發(fā)布時間：2017-07-15 12:22

  本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)化生長因子-β不同亞型對前軟骨干細(xì)胞增殖分化的影響

  更多相關(guān)文章： 前軟骨干細(xì)胞 轉(zhuǎn)化生長因子-β 增殖 分化

【摘要】：目的通過觀察轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)3種不同亞型(β1、β2和β3)對前軟骨干細(xì)胞(PSCs)的增殖分化及細(xì)胞外基質(zhì)合成的影響,為構(gòu)建組織工程學(xué)軟骨組織尋找理想的細(xì)胞因子。方法通過免疫磁珠分選法得到經(jīng)過篩選和純化的PSCs細(xì)胞,分別用含有濃度為10ng/mL的3種亞型的重組TGF-β培養(yǎng)液對PSCs進(jìn)行培養(yǎng)。PSCs培養(yǎng)后第0、3、6、9天,采用MTT法與BrdU/PI雙參法測細(xì)胞增殖及DNA合成水平,采用RT-PCR法測定ColⅡ、Aggrecan基因的表達(dá)。采用免疫組化法測定培養(yǎng)2周后各組細(xì)胞SOX9蛋白表達(dá)情況。結(jié)果培養(yǎng)3d后,TGF-β1組PSCs的增殖活性明顯較對照組下降(P0.05),而TGF-β2、TGF-β3組增殖活性與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。6d后,與對照組相比,TGF-β1組細(xì)胞增殖活性明顯降低(P0.05);而TGF-β2、TGF-β3組則顯示了相反的結(jié)果,增殖活性較對照組明顯增強,且TGF-β3組高于TGF-β2組(P0.05)。DNA合成呈同樣趨勢。RT-PCR分析顯示,隨著時間的延長,與對照組相比,TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3組ColⅡ基因表達(dá)均呈上升趨勢;TGF-β1與TGF-β3組Aggrecan的表達(dá)亦較對照組增加,但TGF-β2組Aggrecan的基因表達(dá)無明顯改變。免疫組化檢測結(jié)果顯示,TGF-β1、TGF-β3組的SOX9蛋白合成高于對照組(P0.05),而TGF-β2組與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論 TGF-β1能抑制PSCs增殖活性,而TGF-β2和TGF-β3具有促進(jìn)PSCs增殖的作用,TGF-β1與TGF-β3均能促進(jìn)PSCs細(xì)胞分化,而TGF-β2對于分化的誘導(dǎo)作用不明顯。
【作者單位】： 廣州軍區(qū)武漢總醫(yī)院骨科;
【關(guān)鍵詞】： 前軟骨干細(xì)胞 轉(zhuǎn)化生長因子-β 增殖 分化
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 軟骨自我修復(fù)能力極為有限,盡管傳統(tǒng)的手術(shù)治療可以起到一定修復(fù)作用,但實際上髓腔及血液中的成軟骨細(xì)胞無法到達(dá)損傷部位,進(jìn)而增殖分化形成具有一定強度的軟骨組織[1],最終損傷部位將為纖維疤痕組織所替代,無法恢復(fù)關(guān)節(jié)正常的生理構(gòu)造和功能。故軟骨損傷的治療一直困擾著臨

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2 宋錦t，

本文編號：543858