慢性心理應(yīng)激會(huì)導(dǎo)致機(jī)體多種功能紊亂,其中包括免疫力下降。慢性心理應(yīng)激能夠負(fù)調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng),但機(jī)制尚未完全闡明。免疫細(xì)胞,包括髓系來(lái)源細(xì)胞,由骨髓造血干細(xì)胞(hematopoietic stem cell, HSC)分化而來(lái),在機(jī)體免疫中發(fā)揮重要作用。本實(shí)驗(yàn)采用短期高強(qiáng)度束縛和長(zhǎng)期溫和束縛慢性心理應(yīng)激小鼠模型,探討不同限制性束縛模式對(duì)小鼠骨髓HSC和髓系來(lái)源細(xì)胞的影響。長(zhǎng)期溫和束縛模型中,對(duì)小鼠連續(xù)束縛4周,每天束縛2次,每次束縛2 h (9:00到17:00間完成);短期高強(qiáng)度束縛模型中,小鼠連續(xù)束縛5天,每天束縛16 h (當(dāng)日17:00到次日9:00)。束縛完成后,取小鼠骨髓和外周血進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù),流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠骨髓HSC (Lin^-CD117⁺Sca1⁺CD150⁺CD48^-)和髓系細(xì)胞(CD11b⁺Ly6C⁺)的比例和絕對(duì)數(shù),以及外周血髓系細(xì)胞的比例和絕對(duì)數(shù),BrdU摻入實(shí)驗(yàn)檢測(cè)小鼠HSC增殖能力。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,長(zhǎng)期溫和應(yīng)激...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.1.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
    1.2 方法
        1.2.1 慢性束縛應(yīng)激
        1.2.2 外周血和骨髓單細(xì)胞懸液制備
            1.2.2. 1 采樣
            1.2.2. 2 單細(xì)胞懸液制備
            1.2.2.3細(xì)胞計(jì)數(shù)
            1.2.2. 4 二次重懸
        1.2.3 流式細(xì)胞術(shù)
        1.2.4 BrdU摻入實(shí)驗(yàn)
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 長(zhǎng)期慢性應(yīng)激使小鼠骨髓HSC的比例和絕對(duì)數(shù)增加
    2.2 長(zhǎng)期慢性應(yīng)激使小鼠骨髓髓系來(lái)源CD11b+Ly6C+細(xì)胞的絕對(duì)數(shù)增加
    2.3 長(zhǎng)期慢性應(yīng)激使小鼠外周血CD11b+Ly6C+細(xì)胞的絕對(duì)數(shù)呈現(xiàn)增加的趨勢(shì)
    2.4 短期應(yīng)激使小鼠骨髓HSC的絕對(duì)數(shù)減少
    2.5 短期應(yīng)激使小鼠骨髓HSC的增殖下降
    2.6 短期應(yīng)激使小鼠骨髓CD11b+Ly6C+細(xì)胞的絕對(duì)數(shù)增加
    2.7 短期應(yīng)激使小鼠外周血CD11b+Ly6C+細(xì)胞的絕對(duì)數(shù)增加
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