發(fā)布時(shí)間：2017-07-15 11:22

  本文關(guān)鍵詞：人成纖維細(xì)胞生長因子-21單克隆抗體的制備及抗原表位的確定

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【摘要】：目的制備小鼠抗人成纖維細(xì)胞生長因子(hFGF)-21單克隆抗體(mAb),通過細(xì)菌展示確定該mAb的抗原表位。方法用hFGF-21作為檢測(cè)和免疫抗原,間接ELISA篩選分泌抗人hFGF-21 mAb的雜交瘤細(xì)胞株;用FITC標(biāo)記該mAb,并克隆hFGF-21的不同片段到展示載體Apex上,通過流式細(xì)胞儀篩選其抗原表位。結(jié)果成功篩選出1株抗hFGF-21抗體的細(xì)胞株,其分泌抗體重鏈的亞型為IgG 2b,輕鏈為Kappa鏈;該雜交瘤細(xì)胞株腹水的效價(jià)為1∶4.096×106;傳30代及液氮中保存3個(gè)月,該細(xì)胞株能穩(wěn)定分泌抗hFGF-21 mAb,且效價(jià)穩(wěn)定;Western blot法檢測(cè)證明該抗體與人FGF-21有很好的特異性;該mAb與小鼠FGF-21有交叉反應(yīng);通過流式細(xì)胞儀對(duì)抗原表位的篩選,該mAb可與hFGF-21下游的第107~121個(gè)氨基酸反應(yīng)。結(jié)論成功的制備出特異性、高穩(wěn)定性的小鼠抗hFGF-21 mAb,確定了該mAb的抗原表位在第107~121位氨基酸。
【作者單位】： 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院生物制藥教研室;
【關(guān)鍵詞】： 人成纖維細(xì)胞生長因子- 單克隆抗體 細(xì)菌展示 流式細(xì)胞術(shù)
【基金】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)博士啟動(dòng)基金(2010RCB52)
【分類號(hào)】：R392.12
【正文快照】： 成纖維細(xì)胞生長因子-21(fibroblast growth factor-21,FGF-21)是成纖維細(xì)胞生長因子家族的一名新成員,具有降低血糖、降低甘油三酯、升高高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)、降低低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)等功能,并且可以維持人體血糖穩(wěn)定,避免高

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 尹成凱;徐黎明;任桂萍;張巧;劉向宇;田輝;李德山;;酵母展示篩選scFv方法的建立[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2009年12期

2 徐黎明;尹成凱;任桂萍;田輝;王雪琴;丁良君;李德山;;篩選Fab抗體庫的細(xì)菌展示技術(shù)的建立[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2011年10期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 徐嘉妤;敖娜;都健;趙曉娟;;成纖維細(xì)胞生長因子21與非酒精性脂肪性肝病[J];國際消化病雜志;2013年06期

2 徐黎明;尹成凱;任桂萍;田輝;王雪琴;丁良君;李德山;;篩選Fab抗體庫的細(xì)菌展示技術(shù)的建立[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2011年10期

3 徐黎明;任桂萍;尹杰超;田輝;李德山;;基于流式細(xì)胞術(shù)的scFv抗體庫篩選技術(shù)的建立[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2013年01期

4 徐黎明;郭茉;任桂萍;尹杰超;李德山;;基于抗原-抗體共表達(dá)的細(xì)菌展示技術(shù)的優(yōu)化[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2013年04期

5 付坤;柳景華;;成纖維細(xì)胞生長因子21:從生理作用到臨床研究[J];中國循環(huán)雜志;2014年04期

6 張晶;付潔;宋海峰;;真核表達(dá)系統(tǒng)的抗體庫技術(shù)研究進(jìn)展[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2014年08期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張晶;哺乳動(dòng)物細(xì)胞展示型人源ScFv抗體庫構(gòu)建及靶向ErbB3 ScFv篩選[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2014年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 賈帥爭(zhēng);真核蛋白表面展示系統(tǒng)[J];國外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊(cè));2000年01期

2 賈帥爭(zhēng),孫紅琰,王全立;酵母表面展示技術(shù)及應(yīng)用[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;2001年02期

3 郭波,謝佩蓉,鄒強(qiáng),鄭萍;酵母表面展示系統(tǒng)研究進(jìn)展[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2002年01期

4 賈帥爭(zhēng),孫紅琰,劉曉達(dá),杜芝燕,杜勇,王全立,章?lián)P培;HCVNS3基因片段酵母展示文庫的構(gòu)建和鑒定[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2001年01期

5 劉向昕,展德文,張兆山;細(xì)菌表面展示技術(shù)的應(yīng)用研究進(jìn)展[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;2005年02期

6 郭波,鄭萍,謝佩蓉,吳玉章,鄒強(qiáng);酵母細(xì)胞表面展示的hDAF對(duì)補(bǔ)體在酵母細(xì)胞表面沉積的抑制作用[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2004年03期

7 尹成凱;徐黎明;任桂萍;張巧;劉向宇;田輝;李德山;;酵母展示篩選scFv方法的建立[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2009年12期

8 鐘彥偉,成軍,施雙雙,夏小兵,李克,董菁,劉妍,楊繼珍;抗HBsAg人源單鏈可變區(qū)抗體的篩選與可溶性抗體的表達(dá)[J];中國病毒學(xué);2001年02期

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馬麗娜;劉永生;陳豪泰;孫德惠;張杰;;Asia1型口蹄疫抗原位點(diǎn)研究進(jìn)展[J];中國人獸共患病學(xué)報(bào);2008年12期

2 逯好英,徐東剛,肖定華,潘和平,王春杰;HCVC 蛋白基因在 E . coli 中的表達(dá)及其抗原表位分析[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;1997年03期

3 李芳秋,嚴(yán)明,武建國;親環(huán)素A抗原表位氨基酸序列及三維結(jié)構(gòu)研究[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2001年03期

4 柯\~,戚中田,溫新宇,施明,趙平,沈倍奮;從隨機(jī)9肽庫中篩選HCV抗原表位[J];中國免疫學(xué)雜志;2002年12期

5 羅勇 ,陳受霓;植物細(xì)胞工廠和粘膜疫苗[J];國外醫(yī)學(xué).預(yù)防.診斷.治療用生物制品分冊(cè);2004年04期

6 夏明燦,林怡,熊思東,儲(chǔ)以微;MUC1腫瘤抗原表位PDTRP基因免疫誘導(dǎo)的體內(nèi)外抗瘤效應(yīng)[J];中國腫瘤生物治療雜志;2004年03期

7 胡族瓊,趙衛(wèi),龍北國,江麗芳,郭新雄;SARS冠狀病毒M蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)和B細(xì)胞抗原表位的穩(wěn)定性分析[J];廣東醫(yī)學(xué);2005年05期

8 田旺 ,李正赫 ,曹學(xué)琳 ,楊文博 ,白鋼;應(yīng)用噬菌體隨機(jī)肽庫技術(shù)研究干擾素-α2b抗原表位[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2005年07期

9 關(guān)琪;王素芬;張卓然;成保平;吳薇;;B′亞型人類免疫缺陷病毒的基因序列分析[J];中國微生態(tài)學(xué)雜志;2005年06期

10 王曉紅;盧海蓉;章剛;陳少娟;黃德新;李凌云;林楓;;單純皰疹病毒II型糖蛋白G主要抗原表位的表達(dá)和抗原性檢測(cè)[J];中國生物工程雜志;2007年09期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 胡曉林;;B細(xì)胞抗原表位研究進(jìn)展[A];天津市核學(xué)會(huì)2005年學(xué)術(shù)交流會(huì)論文匯編[C];2005年

2 周宇;王永山;范紅結(jié);歐陽偉;唐雨德;王忠燦;;IBDV抗原表位與VP2組合基因的分子構(gòu)建及其在昆蟲細(xì)胞中的表達(dá)[A];第四屆第十次全國學(xué)術(shù)研討會(huì)暨動(dòng)物微生態(tài)企業(yè)發(fā)展戰(zhàn)略論壇論文集（下冊(cè)）[C];2010年

3 李玉嬌;王晶;趙慧;賈海英;李博;馬秀敏;溫浩;丁劍冰;;細(xì)粒棘球絳蟲Eg95抗原表位的二級(jí)結(jié)構(gòu)和表位預(yù)測(cè)[A];2011新型疫苗與抗體創(chuàng)制關(guān)鍵技術(shù)及質(zhì)量控制研討會(huì)論文集[C];2011年

4 黃革;王德斌;郭黎平;趙念璽;李媛媛;陸士新;;食管癌相關(guān)基因2(ECRG2)多肽C末端抗原表位在E.coli和COS-7細(xì)胞中的表達(dá)分析[A];科技、工程與經(jīng)濟(jì)社會(huì)協(xié)調(diào)發(fā)展——中國科協(xié)第五屆青年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2004年

5 王進(jìn)榮;楊利國;;人卵泡抑制素α亞基抗原表位的預(yù)測(cè)[A];第四屆中國畜牧獸醫(yī)青年科技工作者學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2001年

6 陳書明;張秋偉;曹瑞兵;陳溥言;;雞腎型傳染性支氣管炎病毒S1抗原表位富集區(qū)在畢赤酵母中的表達(dá)[A];全國動(dòng)物生理生化第十次學(xué)術(shù)交流會(huì)論文摘要匯編[C];2008年

7 林祥梅;鄧俊花;李雅靜;吳紹強(qiáng);;南非Ⅱ型口蹄疫抗原表位篩選、表達(dá)及ELISA檢測(cè)方法研究[A];動(dòng)物檢疫學(xué)分會(huì)2010年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2010年

8 李越希;陶開華;張錦海;黃培堂;;SARS病毒的S蛋白和N蛋白抗原表位的分析、基因合成、表達(dá)純化及鑒定[A];科技、工程與經(jīng)濟(jì)社會(huì)協(xié)調(diào)發(fā)展——中國科協(xié)第五屆青年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2004年

9 王凌;閉蘭;張愛華;;用噬菌體隨機(jī)7肽庫篩選WuT4單抗人CD4 B細(xì)胞抗原表位[A];第六屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2008年

10 張興梅;劉剛;孫曼霽;;應(yīng)用組合化學(xué)新技術(shù)研究人腦乙酰膽堿酯酶的抗原表位[A];第七屆全國生化藥理學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要集[C];2000年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 陸志城;為AD疫苗研發(fā)帶來新希望[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2002年

2 肖鑫 朱曉軍;抗體陰性不能排除感染丙肝[N];健康報(bào);2003年

3 本報(bào)記者 李天舒　胡德榮;捕捉一等獎(jiǎng)“閃光點(diǎn)”[N];健康報(bào);2010年

4 胡德榮;上海:非典病毒特異性抗體制備成功[N];健康報(bào);2003年

5 通訊員 吳志軍;我國丙型肝炎疫苗研究進(jìn)展獲突破[N];科技日?qǐng)?bào);2003年

6 記者 劉歡;同性戀人群艾滋病感染率達(dá)7.26%[N];北京日?qǐng)?bào);2010年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉海燦;結(jié)核分枝桿菌八種蛋白抗原中人T/B細(xì)胞抗原表位多態(tài)性研究[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2014年

2 郭愛疆;豬帶絳蟲六鉤蚴TSOL18抗原表位及組織定位的研究[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

3 商紹彬;豬圓環(huán)病毒衣殼蛋白抗原表位的精細(xì)定位與間接ELISA檢測(cè)技術(shù)[D];浙江大學(xué);2007年

4 王艷華;弓形蟲代謝分泌抗原和表面蛋白1抗原表位研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2011年

5 劉霄卉;JSRV表面蛋白抗原表位的篩選及檢測(cè)試劑盒的制備[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

6 李崢;高致病性禽流感H5N1病毒血凝素蛋白中和抗原表位鑒定及其跨物種傳播規(guī)律的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2009年

7 蔡瑞琨;高免疫原性T細(xì)胞抗原表位預(yù)測(cè)方法的研究[D];華中科技大學(xué);2012年

8 張巍;抗人TNF-α單抗Z12識(shí)別的抗原表位研究及其人源化改造[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2003年

9 耿宏偉;藍(lán)舌病病毒群特異性構(gòu)象抗原表位的初步鑒定及競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

10 王哲;耶爾森氏菌蛋白在促甲狀腺素受體自身抗體產(chǎn)生中分子模擬機(jī)制的研究[D];山東大學(xué);2010年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張志榜;豬流行性腹瀉病毒膜蛋白和核蛋白抗原表位的鑒定[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2011年

2 石曉妮;小反芻獸疫病毒H、F蛋白抗原表位的鑒定和免疫學(xué)特性研究[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

3 邱炎;幽門螺桿菌尿素酶B抗原表位的鑒定[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

4 張琳;鴨坦布蘇病毒E蛋白抗原表位的鑒定[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

5 魏剛剛;血吸蟲蛋白抗原表位的預(yù)測(cè)及其在診斷抗原篩選方面的應(yīng)用[D];華東理工大學(xué);2013年

6 張婷;抗人CD40單抗5C11抗原識(shí)別表位的初步研究[D];蘇州大學(xué);2011年

7 劉暢;抗腎小球基底膜病患者血清抗體的異質(zhì)性及其臨床病理的相關(guān)性分析[D];鄭州大學(xué);2010年

8 陳欣;副豬嗜血桿菌的分離與單抗制備及其抗原表位鑒定[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2011年

9 郝輝;SBEM蛋白在不同乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)及抗原表位的預(yù)測(cè)[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

10 黃埡婷;日本乙型腦炎病毒E蛋白單克隆抗體的篩選及其抗原表位的初步鑒定研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

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