背景:如何使工程化骨組織移植后能夠成活并發(fā)揮功能,前提條件是必須含有充足有效的血液供應,而這也正是工程化組織應用于臨床的主要障礙之一。目的:探索新的體外構建血管網(wǎng)絡的方法以解決工程化骨組織預血管化的問題。方法:人骨髓間充質干細胞以9×10⁴/cm²高密度接種,經(jīng)成骨誘導連續(xù)培養(yǎng)14 d形成細胞膜片,鏡下觀察細胞形貌,并進行堿性磷酸酶染色和茜素紅染色。然后將培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞以5×10⁴/cm²密度接種到上述細胞膜片上,繼續(xù)培養(yǎng)至7 d。通過鏡下觀察、CD31免疫熒光染色、Ⅰ型膠原免疫熒光染色評估血管網(wǎng)形成情況及膜片特性。結果與結論:①經(jīng)連續(xù)培養(yǎng)可獲得完整的成骨誘導細胞膜片,茜素紅染色和堿性磷酸酶染色呈陽性;②倒置相差顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)人臍靜脈內(nèi)皮細胞接種在成骨誘導細胞膜片上逐漸重排,CD31染色顯示進行性管腔形成;③接種人臍靜脈內(nèi)皮細胞后構建的預血管化成骨誘導細胞膜片Ⅰ型膠原染色陽性;④結果表明,經(jīng)成骨誘導后可形成具有成骨特性的細胞膜片,將人臍靜脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)在該膜片上可體外形成預血管化成骨細胞膜片...

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文題釋義：
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 設計
    1.2 時間及地點
    1.3 材料
        1.3.1 實驗細胞
        1.3.2實驗試劑與儀器
    1.4 實驗方法
        1.4.1 細胞培養(yǎng)
        1.4.2 成骨誘導細胞膜片的構建
        1.4.3 預血管化成骨誘導細胞膜片的構建
        1.4.4 免疫熒光染色
    1.5 主要觀察指標
    1.6 統(tǒng)計學分析
2 結果Results
    2.1 人骨髓間充質干細胞膜片表征
    2.2 內(nèi)皮血管網(wǎng)的形成
    2.3 進行性管腔的形成
    2.4 CD31免疫熒光染色結果
    2.5 預血管化成骨誘導細胞膜片Ⅰ型膠原改建
3 討論Discussion



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