腸道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)和柯薩奇病毒A組16型(Coxsackievirus A16,CA16)是手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)最重要的病原體,均屬于小RNA病毒科腸道病毒屬的A型,二者能夠引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)(Central nervous system,CNS)損傷,對嬰幼兒的健康構(gòu)成巨大的威脅,但二者進(jìn)入CNS的機(jī)理仍不清楚。在之前的研究結(jié)果中,我們發(fā)現(xiàn)EV71和CA16感染后,miR-1303的表達(dá)受到抑制,從而靶向調(diào)控基質(zhì)金屬蛋白酶9(Matrix metalloproteinases 9,MMP9),使MMP9顯著上升,并證實(shí)MMP9可以降解細(xì)胞與細(xì)胞之間的連接分子從而改變血腦屏障(Blood brain barrier,BBB)的通透性,使更多的病毒、炎性因子和炎性細(xì)胞浸潤,最終導(dǎo)致CNS損傷。基于之前的研究,我們將進(jìn)一步探究MMP9是否對已經(jīng)在CNS中建立感染的病毒存在影響。本研究主要關(guān)注EV71感染后,MMP9在天然免疫反應(yīng)中的作用。我們選取神經(jīng)系統(tǒng)中的免疫細(xì)胞-小膠質(zhì)細(xì)胞(Human micr...

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【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 手足口病的研究現(xiàn)狀
    1.2 腸道病毒71型
        1.2.1 EV71的病毒學(xué)特征
        1.2.2 EV71的復(fù)制機(jī)制
        1.2.3 EV71的致病機(jī)理
        1.2.4 EV71誘發(fā)的天然免疫反應(yīng)
    1.3 基質(zhì)金屬蛋白酶9
        1.3.1 基質(zhì)金屬蛋白酶
        1.3.2 MMP9與免疫反應(yīng)
    1.4 選題的目的、意義及擬解決的問題
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 質(zhì)粒、菌株、細(xì)胞株及毒株
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 Vero細(xì)胞的復(fù)蘇、傳代及凍存
        2.2.2 16HBE、SHSY5Y、HM1900細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)及凍存
        2.2.3 病毒的擴(kuò)增及收獲
        2.2.4 病毒滴度測定
        2.2.5 DH5α感受態(tài)的制備
        2.2.6 轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞
        2.2.7 陽性質(zhì)粒的提取
        2.2.8 細(xì)胞樣品的制備
        2.2.9 蛋白樣品的制備
        2.2.10 Western Blot檢測
        2.2.11 免疫熒光
        2.2.12 免疫共沉淀
        2.2.13 Caspase-1活性檢測
        2.2.14 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 小膠質(zhì)細(xì)胞中干擾MMP9后對EV71復(fù)制的影響
    3.2 SHSY5Y與16HBE細(xì)胞中干擾MMP9后對EV71復(fù)制的影響
    3.3 MMP9對干擾素產(chǎn)生的影響
    3.4 MMP9對IFNAR1的影響
    3.5 MMP9對JAK/STAT通路的影響
    3.6 MMP9對炎性細(xì)胞因子產(chǎn)生的影響
    3.7 結(jié)論
第四章 討論與展望
參考文獻(xiàn)
非論文綜述 病毒感染與干擾素反應(yīng)的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
研究生簡歷
碩士期間參與發(fā)表的文章



本文編號：3949736