發(fā)布時間：2023-08-26 03:25

　　內(nèi)皮細(xì)胞是襯于心血管內(nèi)壁的單層扁平上皮細(xì)胞。高脂膳食引起的過度氧化應(yīng)激會損害內(nèi)皮功能,并且被認(rèn)為是內(nèi)皮功能障礙重要的致病因素。AMPK作為調(diào)節(jié)機體能量代謝穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵激酶,是保護內(nèi)皮功能的重要靶點,可通過調(diào)控Nrf2/HO-1、SIRT1/PGC-1α等通路改善氧化應(yīng)激、調(diào)節(jié)線粒體功能。大量研究表明通過膳食,特別是花青素,進(jìn)行早期預(yù)防或干預(yù)氧化應(yīng)激對于內(nèi)皮功能的保護有重要意義�；ㄇ嗨卦隗w內(nèi)的生物利用度很低,在體內(nèi)循環(huán)的時間及濃度都遠(yuǎn)不及其代謝產(chǎn)物,因此許多研究者認(rèn)為花青素所具有的生物功能是其在體內(nèi)的代謝產(chǎn)物來發(fā)揮的。香草酸是花青素在體內(nèi)的主要代謝產(chǎn)物之一,同時也是一種廣泛存在于植物中的酚酸。已有的研究表明,香草酸可以減少血管緊張素Ⅱ刺激導(dǎo)致的HUVECs超氧陰離子增加,增加內(nèi)皮細(xì)胞中HO-1的表達(dá),但沒有改變NOX蛋白的表達(dá)。因此,香草酸可以通過減少超氧化物的產(chǎn)生來保護內(nèi)皮細(xì)胞,但其對內(nèi)皮細(xì)胞氧化應(yīng)激的保護作用以及其深層分子機制尚不清楚。本研究以棕櫚酸(PA)和香草酸作用內(nèi)皮細(xì)胞,探究香草酸對高脂誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷的影響及其作用的分子機制。主要研究結(jié)果如下:1.在本實驗研究條件下,香...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
主要符號對照表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 氧化應(yīng)激研究進(jìn)展
        1.1.1 活性氧的產(chǎn)生
        1.1.2 抗氧化系統(tǒng)
    1.2 血管內(nèi)皮細(xì)胞氧化應(yīng)激研究進(jìn)展
        1.2.1 血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能
        1.2.2 血管內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷與疾病
        1.2.3 改善血管內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷的途徑
    1.3 花青素研究進(jìn)展
        1.3.1 花青素簡介
        1.3.2 花青素的心血管保護作用
        1.3.3 花青素的消化吸收代謝
    1.4 香草酸研究進(jìn)展
        1.4.1 香草酸簡介
        1.4.2 香草酸的生物功能
    1.5 本研究的目的與內(nèi)容
        1.5.1 研究目的與意義
        1.5.2 研究內(nèi)容
        1.5.3 技術(shù)路線
第二章 香草酸改善高脂誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞氧化應(yīng)激
    2.1 材料與儀器
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 儀器設(shè)備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 藥物配制
        2.2.2 HUVECs細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.3 CCK8 法測定細(xì)胞活力
        2.2.4 細(xì)胞內(nèi)ROS的測定
        2.2.5 細(xì)胞內(nèi)SOD酶活性測定
        2.2.6 細(xì)胞內(nèi)CAT酶活性測定
        2.2.7 細(xì)胞內(nèi)MDA含量測定
        2.2.8 線粒體膜電位檢測
        2.2.9 數(shù)據(jù)處理與分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 香草酸對細(xì)胞活性的影響
        2.3.2 香草酸對細(xì)胞中ROS和 MDA產(chǎn)生的影響
        2.3.3 香草酸對細(xì)胞線粒體膜電位的影響
        2.3.4 香草酸對抗氧化酶SOD和 CAT活性的影響
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第三章 香草酸通過AMPK/Nrf2/HO-1改善內(nèi)皮細(xì)胞氧化應(yīng)激
    3.1 材料與儀器
        3.1.1 實驗材料
        3.1.2 儀器設(shè)備
    3.2 實驗方法
        3.2.1 蛋白免疫印跡(Western Blotting)
        3.2.2 檢測香草酸對AMPK/Nrf2/HO-1活性的影響
        3.2.3 檢測香草酸對LKB1 活性的影響
        3.2.4 檢測AMPK抑制劑Compound C對 Nrf2/HO-1的影響
        3.2.5 統(tǒng)計學(xué)分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 香草酸對p-LKB1、p-AMPK蛋白表達(dá)的影響
        3.3.2 香草酸對Nrf2/HO-1 蛋白表達(dá)的影響
        3.3.3 AMPK抑制劑對Nrf2/HO-1的影響
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
第四章 香草酸通過AMPK/SIRT1/PGC-1α改善內(nèi)皮細(xì)胞氧化應(yīng)激
    4.1 材料與儀器
        4.1.1 實驗材料
        4.1.2 儀器設(shè)備
    4.2 實驗方法
        4.2.1 檢測香草酸對SIRT1和PGC-1α蛋白表達(dá)的影響
        4.2.2 檢測AMPK抑制劑對AMPK、SIRT1和PGC-1α蛋白表達(dá)的影響
        4.2.3 檢測SIRT1 抑制劑對PGC-1 蛋白表達(dá)的影響
        4.2.4 統(tǒng)計學(xué)分析
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 香草酸對SIRT1和PGC-1α蛋白表達(dá)的影響
        4.3.2 AMPK抑制劑對SIRT1和PGC-1α蛋白表達(dá)水平的影響
        4.3.3 SIRT1抑制劑對PGC-1α蛋白表達(dá)水平的影響
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
第五章 討論與結(jié)論
    5.1 討論
    5.2 結(jié)論
    5.3 創(chuàng)新點
    5.4 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介



本文編號：3843857