本文關(guān)鍵詞：針刺背俞穴對(duì)失眠模型大鼠腦組織差異蛋白表達(dá)的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的運(yùn)用蛋白質(zhì)組學(xué)實(shí)驗(yàn),通過(guò)液相色譜—質(zhì)譜技術(shù),構(gòu)建針刺背俞穴治療失眠模型大鼠腦組織差異蛋白譜峰,檢測(cè)出針刺改變睡眠質(zhì)量與哪些蛋白相關(guān),證明失眠的病理改變及機(jī)體針刺后所產(chǎn)生的效應(yīng)變化,為失眠證的針灸治療提供有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法實(shí)驗(yàn)共選取150只雄性健康清潔級(jí)SD大鼠(200±10g),采用完全隨機(jī)法將大鼠分為五組,正常喂養(yǎng)觀察7天后顯示一切正常。隨將各組大鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)處理:空白對(duì)照組(A組)不做任何相關(guān)處理;正常捆綁對(duì)照組(B組)每日進(jìn)行一次抓取處理,共抓取9天;正常針刺治療組(C組)在抓取后,自第3天起進(jìn)行針刺,連續(xù)針刺7天;模型對(duì)照組(D組)于實(shí)驗(yàn)開(kāi)始階段應(yīng)用對(duì)氯苯丙氨酸混懸液(PCPA)對(duì)大鼠進(jìn)行腹腔注射,每100g注射lml,共注射2天,抓取從第3天開(kāi)始,不進(jìn)行針刺,其中抓取7天;模型針刺治療組(E組)于實(shí)驗(yàn)開(kāi)始階段應(yīng)用對(duì)氯苯丙氨酸混懸液(PCPA)對(duì)大鼠進(jìn)行腹腔注射,每100g注射lml,共注射2天,自第3天起每日進(jìn)行抓取且針刺治療,其中針刺治療7天;以上實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取材:大鼠斷頭處理后,將頭部放于冰盤(pán)上,用手術(shù)剪迅速撬開(kāi)顱骨輕輕剝離出腦組織;利用液相色譜—質(zhì)譜技術(shù)進(jìn)行不同組間的差異蛋白表達(dá)的分析。結(jié)果1.模型對(duì)照組與模型針刺治療組大鼠于首次腹腔注射對(duì)氯苯丙氨酸混懸液24-36h后,出現(xiàn)晝夜活動(dòng)節(jié)律紊亂,白天活動(dòng)頻繁,部分大鼠情緒明顯躁動(dòng)不安,通過(guò)觀察對(duì)比,與空白對(duì)照組有顯著差異。模型針刺治療組大鼠在進(jìn)行針刺治療之后,睡眠及進(jìn)食飲水均慢慢恢復(fù)模型前狀態(tài)。正常捆綁對(duì)照組與正常針刺治療組兩組大鼠生活規(guī)律,睡眠習(xí)慣及飲食量均無(wú)明顯改變。2.實(shí)驗(yàn)共鑒定到的蛋白質(zhì)組為(ProteinGroup)3383個(gè),其中兩次生物學(xué)分析的每個(gè)通道皆有定量信息的蛋白質(zhì)組數(shù)分別是2743個(gè)和2952個(gè)。五組樣品中,將各通道標(biāo)記113、114、115、116、117與通道均值REF做比值,并分析比較其兩組之間差異蛋白數(shù)量為:A組與D組之間測(cè)得163個(gè)差異蛋白、A組與E組之間測(cè)得203個(gè)差異蛋白、B組與E組之間測(cè)得245個(gè)差異蛋白、D組與E組之間測(cè)得118個(gè)差異蛋白(其中以Ratio+/-1.2且P value0.05篩選的差異表達(dá)蛋白質(zhì)數(shù))。結(jié)論1.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示,針刺背俞穴對(duì)失眠有治療作用;對(duì)失眠模型大鼠進(jìn)行針刺治療后,大鼠腦組織蛋白酶解產(chǎn)生的特異性表達(dá)可能與針刺治療失眠的作用機(jī)制有一定關(guān)聯(lián);并用不同刺激方法產(chǎn)生的蛋白表達(dá)存在一定的差異。2.模型對(duì)照組與模型針刺治療組質(zhì)譜分析后發(fā)現(xiàn)有一定的重復(fù)性,其中一小部分蛋白質(zhì)存在較為明顯差異表達(dá),證明針刺可以改變失眠模型大鼠腦組織蛋白質(zhì)的差異表達(dá);對(duì)于檢測(cè)出的差異蛋白,可能是由于在針刺治療失眠之后所產(chǎn)生的。
【關(guān)鍵詞】：蛋白 液相色譜—質(zhì)譜 失眠 背俞穴 針刺
【學(xué)位授予單位】：河南中醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R245;R-332
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 前言10-12
• 實(shí)驗(yàn)材料12-13
• 1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物12
• 2 主要實(shí)驗(yàn)儀器及試劑12-13
• 實(shí)驗(yàn)方法13-20
• 1 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)部分13-14
• 2 樣品制備14-16
• 3 酶解和肽段定量16
• 4 肽段標(biāo)記16
• 5 質(zhì)譜分析16-20
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果20-29
• 1 大鼠行為學(xué)改變20
• 2 樣品經(jīng)裂解后蛋白質(zhì)定量結(jié)果20
• 3 SDS-PAGE 電泳20-21
• 4 酶解肽段濃度測(cè)定21
• 5 蛋白質(zhì)鑒定結(jié)果21-22
• 6 顯著型差異蛋白22
• 7 差異蛋白功能性的列舉22-23
• 8 各組間差異蛋白的表達(dá)23-29
• 理論探討29-44
• 1 對(duì)失眠病因病機(jī)的認(rèn)識(shí)30-32
• 2 失眠的針灸治療32-33
• 3 課題立論依據(jù)33-37
• 3.1 選題依據(jù)33-34
• 3.2 選穴依據(jù)34-36
• 3.3 選取大鼠失眠模型36-37
• 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析37-43
• 4.1 影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素37-38
• 4.2 差異表達(dá)蛋白的的功能性分類(lèi)38
• 4.3 差異表達(dá)蛋白的的通路分類(lèi)38-40
• 4.4 各組間差異蛋白點(diǎn)的分析說(shuō)明40-43
• 5 問(wèn)題與展望43-44
• 結(jié)論44-45
• 致謝45-46
• 參考文獻(xiàn)46-49
• 附錄1 中英文對(duì)照表49-50
• 附錄2 完全隨機(jī)設(shè)計(jì)分組情況50-53
• 附錄3 文獻(xiàn)綜述53-58
• 參考文獻(xiàn)56-58
• 附錄4 在校期間論文論著和科研情況58

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：針刺背俞穴對(duì)失眠模型大鼠腦組織差異蛋白表達(dá)的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：399922