發(fā)布時間：2023-06-04 19:53

　　髓鞘(Myelin sheath)是包裹在神經(jīng)軸突外的一層電絕緣膜,它在神經(jīng)系統(tǒng)的電沖動傳導(dǎo)中發(fā)揮了十分重要的作用,并為神經(jīng)元提供營養(yǎng)及代謝支持。少突膠質(zhì)細胞(Oligodendrocytes,OLs)由少突膠質(zhì)細胞前體細胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)分化而來,是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的髓鞘形成細胞。由髓鞘的損傷、脫失所引起疾病被統(tǒng)稱為脫髓鞘疾病。常見的脫髓鞘疾病有視神經(jīng)脊髓炎(neuromyelitis optica,NMO)、急性播散性腦脊髓炎(acute disseminated encephalomyelitis,ADEM)以及多發(fā)性硬化癥(Multiple sclerosis,MS)等。脫髓鞘疾病現(xiàn)有藥物均靶向免疫系統(tǒng),只能在一定程度上延緩疾病的進程,不能治愈已有的損傷。在髓鞘損傷部位,髓鞘的再生修復(fù)常常不能正常進行。髓鞘再生受阻主要是由于脫髓鞘區(qū)域,數(shù)目豐富的少突膠質(zhì)細胞前體細胞不能分化成成熟的OL。因此,近年來越來越多的研究致力于尋找能夠促進OPC分化與髓鞘再生的小分子化合物,或者是能夠干預(yù)上述過程的信號通路與藥物靶點。基于上述目的,...

【文章頁數(shù)】：115 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 引言
    1.1 髓鞘概述
    1.2 少突膠質(zhì)細胞的發(fā)育
    1.3 脫髓鞘疾病及其現(xiàn)有治療方式
        1.3.1 視神經(jīng)脊髓炎
        1.3.2 急性播散性腦脊髓炎
        1.3.3 多發(fā)性硬化癥
    1.4 脫髓鞘疾病與髓鞘再生研究進展
        1.4.1 髓鞘再生研究動物模型
        1.4.2 調(diào)控少突膠質(zhì)細胞發(fā)育的信號通路在髓鞘再生中的研究
        1.4.3 基于化合物篩選的促髓鞘再生藥物及調(diào)控靶點的發(fā)現(xiàn)
    1.5 本論文的研究目標(biāo)
第2章 實驗材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞
        2.1.2 實驗動物
        2.1.3 試劑與試劑盒
        2.1.4 儀器與耗材
        2.1.5 細胞培養(yǎng)液
        2.1.6 常規(guī)試劑配制
        2.1.7 化合物及酶液配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 原代NPC的分離與培養(yǎng)
        2.2.2 OPC體外分化體系的建立
        2.2.3 DRG神經(jīng)元的分離與培養(yǎng)
        2.2.4 NG2+原代OPC分離與分化
        2.2.5 OPC-DRG 神經(jīng)元體外共培養(yǎng)體系
        2.2.6 EAE模型
        2.2.7 Cuprizone誘導(dǎo)的小鼠脫髓鞘模型
        2.2.8 小鼠大腦與脊髓石蠟切片制備
        2.2.9 小鼠大腦與脊髓冰凍切片制備
        2.2.10 冰凍切片免疫熒光染色
        2.2.11 石蠟切片快藍染色
        2.2.12 蛋白免疫印記
        2.2.13 qPCR檢測基因表達變化
        2.2.14 脊髓與腦組織電鏡樣品制備(固定、脫水與包埋)
        2.2.15 細胞免疫熒光染色
        2.2.16 脾臟、外周血免疫細胞分離
        2.2.17 免疫細胞染色
        2.2.18 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
第3章 實驗結(jié)果
    3.1 少突膠質(zhì)細胞分化體系的建立
    3.2 基于少突膠質(zhì)細胞分化體系的化合物篩選
    3.3 PD0325901促進少突膠質(zhì)細胞分化
    3.4 PD0325901 通過抑制 MAPK/ERK 信號通路促進少突膠質(zhì)細胞分化
    3.5 PD0325901促進原代OPC分化
    3.6 PD0325901 促進 OPC-DRGN 共培養(yǎng)體系中髓鞘的形成
    3.7 PD0325901可能通過增強髓鞘再生緩解EAE
    3.8 PD0325901 促進 Cuprizone 模型小鼠髓鞘再生
    3.9 MAPK/ERK 在髓鞘再生中的作用總結(jié)
第4章 總結(jié)與討論
    4.1 MAPK/ERK 與髓鞘再生修復(fù)
    4.2 免疫系統(tǒng)在髓鞘再生中的作用
    4.3 細胞移植在髓鞘再生中的研究
    4.4 新的研究方法在髓鞘再生研究中的應(yīng)用
參考文獻
附錄 縮略語表
致謝
作者簡歷及攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果



本文編號：3830906