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單側(cè)學(xué)習(xí)形成雙側(cè)記憶的神經(jīng)元電生理研究

發(fā)布時(shí)間:2017-05-26 21:11

  本文關(guān)鍵詞:單側(cè)學(xué)習(xí)形成雙側(cè)記憶的神經(jīng)元電生理研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:研究經(jīng)單側(cè)學(xué)習(xí)形成雙側(cè)記憶的C57BL-6-gfp小鼠,其barrel區(qū)錐體神經(jīng)元和GABA能抑制性神經(jīng)元內(nèi)在特性及突觸傳遞效率的變化。方法:1.造模:選取出生10天的C57BL-6-gfp小鼠(以下簡(jiǎn)稱(chēng)小鼠),同時(shí)給予5Hz右側(cè)胡須刺激和乙酸丁酯嗅覺(jué)刺激,兩小時(shí)一次,每天5次,連續(xù)訓(xùn)練10天。2.行為學(xué)實(shí)驗(yàn):實(shí)驗(yàn)分為兩組,分別為空白對(duì)照組及聯(lián)合訓(xùn)練組(WS+OS)。行為學(xué)實(shí)驗(yàn)包括T迷宮實(shí)驗(yàn)及胡須頻率實(shí)驗(yàn)。T迷宮實(shí)驗(yàn):將聯(lián)合訓(xùn)練組小鼠及空白對(duì)照組小鼠分別進(jìn)行T迷宮實(shí)驗(yàn),即給予5Hz觸覺(jué)刺激后小鼠立即進(jìn)入T迷宮,對(duì)小鼠回避一側(cè)乙酸丁酯的方向性進(jìn)行記錄。胡須頻率實(shí)驗(yàn),聯(lián)合訓(xùn)練組和空白對(duì)照組小鼠造模期間,每天給予嗅覺(jué)刺激后立即拍攝視頻,應(yīng)用分析軟件對(duì)兩組小鼠雙側(cè)胡須頻率分別統(tǒng)計(jì)記錄。3.電生理實(shí)驗(yàn):將經(jīng)檢測(cè)造模成功后的聯(lián)合訓(xùn)練組小鼠及空白對(duì)照組小鼠進(jìn)行電生理實(shí)驗(yàn)。電生理實(shí)驗(yàn)具體流程為:小鼠異氟烷吸入麻醉后,迅速斷頭取腦,用切片機(jī)做冠狀切片,每片400μm;將切好后的腦片置于已配好的氧合人工腦脊液(ASCF)中(溫度為25°C,提前配好)孵育45-60分鐘;孵育完成后將其轉(zhuǎn)移至灌流槽,30°C對(duì)腦片進(jìn)行灌流;應(yīng)用光學(xué)顯微鏡及熒光顯微鏡定位小鼠雙側(cè)barrel區(qū)谷氨酸能神經(jīng)元及GABA能神經(jīng)元;使用Axonclamp-200B放大器及數(shù)模轉(zhuǎn)換器,全細(xì)胞模式下記錄電流鉗指標(biāo)及電壓鉗指標(biāo),研究小鼠雙側(cè)barrel區(qū)錐體神經(jīng)元及GABA能神經(jīng)元胞體功能變化及突觸傳遞效率的變化,使用Clamp10.1進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果:1.行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:1)T迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果:聯(lián)合訓(xùn)練組小鼠回避乙酸丁酯的概率高于空白對(duì)照組小鼠;2)胡須頻率實(shí)驗(yàn)結(jié)果:聯(lián)合訓(xùn)練組小鼠左右側(cè)胡須頻率均高于空白對(duì)照組小鼠,且刺激側(cè)胡須頻率高于未刺激側(cè)側(cè)胡須頻率。2.電生理實(shí)驗(yàn)結(jié)果:a)電流鉗實(shí)驗(yàn)結(jié)果:1)錐體神經(jīng)元:與空白對(duì)照組相比,聯(lián)合訓(xùn)練組雙側(cè)胡須對(duì)應(yīng)barrel區(qū)的能障降低、動(dòng)作電位間距縮小、絕對(duì)不應(yīng)期縮短、單位時(shí)間內(nèi)動(dòng)作電位發(fā)放個(gè)數(shù)增加;且刺激側(cè)胡須對(duì)應(yīng)barrel區(qū)與對(duì)側(cè)胡須barrel區(qū)相比,能障降低、動(dòng)作電位間距縮小、絕對(duì)不應(yīng)期縮短、單位時(shí)間內(nèi)動(dòng)作電位發(fā)放個(gè)數(shù)增加。2)GABA能神經(jīng)元:與空白對(duì)照組相比,聯(lián)合訓(xùn)練組雙側(cè)胡須對(duì)應(yīng)barrel區(qū)的能障升高、動(dòng)作電位間距增加、絕對(duì)不應(yīng)期延長(zhǎng)、單位時(shí)間內(nèi)動(dòng)作電位發(fā)放個(gè)數(shù)減少;且刺激側(cè)胡須對(duì)應(yīng)barrel區(qū)與對(duì)側(cè)胡須barrel區(qū)相比,能障升高、動(dòng)作電位間距增加、絕對(duì)不應(yīng)期延長(zhǎng)、單位時(shí)間內(nèi)動(dòng)作電位發(fā)放個(gè)數(shù)減少。b)電壓鉗實(shí)驗(yàn)結(jié)果:1)錐體神經(jīng)元:與空白對(duì)照組相比,聯(lián)合訓(xùn)練組雙側(cè)胡須對(duì)應(yīng)barrel區(qū)的s EPSC(自發(fā)性興奮性突觸后電流)的間距縮短、幅度增加;且刺激側(cè)胡須對(duì)應(yīng)barrel區(qū)與對(duì)側(cè)胡須barrel區(qū)相比,s EPSC的間距變化不大、幅度增加。與空白對(duì)照組相比,聯(lián)合訓(xùn)練組雙側(cè)胡須對(duì)應(yīng)barrel區(qū)的s IPSC(自發(fā)性抑制性突觸后電流)的間距增大、幅度減小;且刺激側(cè)胡須對(duì)應(yīng)barrel區(qū)與對(duì)側(cè)胡須barrel區(qū)相比,s IPSC的間距變化不大、幅度減小。2)GABA能神經(jīng)元:與空白對(duì)照比相比,聯(lián)合訓(xùn)練組雙側(cè)胡須對(duì)應(yīng)barrel區(qū)的s EPSC的間距增大、幅度減小;且刺激側(cè)胡須對(duì)應(yīng)barrel區(qū)與對(duì)側(cè)胡須barrel區(qū)相比,s EPSC的間距變化不大、幅度減小。結(jié)論:1.單側(cè)學(xué)習(xí)后記憶可在雙側(cè)儲(chǔ)存;且此種儲(chǔ)存方式為不對(duì)稱(chēng)儲(chǔ)存。2.這種單側(cè)觸須刺激后雙側(cè)儲(chǔ)存的不對(duì)稱(chēng)儲(chǔ)存方式,其大腦皮層雙側(cè)barrel區(qū)錐體神經(jīng)元和GABA能神經(jīng)元內(nèi)在特性發(fā)生了變化。錐體神經(jīng)元突觸后神經(jīng)元興奮性均提高,GABA能神經(jīng)元抑制性均降低,且觸須刺激側(cè)對(duì)應(yīng)的barrel區(qū)的錐體神經(jīng)元突觸后神經(jīng)元的興奮性較另一側(cè)的興奮性更高。3.大腦皮層雙側(cè)barrel區(qū)之間可能有直接聯(lián)系。
【關(guān)鍵詞】:聯(lián)合式學(xué)習(xí)記憶 barrel區(qū) 錐體神經(jīng)元 GABA能神經(jīng)元
【學(xué)位授予單位】:蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類(lèi)號(hào)】:R338
【目錄】:
  • 中文摘要5-7
  • 英文摘要7-10
  • 1.引言10-12
  • 2.材料與方法12-17
  • 3.結(jié)果17-28
  • 4.討論28-32
  • 5.結(jié)論32-33
  • 6.參考文獻(xiàn)33-37
  • 7.致謝37-38
  • 附錄A 英文縮略語(yǔ)對(duì)照表38-39
  • 附錄B 常用試劑配制39-41
  • 附錄C 個(gè)人簡(jiǎn)歷及發(fā)表論文41-42
  • 附錄D 綜述42-49
  • 參考文獻(xiàn)47-49

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):398090

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