bào);2005年

4 馬昕皓;癌癥基因治療傳遞系統(tǒng)現(xiàn)狀[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2004年

5 吳軍　楊太成;主動(dòng)特異性免疫療法治療腫瘤[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2003年

6 李杰;抗原特異TCR基因修飾T細(xì)胞技術(shù)的建立和應(yīng)用[N];科技日?qǐng)?bào);2007年

7 吳一福;川大成功建立人新基因PCIA1細(xì)胞株[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

8 余志平;腫瘤聚糖新藥研發(fā)瞄準(zhǔn)聚糖形成[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2005年

9 婁彥艷 魏于全;腫瘤基因與分子疫苗面面觀[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2001年

10 張中橋;納米微囊載體具有基因治療潛能[N];保健時(shí)報(bào);2005年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 馬越云;抗LPS Fab、BPI和Fab-BPI融合蛋白真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其在CHO細(xì)胞中的表達(dá)[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2001年

2 吳浩;人腫瘤壞死因子樣弱凋亡因子的克隆、表達(dá)及功能研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2003年

3 李暉;結(jié)核病Mtb8.4/hIL-12嵌合DNA疫苗的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2004年

4 晏偉;人類(lèi)新基因MAGE-H1/Apr-1與APMCF1結(jié)構(gòu)與功能的的初步研究[D];中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué);2003年

5 甘強(qiáng);rhBMP9的真核表達(dá)，純化及體外生物骨誘導(dǎo)活性分析[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

6 阮承邁;抗HBsAg抗體在CHO細(xì)胞中表達(dá)量提高研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2002年

7 黃慶生;組織型纖溶酶原激活物DNA改組的探索研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2001年

8 饒小泉;MBD2基因缺陷促進(jìn)血管生成并改善小鼠下肢缺血損傷[D];華中科技大學(xué);2011年

9 張貴星;光誘導(dǎo)表達(dá)載體的構(gòu)建及其在鹽藻除草劑抗性轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用[D];鄭州大學(xué);2003年

10 杜可軍;人lrg基因的表達(dá)分布及功能的初步分析[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李蕾;模擬小鼠IL-18天然生成的真核表達(dá)載體體系的構(gòu)建及其生物學(xué)活性的初步研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2002年

2 白志軍;人MBL在哺乳細(xì)胞中表達(dá)的研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2004年

3 彭新;人微小病毒B19-VP2基因真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建[D];鄭州大學(xué);2003年

4 岳挺;共刺激分子配體PD-L1、PD-L2的真核表達(dá)及其轉(zhuǎn)基因小鼠的制備[D];揚(yáng)州大學(xué);2005年

5 曹康;流感病毒血凝素HA1基因克隆及其真核表達(dá)[D];四川大學(xué);2005年

6 朱偉;LMP2A和BZLF1融合基因重組腺病毒表達(dá)載體的構(gòu)建和初步應(yīng)用[D];青島大學(xué);2006年

7 程序;激活素A的真核表達(dá)以及中藥抗腫瘤激活素A相關(guān)機(jī)制的初步探討[D];東北師范大學(xué);2008年

8 劉t，

本文編號(hào)：636538