背景:成體干細(xì)胞是存在于已分化組織中的多能干細(xì)胞,尿源性干細(xì)胞為新發(fā)現(xiàn)的成體干細(xì)胞,具有取材方便、高度增殖能力、多向分化潛能等優(yōu)點(diǎn),在組織工程學(xué)領(lǐng)域受到重視。目的:研究人尿源性干細(xì)胞體外分離獲取的方法,以及體外向尿路上皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞分化的可行性。方法:收集健康成人尿液標(biāo)本,通過分離、培養(yǎng)獲取尿源性干細(xì)胞;應(yīng)用CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞增殖能力,并繪制細(xì)胞生長曲線;應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表型;體外應(yīng)用專用培養(yǎng)基誘導(dǎo)尿源性干細(xì)胞向尿路上皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞分化;應(yīng)用熒光定量PCR、免疫組織化學(xué)染色、免疫熒光細(xì)胞染色和Western blot鑒定尿源性干細(xì)胞的分化能力。結(jié)果與結(jié)論:①從健康成人尿液中成功分離提取出尿源性干細(xì)胞,細(xì)胞具有高度增殖能力,生長曲線呈現(xiàn)S型;②尿源性干細(xì)胞高表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)記物,CD29表達(dá)率為98.11%,CD90表達(dá)率為95.74%;③尿源性干細(xì)胞經(jīng)體外誘導(dǎo)分化14 d后,可以表達(dá)尿路上皮細(xì)胞特異性基因Cytokeratin 7、Cytokeratin 20、UroplakinⅢ和平滑肌細(xì)胞特異性基因α-SMA和SM22;④結(jié)果表明,尿源性干細(xì)胞經(jīng)過體外誘導(dǎo)可...

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文題釋義：
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 設(shè)計(jì)
    1.2 時間及地點(diǎn)
    1.3 材料
        1.3.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.3.2 尿源性干細(xì)胞專用培養(yǎng)基配制
        1.3.3 尿路上皮誘導(dǎo)分化專用培養(yǎng)基配制
        1.3.4平滑肌細(xì)胞誘導(dǎo)分化專用培養(yǎng)基配制
    1.4 實(shí)驗(yàn)方法
        1.4.1 尿源性干細(xì)胞體外分離實(shí)驗(yàn)
        1.4.2 CCK-8法檢測細(xì)胞增殖情況
        1.4.3 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表型
        1.4.4 尿源性干細(xì)胞向尿路上皮細(xì)胞誘導(dǎo)分化
        1.4.5 尿源性干細(xì)胞向平滑肌細(xì)胞誘導(dǎo)分化
        1.4.6 熒光定量PCR檢測特異性基因表達(dá)
        1.4.7 免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測尿路上皮細(xì)胞特異性蛋白的表達(dá)
        1.4.8 免疫細(xì)胞熒光染色檢測平滑肌細(xì)胞特異性蛋白的表達(dá)
    1.5 主要觀察指標(biāo)
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果Results
    2.1 尿源性干細(xì)胞的生長形態(tài)
    2.2尿源性干細(xì)胞表型
    2.3尿源性干細(xì)胞的生長曲線
    2.4 尿源性干細(xì)胞向尿路上皮細(xì)胞誘導(dǎo)分化結(jié)果
    2.5 尿源性干細(xì)胞向平滑肌細(xì)胞誘導(dǎo)分化結(jié)果
3 討論Discussion



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