泛素特異性蛋白酶 39(Ubiquitin Specific Peptidase 39,USP39)是去泛素化酶家族的一員。但由于其起催化作用的3個(gè)核心氨基酸殘基(半胱氨酸、組氨酸、天冬氨酸/天冬酰胺)分別被天冬氨酸、絲氨酸、谷氨酸所取代,導(dǎo)致USP39喪失了泛素水解酶活性。研究發(fā)現(xiàn),USP39的功能主要體現(xiàn)在pre-mRNA的剪接上,且與乳腺癌,肝癌,前列腺癌等腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡、遷移、侵襲等生物學(xué)功能密切相關(guān),然而分子機(jī)制層面上的研究普遍不深,且有關(guān)USP39在炎癥中與炎癥相關(guān)信號(hào)通路及炎癥因子的研究未見報(bào)道。我們首先用NF-κB信號(hào)通路的激活劑(TNF-α、LPS)和抑制劑(BAY11-7082)刺激細(xì)胞,激活或抑制NF-κB信號(hào)通路,結(jié)果顯示,該通路對(duì)USP39的空間定位無(wú)影響,且該通路對(duì)USP39的mRNA水平與蛋白水平的作用相反,猜測(cè)可能存在USP39對(duì)NF-κB信號(hào)通路的負(fù)反饋來(lái)維持二者表達(dá)水平的穩(wěn)定狀態(tài),或是NF-κB信號(hào)通路激活的情況下USP39蛋白降解加速,亦或是存在其他信號(hào)通路與NF-κB通路協(xié)同調(diào)控USP39的表達(dá)水平。為了研究是否存在NF-κB信號(hào)通路與US...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 炎癥相關(guān)信號(hào)通路
        1.1.1 NF-κB信號(hào)通路
        1.1.2 STAT信號(hào)通路
        1.1.3 NF-κB信號(hào)通路和STAT3信號(hào)通路在功能上的相關(guān)性
    1.2 泛素特異性蛋白酶USP39
        1.2.1 泛素特異性蛋白酶(USPs)家族的結(jié)構(gòu)特征
        1.2.2 泛素特異性蛋白酶39(USP39)的結(jié)構(gòu)特征
        1.2.3 泛素特異性蛋白酶39(USP39)的研究進(jìn)展
    1.3 本課題的研究目的、內(nèi)容與意義
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 細(xì)胞系、質(zhì)粒
        2.1.2 工具酶和抗體
        2.1.3 主要化學(xué)試劑和耗材
        2.1.4 細(xì)胞培養(yǎng)試劑
        2.1.5 儀器設(shè)備
        2.1.6 溶液配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 分子克隆實(shí)驗(yàn)
        2.2.2 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
        2.2.3 蛋白實(shí)驗(yàn)
        2.2.4 RNA水平實(shí)驗(yàn)
        2.2.5 免疫熒光實(shí)驗(yàn)
        2.2.6 數(shù)據(jù)處理
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 NF-κB信號(hào)通路與USP39的相互作用
        3.1.1 NF-κB信號(hào)通路對(duì)USP39的表達(dá)調(diào)控
        3.1.2 NF-κB信號(hào)通路對(duì)USP39的定位無(wú)影響
        3.1.3 USP39對(duì)NF-κB信號(hào)通路的活性調(diào)控
    3.2 USP39的敲低和回補(bǔ)對(duì)STAT3表達(dá)水平的調(diào)控
    3.3 USP39的不同結(jié)構(gòu)域?qū)TAT3轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控
    3.4 STAT3在腸癌細(xì)胞中發(fā)揮促炎作用
    3.5 USP39在腸癌細(xì)胞中發(fā)揮抑炎作用
        3.5.1 USP39在HCT116細(xì)胞株中發(fā)揮抑炎作用
        3.5.2 USP39在HT29細(xì)胞株中發(fā)揮抑炎作用
第四章 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3909512