發(fā)布時(shí)間：2024-03-09 01:54

　　白念珠菌作為條件致病菌寄生在健康人體的口腔和小腸粘膜中,當(dāng)機(jī)體免疫力低下時(shí),其可侵入機(jī)體引發(fā)系統(tǒng)性感染。系統(tǒng)性白念珠菌感染是最常見的院內(nèi)真菌感染,包括念珠菌血癥和深部組織感染。系統(tǒng)性白念珠菌感染患者死亡率較高,即使接受藥物治療,死亡率仍可高達(dá)40%。因此,在治療過程中,改善患者的機(jī)體免疫力被認(rèn)為是增強(qiáng)治療效果的理想手段。入侵機(jī)體后,白念珠菌表面的病原相關(guān)分子模式被免疫細(xì)胞中表達(dá)的模式識(shí)別受體識(shí)別后激起機(jī)體的免疫反應(yīng)。目前研究已發(fā)現(xiàn)多種識(shí)別白念珠菌的模式識(shí)別受體,如Toll樣受體,C型凝集素受體等。白念珠菌表面的β葡聚糖和甘露糖能夠分別結(jié)合C型凝集素受體Dectin-1和Dectin-2,激活磷脂酶Cγ(PLCγ),產(chǎn)生(1,4,5)-三磷酸肌醇(inositol 1,4,5-trisphosphate,InsP₃)。InsP₃結(jié)合InsP3R(InsP₃R)引發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中鈣離子的釋放,使胞內(nèi)鈣離子濃度升高。細(xì)胞內(nèi)鈣離子調(diào)控多種細(xì)胞免疫功能,如活性氧的產(chǎn)生,細(xì)胞因子分泌和吞噬等。本課題從酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)篩選到SEC5蛋白能夠結(jié)...

【文章頁數(shù)】：122 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞
前言
    參考文獻(xiàn)
第一部分 SEC5與InsP₃R相互作用
    1.1 前言
    1.2 材料與方法
        1.2.1 實(shí)驗(yàn)主要材料
        1.2.2 主要實(shí)驗(yàn)方法
    1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1.3.1 酵母雙雜交結(jié)果驗(yàn)證
        1.3.2 SEC5蛋白與InsP₃R細(xì)胞內(nèi)免疫熒光共定位
        1.3.3 SEC5蛋白與InsP₃R細(xì)胞內(nèi)FRET實(shí)驗(yàn)
        1.3.4 InsP₃R結(jié)構(gòu)中與SEC5相互作用區(qū)域的研究
        1.3.5 SEC5結(jié)構(gòu)中與InsP₃R相互作用區(qū)域的研究
    1.4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第二部分 SEC5-InsP₃R相互作用影響InsP₃R離子通道活性
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)主要材料
        2.2.2 主要實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 .HEK293細(xì)胞Crynkiewicz常數(shù)測定。
        2.3.2 SEC5表達(dá)水平對(duì)InsP₃R介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)鈣離子釋放的影響
        2.3.3 SEC5與InsP₃R相互作用影響InsP₃R介導(dǎo)的鈣離子釋放
        2.3.4 SEC5結(jié)合InsP₃R影響InsP₃R離子通道活性
    2.4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第三部分 SEC5蛋白與InsP₃R相互作用影響巨噬細(xì)胞對(duì)白念珠菌的吞噬
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)主要材料
        3.2.2 主要實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 BMDM細(xì)胞吞噬起始階段細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度升高
        3.3.2 InsP₃R介導(dǎo)的鈣離子釋放影響巨噬細(xì)胞對(duì)白念珠菌的吞噬作用
        3.3.3 SEC5蛋白影響巨噬細(xì)胞對(duì)白念珠菌的吞噬作用
        3.3.4 SEC5蛋白與InsP₃R在吞噬小體上共定位
        3.3.5 白念珠菌刺激促進(jìn)SEC5與InsP₃R蛋白結(jié)合
        3.3.6 干擾SEC5與InsP₃R的相互作用抑制BMDM細(xì)胞對(duì)白念珠菌的吞噬
        3.3.7 體內(nèi)干擾SEC5與InsP₃R的相互作用影響白念珠菌清除
    3.4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第四部分 SEC5與InsP₃R相互作用調(diào)控TBK1-IRF3通路介導(dǎo)抗白念珠菌天然免疫反應(yīng)
    4.1 前言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)主要材料
        4.2.2 主要實(shí)驗(yàn)方法
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.1 SEC5穩(wěn)定低表達(dá)的RAW264.7細(xì)胞株建立
        4.3.2 SEC5蛋白調(diào)控白念珠菌引起的TBK1-IRF3信號(hào)通路的激活
        4.3.3 白念珠菌刺激促進(jìn)InsP₃R-SEC5-TBK1復(fù)合體形成
        4.3.4 H1多肽促進(jìn)SEC5蛋白與TBK1結(jié)合,促進(jìn)TBK1酶活
        4.3.5 SEC5-RBD與InsP₃R-H1競爭結(jié)合SEC5-2段
    4.4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
總結(jié)
綜述
    參考文獻(xiàn)
在校期間論文情況
致謝



本文編號(hào)：3922719