發(fā)布時間：2023-06-06 19:44

　　艾滋病是一種致死率極高的重大傳染類疾病,病因是感染了人類免疫缺陷病毒(HIV),因其感染蔓延范圍廣、病毒傳播速度快等特點,對人類健康有著極為嚴(yán)重的影響。當(dāng)前對艾滋病的治療方式主要是從盡可能降低HIV病毒載量和對患者自身的免疫功能進(jìn)行重建及維持這兩個方面進(jìn)行研究。目前可以實現(xiàn)最大限度降低患者體內(nèi)病毒載量的療法就是雞尾酒療法,但該療法極易產(chǎn)生耐藥、有較大副作用、仍有較高的病死率等諸多缺點。因而,一直以來疫苗都是研究人員防治艾滋病的重點研究方向。研究人員從艾滋病感染者中的精英控制者體內(nèi)分離出數(shù)百種具有交叉保護(hù)活性的廣譜中和抗體。廣譜中和抗體可以中和多種型別的艾滋病病毒,清除游離的病毒或是已被感染病毒的細(xì)胞。因而廣譜中和抗體能有效抑制病毒,并控制艾滋病的發(fā)展。因此,對廣譜中和抗體進(jìn)行深入研究是今后開發(fā)艾滋病疫苗的重要方向之一。通過主動免疫療法或被動免疫療法來促使機(jī)體中的廣譜中和抗體處于較高水平,是目前設(shè)計開發(fā)艾滋病疫苗的重要策略。第一部分:艾滋病分支肽疫苗的臨床前免疫原性評價課題組前期研究篩選并確定了基于HIV-1 MPER的線性表位4E10,搭載四分支肽載體設(shè)計免疫原,輔以油佐劑,4E10-...

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
第一部分 艾滋病分支肽疫苗的臨床前免疫原性評價
    第一章 緒論
        1.1.1 艾滋病概述
            1.1.1.1 艾滋病簡介
            1.1.1.2 艾滋病起源
        1.1.2 HIV概述
            1.1.2.1 HIV簡介
            1.1.2.2 HIV的分類
            1.1.2.3 HIV-1 的形態(tài)結(jié)構(gòu)
            1.1.2.4 HIV-1 的感染機(jī)制
        1.1.3 艾滋病疫苗
            1.1.3.1 艾滋病的流行狀況
            1.1.3.2 艾滋病的治療方式
            1.1.3.3 艾滋病疫苗發(fā)展的必要性
            1.1.3.4 艾滋病疫苗的發(fā)展現(xiàn)狀
        1.1.4 廣譜中和抗體的選擇
        1.1.5 疫苗載體的選擇
        1.1.6 艾滋病疫苗臨床現(xiàn)狀
            1.1.6.1 國內(nèi)外疫苗臨床試驗現(xiàn)狀
            1.1.6.2 課題組研究進(jìn)展
        1.1.7 臨床前試驗所采用的實驗動物
        1.1.8 立題依據(jù)及實驗方案
            1.1.8.1 立題依據(jù)
            1.1.8.2 實驗方案
    第二章 實驗儀器、材料與實驗方法
        1.2.1 實驗儀器、材料
            1.2.1.1 實驗儀器
            1.2.1.2 實驗試劑
            1.2.1.3 抗體
            1.2.1.4 細(xì)胞
            1.2.1.5 實驗相關(guān)用品
            1.2.1.6 試驗品
            1.2.1.7 實驗動物
        1.2.2 實驗試劑配制
            1.2.2.1 細(xì)胞實驗試劑
            1.2.2.2 ELISA試劑
            1.2.2.3 SDS-PAGE試劑
            1.2.2.4 Western Blot試劑
            1.2.2.5 Dot Blot試劑
        1.2.3 實驗方法
            1.2.3.1 分支肽疫苗免疫原
            1.2.3.2 動物實驗策略
            1.2.3.3 ELISA
            1.2.3.4 包裝及收取HIV-1 假病毒
            1.2.3.5 SDS-PAGE
            1.2.3.6 Western blot
            1.2.3.7 TCID50法
            1.2.3.8HIV-1 假病毒中和實驗
            1.2.3.9 Dot blot
            1.2.3.10 統(tǒng)計學(xué)分析
    第三章 實驗結(jié)果
        1.3.1 疫苗對食蟹猴的免疫評價
            1.3.1.1 食蟹猴個體轉(zhuǎn)陽率
            1.3.1.2 食蟹猴結(jié)合抗體效價
            1.3.1.3 食蟹猴抗體中和活性
        1.3.2 疫苗對BALB/c小鼠的免疫評價
            1.3.2.1 BALB/c小鼠個體轉(zhuǎn)陽率
            1.3.2.2 BALB/c小鼠結(jié)合抗體效價
            1.3.2.3 BALB/c小鼠抗體中和活性
            1.3.2.4 結(jié)合抗體在BALB/c小鼠組織的分布
    第四章 討論
第二部分 rAAV8 介導(dǎo)HIV-1 廣譜中和抗體的構(gòu)建與包裝
    第一章 緒論
        2.1.1 廣譜中和抗體
            2.1.1.1 中和抗體10E8
            2.1.1.2 中和抗體NIH45-46
            2.1.1.3 中和抗體PG9
        2.1.2 被動免疫療法
        2.1.3 腺相關(guān)病毒載體
        2.1.4 立題依據(jù)及實驗方案
            2.1.4.1 立題依據(jù)
            2.1.4.2 實驗方案
    第二章 實驗器材與實驗方法
        2.2.1 實驗器材
            2.2.1.1 實驗儀器
            2.2.1.2 實驗試劑
            2.2.1.3 細(xì)胞
            2.2.1.4 質(zhì)粒及菌種
            2.2.1.5 酶
            2.2.1.6 試劑盒
            2.2.1.7 實驗相關(guān)用品
            2.2.1.8 引物合成
        2.2.2 實驗試劑配制
            2.2.2.1 大腸桿菌培養(yǎng)試劑
            2.2.2.2 質(zhì)粒構(gòu)建試劑
        2.2.3 實驗方法
            2.2.3.1 構(gòu)建質(zhì)粒
            2.2.3.2 酶切載體質(zhì)粒
            2.2.3.3 PCR
            2.2.3.4 載體片段和目的基因片段連接
            2.2.3.5 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化
            2.2.3.6 單克隆培養(yǎng)、質(zhì)粒小提
            2.2.3.7 rAAV的包裝
            2.2.3.8 rAAV的收取與純化
            2.2.3.9 SDS-PAGE電泳
    第三章 實驗結(jié)果
        2.3.1 質(zhì)粒構(gòu)建
            2.3.1.1 酶切載體質(zhì)粒
            2.3.1.2 PCR產(chǎn)物
            2.3.1.3 載體片段和目的基因片段連接
        2.3.2 重組腺相關(guān)病毒包裝驗證
            2.3.2.1 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
            2.3.2.2 SDS-PAGE檢測衣殼蛋白及純度
    第四章 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介
致謝



本文編號：3832098