大鼠動脈粥樣硬化模型TLR6的表達(dá)及瑞舒伐他汀干預(yù)后的影響研究
本文關(guān)鍵詞:大鼠動脈粥樣硬化模型TLR6的表達(dá)及瑞舒伐他汀干預(yù)后的影響研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:本實驗采用SD(Sprague dawley)大鼠動脈粥樣硬化模型,應(yīng)用HE染色、免疫組化蛋白定量、RT-PCR檢測等方法,觀察動脈粥樣硬化大鼠胸主動脈中TLR6(Toll-like receptors6,TLR6)的表達(dá)情況。初步研究并探討瑞舒伐他汀對TLR6的表達(dá)變化的作用和對動脈粥樣硬化的影響。方法:本實驗共選擇36只雄性SD大鼠,平均6-8周齡,體重約180g-200g,先使用普通飼料順應(yīng)性喂養(yǎng)7天,然后采取隨機(jī)抽簽的方法將36只大鼠分為兩組,分別為:對照組(n=12)和實驗組(n=24)。實驗組予以高脂飼料喂養(yǎng),然后在其基礎(chǔ)上予以維生素D3肌注+尼古丁灌胃,第4周后,將實驗組24只大鼠再隨機(jī)分為模型組(n=12)和藥物組(n=12),模型組和藥物組大鼠繼續(xù)每日使用高脂飼料喂養(yǎng)。同時,在高脂飼料飼喂的基礎(chǔ)上,模型組加用1ml生理鹽水對大鼠進(jìn)行灌胃,連續(xù)4周,藥物組則給予同等劑量的瑞舒伐他汀(5mg/kg/d)對大鼠進(jìn)行灌胃,連續(xù)4周。實驗?zāi)y定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平。采用HE染色觀察大鼠胸主動脈血管的組織形態(tài)學(xué)特點(diǎn),采用免疫組化技術(shù)分析大鼠胸主動脈TLR6蛋白的表達(dá)情況,采用熒光定量PCR技術(shù)檢測胸主動脈TLR6 mRNA的定量表達(dá)水平。結(jié)果:1、血脂結(jié)果:模型組及藥物組的tc水平、ldl-c水平與對照組相比均顯著上升,其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),而藥物組較之模型組,其tc水平、ldl-c水平明顯降低(p0.05)。三組之間的tg及hdl-c水平無顯著性差異(p0.05)。2.病理形態(tài)學(xué)結(jié)果:對照組可見胸主動脈血管各層結(jié)構(gòu)排列正常,管壁比較完整,管壁內(nèi)膜光滑,內(nèi)皮細(xì)胞排列均勻而整齊。模型組可見胸主動脈血管組織各層結(jié)構(gòu)排列不規(guī)則,管壁內(nèi)膜不完整,可見其明顯增厚,同時在管壁內(nèi)有大量增生的平滑肌細(xì)胞,脂質(zhì)斑塊彌漫,可見大量的泡沫細(xì)胞聚集,并有大量脂質(zhì)沉積、鈣化及炎癥細(xì)胞浸潤。藥物組可見胸主動脈血管組織各層結(jié)構(gòu)排列欠規(guī)則,管壁內(nèi)膜欠完整,可見其稍增厚,同時在管壁內(nèi)有少量平滑肌細(xì)胞增生及炎性細(xì)胞浸潤,可見少量的泡沫細(xì)胞聚集,血管壁脂質(zhì)沉積和鈣化較模型組減輕。3.免疫組織化學(xué)結(jié)果:tlr6蛋白在大鼠胸主動脈中均可見表達(dá),模型組及藥物組的tlr6蛋白表達(dá)水平與對照組相比均升高(p0.05),而藥物組較之模型組,其tlr6蛋白表達(dá)水平降低(p0.05)。4.熒光定量pcr檢測結(jié)果:模型組與對照組及藥物組相比,其胸主動脈tlr6mrna表達(dá)水平較高(p0.05),而藥物組較之模型組,其tlr6mrna表達(dá)水平降低(p0.05)。結(jié)論:1.大鼠動脈粥樣硬化模型tlr6的表達(dá)水平升高。2.瑞舒伐他汀可能通過下調(diào)TLR6的表達(dá)從而改善動脈粥樣硬化。
【關(guān)鍵詞】:動脈粥樣硬化 TLR6 瑞舒伐他汀
【學(xué)位授予單位】:湖南師范大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R543.5;R-332
【目錄】:
- 摘要4-7
- ABSTRACT7-12
- 第一章 引言12-15
- 第二章 材料和方法15-23
- 2.1 實驗動物15
- 2.2 主要藥品和試劑15-16
- 2.3 主要實驗儀器16
- 2.4 實驗動物分組及模型制備16-17
- 2.5 生化指標(biāo)檢測17
- 2.6 取材及組織石蠟切片制備17-18
- 2.7 HE染色18
- 2.8 免疫組織化學(xué)染色(ABC法)18-19
- 2.9 圖像處理及組織病理學(xué)的測量19-20
- 2.10 RT-PCR檢測TLR6 mRNA20-22
- 2.11 統(tǒng)計分析22-23
- 第三章 結(jié)果23-30
- 3.1 實驗動物的一般情況23
- 3.2 各組血脂情況23-24
- 3.3 HE染色24-25
- 3.4 免疫組織化學(xué)染色25-26
- 3.5 RT-PCR結(jié)果分析26-30
- 第四章 討論30-35
- 第五章 結(jié)論35-36
- 參考文獻(xiàn)36-40
- 綜述40-52
- 參考文獻(xiàn)46-52
- 英文縮寫詞表52-54
- 在讀期間發(fā)表的主要學(xué)術(shù)論文及參與課題54-56
- 致謝56
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