本文關(guān)鍵詞：BMP-2誘導(dǎo)人跟腱來(lái)源肌腱干細(xì)胞成軟骨分化的實(shí)驗(yàn)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的探討B(tài)MP-2體外誘導(dǎo)人跟腱來(lái)源肌腱干細(xì)胞(human Achilles tendon-derived stem cells,hATDSCs)成軟骨分化的作用。方法無(wú)菌條件下取急性跟腱斷裂患者自愿捐贈(zèng)的跟腱組織,膠原酶消化獲得有核細(xì)胞;以500個(gè)/cm2細(xì)胞密度接種,細(xì)胞貼壁呈克隆樣生長(zhǎng),混合培養(yǎng)獲得原代hATDSCs;體外傳代培養(yǎng)至第3代,流式細(xì)胞儀檢測(cè)hATDSCs免疫表型;油紅O染色、茜素紅染色及番紅O/快綠染色分別鑒定hATDSCs成脂、成骨及成軟骨分化能力。取第3代細(xì)胞體外三維培養(yǎng)成微球后分為兩組,實(shí)驗(yàn)組用重組人BMP-2(recombinant human BMP-2,rhBMP-2)干預(yù),對(duì)照組不進(jìn)行干預(yù)。3周后行微球大體觀察;組織學(xué)切片行HE染色、番紅O/快綠染色、Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色觀察;實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)成軟骨特異性基因SOX9、Ⅱ型膠原和軟骨聚集蛋白多糖(Aggrecan)表達(dá)。結(jié)果原代hATDSCs體外培養(yǎng)呈克隆樣集落生長(zhǎng);傳代后以紡錘形、成纖維樣細(xì)胞生長(zhǎng),形態(tài)均一。hATDSCs陽(yáng)性表達(dá)MSCs特異性表面標(biāo)志CD44、CD90、CD105,陰性表達(dá)CD34、CD45和CD146。多向分化潛能鑒定示hATDSCs成脂誘導(dǎo)3周油紅O染色陽(yáng)性,成骨誘導(dǎo)4周茜素紅染色陽(yáng)性,成軟骨誘導(dǎo)3周番紅O/快綠染色陽(yáng)性。rhBMP-2誘導(dǎo)hATDSCs 3周,實(shí)驗(yàn)組微球形成,體積顯著大于對(duì)照組;HE染色、番紅O/快綠染色、Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色均呈陽(yáng)性,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)示SOX9、Ⅱ型膠原和Aggrecan mRNA表達(dá)顯著高于對(duì)照組(P0.05)。結(jié)論體外BMP-2可促進(jìn)hATDSCs成軟骨分化和蛋白聚糖合成增加,為研究慢性腱病組織病理學(xué)變化提供細(xì)胞生物學(xué)依據(jù)。
【作者單位】： 東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院骨科;東南大學(xué)醫(yī)學(xué)院;通遼市科爾沁第一人民醫(yī)院骨科;
【關(guān)鍵詞】： 肌腱干細(xì)胞 成軟骨分化 慢性腱病 BMP-
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金青年基金項(xiàng)目(81201422) 江蘇省自然科學(xué)基金青年基金項(xiàng)目(BK2012334) 東南大學(xué)基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)“創(chuàng)新基金”項(xiàng)目(3290002401) 國(guó)家大學(xué)生創(chuàng)新訓(xùn)練計(jì)劃(1210286090) 中國(guó)博士后科學(xué)基金項(xiàng)目(2012M520983) 江蘇省博士后科學(xué)基金特別資助項(xiàng)目~~
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 慢性腱病是運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)最常見(jiàn)的軟組織退行性病變,好發(fā)于精英運(yùn)動(dòng)員[1]。目前對(duì)于慢性腱病的治療方法有限,療效不明確[2],這與對(duì)該病病理機(jī)制缺乏深入了解有關(guān)。慢性腱病典型的組織學(xué)表現(xiàn)為肌腱愈合失敗,可見(jiàn)蛋白聚糖沉積導(dǎo)致基質(zhì)紊亂、基質(zhì)金屬蛋白酶及組織抑制金屬蛋白酶表達(dá)改

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本文編號(hào)：498186