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絲氨酰tRNA合成酶(SerRS)結(jié)合并激活去乙酰化酶SIRT2的機制

發(fā)布時間:2023-06-05 02:35
  目的探究絲氨酰tRNA合成酶(seryl-tRNA synthetase,SerRS)結(jié)合并激活去乙;窼IRT2的機制。方法構(gòu)建SerRS與SIRT2質(zhì)粒,在293T細(xì)胞中進(jìn)行轉(zhuǎn)染。免疫共沉淀方法檢測SerRS與SIRT2、SIRT2突變型之間的相互作用。通過原核純化蛋白質(zhì),體外熒光方法檢測SerRS對SIRT2酶活影響。通過結(jié)構(gòu)模擬探究SIRT2的H187位點調(diào)控機制。通過Western blot方法檢測SerRS的乙;揎。結(jié)果 SerRS能與SIRT2相互作用,并增強其去乙;富钚。SIRT2 H187Y突變使SIRT2失活,同時也阻斷了SIRT2與其SerRS的結(jié)合。進(jìn)一步通過結(jié)構(gòu)模擬發(fā)現(xiàn),SIRT2上的H187Y突變與Q267位點在空間上發(fā)生沖突,可能改變SIRT2的構(gòu)象,進(jìn)而影響與SerRS的結(jié)合界面,且SIRT2能夠去乙;疭erRS。結(jié)論 SIRT2第187位組氨酸能夠調(diào)控SerRS與SIRT2的結(jié)合,為靶向SIRT2的藥物研發(fā)提供了新的思路。

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結(jié)果
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