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大鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型TLR6的表達(dá)及瑞舒伐他汀干預(yù)后的影響研究

發(fā)布時(shí)間:2017-06-09 20:13

  本文關(guān)鍵詞:大鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型TLR6的表達(dá)及瑞舒伐他汀干預(yù)后的影響研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:本實(shí)驗(yàn)采用SD(Sprague dawley)大鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型,應(yīng)用HE染色、免疫組化蛋白定量、RT-PCR檢測(cè)等方法,觀察動(dòng)脈粥樣硬化大鼠胸主動(dòng)脈中TLR6(Toll-like receptors6,TLR6)的表達(dá)情況。初步研究并探討瑞舒伐他汀對(duì)TLR6的表達(dá)變化的作用和對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的影響。方法:本實(shí)驗(yàn)共選擇36只雄性SD大鼠,平均6-8周齡,體重約180g-200g,先使用普通飼料順應(yīng)性喂養(yǎng)7天,然后采取隨機(jī)抽簽的方法將36只大鼠分為兩組,分別為:對(duì)照組(n=12)和實(shí)驗(yàn)組(n=24)。實(shí)驗(yàn)組予以高脂飼料喂養(yǎng),然后在其基礎(chǔ)上予以維生素D3肌注+尼古丁灌胃,第4周后,將實(shí)驗(yàn)組24只大鼠再隨機(jī)分為模型組(n=12)和藥物組(n=12),模型組和藥物組大鼠繼續(xù)每日使用高脂飼料喂養(yǎng)。同時(shí),在高脂飼料飼喂的基礎(chǔ)上,模型組加用1ml生理鹽水對(duì)大鼠進(jìn)行灌胃,連續(xù)4周,藥物組則給予同等劑量的瑞舒伐他汀(5mg/kg/d)對(duì)大鼠進(jìn)行灌胃,連續(xù)4周。實(shí)驗(yàn)?zāi)y(cè)定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平。采用HE染色觀察大鼠胸主動(dòng)脈血管的組織形態(tài)學(xué)特點(diǎn),采用免疫組化技術(shù)分析大鼠胸主動(dòng)脈TLR6蛋白的表達(dá)情況,采用熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)胸主動(dòng)脈TLR6 mRNA的定量表達(dá)水平。結(jié)果:1、血脂結(jié)果:模型組及藥物組的tc水平、ldl-c水平與對(duì)照組相比均顯著上升,其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),而藥物組較之模型組,其tc水平、ldl-c水平明顯降低(p0.05)。三組之間的tg及hdl-c水平無(wú)顯著性差異(p0.05)。2.病理形態(tài)學(xué)結(jié)果:對(duì)照組可見(jiàn)胸主動(dòng)脈血管各層結(jié)構(gòu)排列正常,管壁比較完整,管壁內(nèi)膜光滑,內(nèi)皮細(xì)胞排列均勻而整齊。模型組可見(jiàn)胸主動(dòng)脈血管組織各層結(jié)構(gòu)排列不規(guī)則,管壁內(nèi)膜不完整,可見(jiàn)其明顯增厚,同時(shí)在管壁內(nèi)有大量增生的平滑肌細(xì)胞,脂質(zhì)斑塊彌漫,可見(jiàn)大量的泡沫細(xì)胞聚集,并有大量脂質(zhì)沉積、鈣化及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。藥物組可見(jiàn)胸主動(dòng)脈血管組織各層結(jié)構(gòu)排列欠規(guī)則,管壁內(nèi)膜欠完整,可見(jiàn)其稍增厚,同時(shí)在管壁內(nèi)有少量平滑肌細(xì)胞增生及炎性細(xì)胞浸潤(rùn),可見(jiàn)少量的泡沫細(xì)胞聚集,血管壁脂質(zhì)沉積和鈣化較模型組減輕。3.免疫組織化學(xué)結(jié)果:tlr6蛋白在大鼠胸主動(dòng)脈中均可見(jiàn)表達(dá),模型組及藥物組的tlr6蛋白表達(dá)水平與對(duì)照組相比均升高(p0.05),而藥物組較之模型組,其tlr6蛋白表達(dá)水平降低(p0.05)。4.熒光定量pcr檢測(cè)結(jié)果:模型組與對(duì)照組及藥物組相比,其胸主動(dòng)脈tlr6mrna表達(dá)水平較高(p0.05),而藥物組較之模型組,其tlr6mrna表達(dá)水平降低(p0.05)。結(jié)論:1.大鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型tlr6的表達(dá)水平升高。2.瑞舒伐他汀可能通過(guò)下調(diào)TLR6的表達(dá)從而改善動(dòng)脈粥樣硬化。
【關(guān)鍵詞】:動(dòng)脈粥樣硬化 TLR6 瑞舒伐他汀
【學(xué)位授予單位】:湖南師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:R543.5;R-332
【目錄】:
  • 摘要4-7
  • ABSTRACT7-12
  • 第一章 引言12-15
  • 第二章 材料和方法15-23
  • 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物15
  • 2.2 主要藥品和試劑15-16
  • 2.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器16
  • 2.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及模型制備16-17
  • 2.5 生化指標(biāo)檢測(cè)17
  • 2.6 取材及組織石蠟切片制備17-18
  • 2.7 HE染色18
  • 2.8 免疫組織化學(xué)染色(ABC法)18-19
  • 2.9 圖像處理及組織病理學(xué)的測(cè)量19-20
  • 2.10 RT-PCR檢測(cè)TLR6 mRNA20-22
  • 2.11 統(tǒng)計(jì)分析22-23
  • 第三章 結(jié)果23-30
  • 3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的一般情況23
  • 3.2 各組血脂情況23-24
  • 3.3 HE染色24-25
  • 3.4 免疫組織化學(xué)染色25-26
  • 3.5 RT-PCR結(jié)果分析26-30
  • 第四章 討論30-35
  • 第五章 結(jié)論35-36
  • 參考文獻(xiàn)36-40
  • 綜述40-52
  • 參考文獻(xiàn)46-52
  • 英文縮寫(xiě)詞表52-54
  • 在讀期間發(fā)表的主要學(xué)術(shù)論文及參與課題54-56
  • 致謝56

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