目的制備抗人抗苗勒管激素(anti-mullerian hormone,AMH)N端特定表位肽的特異單克隆抗體并對(duì)其特性進(jìn)行鑒定。方法利用生物信息分析軟件預(yù)測(cè)AMH特定多肽片段,合成AMH成熟N端區(qū)域的4個(gè)抗原性好的表位肽段作為篩選靶抗原。用重組AMH蛋白抗原免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾細(xì)胞與SP/20細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合,通過(guò)雜交瘤技術(shù)制備抗AMH單克隆抗體,用N端4個(gè)表位肽(表位1:439～451 RGRDPRGPGRAQR,表位2:273-285 PPRPSAELEESPP,表位3:42～54 DLDWPPGSPQEPL,表位4:494～506 WPQSDRNPRYGNH)分別作抗原,間接ELISA和Western blot對(duì)篩選獲得的特異抗表位單抗的抗原結(jié)合特性進(jìn)行鑒定。結(jié)果篩選到兩株能夠穩(wěn)定分泌抗人AMH表位1(anti-AMH-1)和表位2(antiAMH-2)的單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株,其分泌的單抗分別命名為anti-AMH-1和anti-AMH-2。該2株單抗細(xì)胞表達(dá)純化后,檢測(cè)其抗體效價(jià)分別為1∶12 000和1∶1 600。Western blot確認(rèn)兩種單抗除效價(jià)有差...

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)


本文編號(hào)：3830677