泛素特異性蛋白酶 39(Ubiquitin Specific Peptidase 39,USP39)是去泛素化酶家族的一員。但由于其起催化作用的3個核心氨基酸殘基(半胱氨酸、組氨酸、天冬氨酸/天冬酰胺)分別被天冬氨酸、絲氨酸、谷氨酸所取代,導(dǎo)致USP39喪失了泛素水解酶活性。研究發(fā)現(xiàn),USP39的功能主要體現(xiàn)在pre-mRNA的剪接上,且與乳腺癌,肝癌,前列腺癌等腫瘤細胞的增殖、凋亡、遷移、侵襲等生物學(xué)功能密切相關(guān),然而分子機制層面上的研究普遍不深,且有關(guān)USP39在炎癥中與炎癥相關(guān)信號通路及炎癥因子的研究未見報道。我們首先用NF-κB信號通路的激活劑(TNF-α、LPS)和抑制劑(BAY11-7082)刺激細胞,激活或抑制NF-κB信號通路,結(jié)果顯示,該通路對USP39的空間定位無影響,且該通路對USP39的mRNA水平與蛋白水平的作用相反,猜測可能存在USP39對NF-κB信號通路的負反饋來維持二者表達水平的穩(wěn)定狀態(tài),或是NF-κB信號通路激活的情況下USP39蛋白降解加速,亦或是存在其他信號通路與NF-κB通路協(xié)同調(diào)控USP39的表達水平。為了研究是否存在NF-κB信號通路與US...

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【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 炎癥相關(guān)信號通路
        1.1.1 NF-κB信號通路
        1.1.2 STAT信號通路
        1.1.3 NF-κB信號通路和STAT3信號通路在功能上的相關(guān)性
    1.2 泛素特異性蛋白酶USP39
        1.2.1 泛素特異性蛋白酶(USPs)家族的結(jié)構(gòu)特征
        1.2.2 泛素特異性蛋白酶39(USP39)的結(jié)構(gòu)特征
        1.2.3 泛素特異性蛋白酶39(USP39)的研究進展
    1.3 本課題的研究目的、內(nèi)容與意義
第二章 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞系、質(zhì)粒
        2.1.2 工具酶和抗體
        2.1.3 主要化學(xué)試劑和耗材
        2.1.4 細胞培養(yǎng)試劑
        2.1.5 儀器設(shè)備
        2.1.6 溶液配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 分子克隆實驗
        2.2.2 細胞實驗
        2.2.3 蛋白實驗
        2.2.4 RNA水平實驗
        2.2.5 免疫熒光實驗
        2.2.6 數(shù)據(jù)處理
第三章 實驗結(jié)果
    3.1 NF-κB信號通路與USP39的相互作用
        3.1.1 NF-κB信號通路對USP39的表達調(diào)控
        3.1.2 NF-κB信號通路對USP39的定位無影響
        3.1.3 USP39對NF-κB信號通路的活性調(diào)控
    3.2 USP39的敲低和回補對STAT3表達水平的調(diào)控
    3.3 USP39的不同結(jié)構(gòu)域?qū)TAT3轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控
    3.4 STAT3在腸癌細胞中發(fā)揮促炎作用
    3.5 USP39在腸癌細胞中發(fā)揮抑炎作用
        3.5.1 USP39在HCT116細胞株中發(fā)揮抑炎作用
        3.5.2 USP39在HT29細胞株中發(fā)揮抑炎作用
第四章 討論
結(jié)論
參考文獻
致謝



本文編號：3909512