目的:研究原代培養(yǎng)大鼠前額葉皮質(zhì)和海馬神經(jīng)元缺氧缺糖/復(fù)氧復(fù)糖后電壓門控氯離子通道3(voltage-gated chloride channel 3,ClC-3)在mRNA和蛋白水平的表達(dá)。方法:取原代培養(yǎng)8 d的大鼠皮質(zhì)和海馬神經(jīng)元,隨機(jī)分為對(duì)照組和模型組。模型組缺氧缺糖30 min后再?gòu)?fù)氧復(fù)糖,于復(fù)氧復(fù)糖后6、24、48、72 h采用反轉(zhuǎn)錄酶-聚合酶鏈鎖反應(yīng)(RT-PCR)、Western blot技術(shù)檢測(cè)ClC-3 mRNA及蛋白水平的表達(dá)。結(jié)果:原代培養(yǎng)大鼠皮質(zhì)和海馬神經(jīng)元ClC-3 mRNA及蛋白水平呈低水平表達(dá)。缺氧缺糖/復(fù)氧復(fù)糖24 h后培養(yǎng)皮質(zhì)神經(jīng)元ClC-3mRNA及蛋白水平開始上調(diào),48 h仍然高表達(dá),72 h后下降(P<0.05)。海馬神經(jīng)元ClC-3 mRNA在缺氧缺糖/復(fù)氧復(fù)糖6 h后即開始升高,高峰持續(xù)從24～48 h(P<0.05),72 h下降至略高于正常水平(P<0.05)。海馬神經(jīng)元ClC-3蛋白在24 h后表達(dá)開始逐漸升高,至72 h仍高表達(dá)(P<0.05)。結(jié)論:C1C-3通道表達(dá)上調(diào)可能增強(qiáng)復(fù)氧復(fù)糖后細(xì)胞對(duì)氧化應(yīng)激、炎...

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【文章目錄】：
材料和方法
    1 材料
        1.1 動(dòng)物
        1.2 主要儀器
    2 方法
        2.1 皮質(zhì)及海馬原代神經(jīng)元培養(yǎng)
        2.2 缺糖缺氧復(fù)氧復(fù)糖模型制備與分組
        2.3 大鼠Cl C-3 mRNA表達(dá)水平的測(cè)定
        2.4 大鼠Cl C-3蛋白表達(dá)水平的測(cè)定
結(jié)果
    1 Cl C-3 mRNA在培養(yǎng)前額葉皮質(zhì)及海馬神經(jīng)元中的表達(dá)
    2 Cl C-3蛋白在培養(yǎng)額葉皮質(zhì)及海馬水平的表達(dá)
討論



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