斑點酶免疫滲濾法定量檢測雌三醇的實驗研究
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【摘要】:目的制備高特異性的抗雌三醇(E3)單克隆抗體(mAb),建立操作簡便、敏感、快速適用于基層使用的E3檢測方法。方法采用活化酯法制備偶聯(lián)物E3-HRP、E3-BSA、3-OVA。應(yīng)用mAb技術(shù)制備抗E3的mAb;以硝酸纖維素膜為固相載體,抗E3 mAb為包被抗體,建立競爭抑制模式的斑點酶免疫滲濾法。結(jié)果篩選出5株可分泌特異性抗E3 mAb的雜交瘤細胞株。mAb效價為1×105~5×105,親和常數(shù)為5.1×108~5.2×109L/mol。檢測敏感度為2 ng/mL,檢測范圍2~200 ng/mL。結(jié)論建立了檢測速度快、靈敏度高、應(yīng)用方便的斑點酶免疫滲濾法。
【作者單位】: 西北大學(xué)生命學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 斑點免疫酶滲濾法 雌三醇 單克隆抗體
【基金】:陜西省教育廳重點實驗室重點科研計劃項目(11JS085) 陜西省科技廳社會發(fā)展攻關(guān)項目(2011K12-61)
【分類號】:R392.11
【正文快照】: 雌激素(estrogen)屬類固醇激素,主要包括雌二醇(estradiol,E2)、雌酮(estrone,E1)和雌三醇(estriol,E3)。E3是E1和E2的分解代謝產(chǎn)物,具有弱雌激素活性。在體內(nèi)E2首先降解生成E1,E1又進一步轉(zhuǎn)化生成E3,El和E2在體內(nèi)可以互相轉(zhuǎn)化,而E3的生成是不可逆的,即E3生成后不能逆轉(zhuǎn)化為E2
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本文編號:498303
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