發(fā)布時間：2017-06-29 13:19

  本文關(guān)鍵詞：帶myc標(biāo)簽的人HER2基因真核表達載體的構(gòu)建及其生物學(xué)功能，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的構(gòu)建人類HER2基因的真核表達載體,并對其促進乳腺癌細胞增殖效果及靶向藥物敏感性進行驗證。方法采用PCR技術(shù)擴增出HER2基因,將其插入到pXJ-40-myc載體中,酶切和測序驗證后,將其轉(zhuǎn)染到乳腺癌ZR75-1細胞中,Western blot法檢測其表達情況;CCK8法測定細胞生長曲線;加入靶向藥物曲妥珠單克隆抗體后,觀察轉(zhuǎn)染細胞對藥物的反應(yīng)。結(jié)果酶切和測序結(jié)果證實表達質(zhì)粒構(gòu)建成功;Western blot法結(jié)果顯示,myc-HER2蛋白在轉(zhuǎn)染細胞中成功表達;轉(zhuǎn)染myc-HER2的乳腺癌細胞較空載體細胞生長較快;加入曲妥珠單克隆抗體后,轉(zhuǎn)染myc-HER2的細胞生長明顯受到抑制。結(jié)論成功構(gòu)建了帶myc標(biāo)簽的HER2基因真核表達載體,為進一步研究曲妥珠單抗的耐藥奠定了實驗基礎(chǔ)。
【作者單位】： 解放軍醫(yī)學(xué)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院附屬醫(yī)院乳腺腫瘤科;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物工程研究所;
【關(guān)鍵詞】： HER myc ZR-乳腺癌細胞
【基金】：國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃(863)(2006AA02A246) 北京市自然科學(xué)基金(7132155) 國家自然科學(xué)基金(31100604)
【分類號】：R392-33
【正文快照】： 人類表皮生長因子受體2(human epidermalgrowth factor receptor-2,HER2)基因定位于人染色體17q21,編碼的蛋白相對分子質(zhì)量(Mr)約為185 000。研究表明[1-2],HER2基因過表達的乳腺癌患者,具有惡性程度高、預(yù)后差的特點。曲妥珠單克隆抗體(trastuzumab)作為第一個用于抗HER2的

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【相似文獻】

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本文編號：498070