目的:髓源抑制性細(xì)胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC)對多種免疫細(xì)胞如T細(xì)胞、NK細(xì)胞等的作用已有明確報道,但關(guān)于MDSC對B細(xì)胞的影響及機(jī)制尚未闡明。因此,探討荷乳腺癌小鼠MDSC對B細(xì)胞功能的影響可有助于更全面地認(rèn)識MDSC對免疫應(yīng)答多細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)的負(fù)向調(diào)控功能,并使研究者對B細(xì)胞的免疫抑制有了更深刻的理解,為探索腫瘤、自身免疫耐受和自身免疫性疾病等的發(fā)生發(fā)展機(jī)制及免疫治療的應(yīng)用提供了新的研究途徑。方法:構(gòu)建BALB/c小鼠4T1乳腺癌模型,磁珠分選出腫瘤小鼠脾臟的MDSC與正常小鼠脾臟的B細(xì)胞,將MDSC與B細(xì)胞共孵育;流式細(xì)胞術(shù)檢測MDSC對B細(xì)胞表面分子PD-1、PD-L1、CTLA-4、CCR6、CD62L和MHCⅡ的表達(dá)影響;ELISA法檢測B細(xì)胞分泌的IgA、IgM和IgG的變化;BrdU試劑盒檢測B細(xì)胞增殖情況;AnnexinⅤ/PI凋亡試劑盒檢測B細(xì)胞凋亡。磁珠分選出共孵育體系中的B細(xì)胞,將其與T細(xì)胞共孵育,BrdU試劑盒檢測T細(xì)胞增殖情況,AnnexinⅤ/PI凋亡試劑盒檢測T細(xì)胞凋亡,流式細(xì)胞術(shù)檢測T細(xì)胞分泌IFN-γ的情況...

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
1 對象和方法
    1.1 研究材料
        1.1.1 研究試劑
        1.1.2 研究儀器
    1.2 實驗方法
        1.2.1 試劑配制
        1.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.3 構(gòu)建4T1乳腺癌荷瘤小鼠模型
        1.2.4 磁珠分選小鼠脾臟細(xì)胞
        1.2.5 流式分選小鼠脾臟B細(xì)胞不同子集
        1.2.6 體外共培養(yǎng)
        1.2.7 流式細(xì)胞術(shù)檢測MDSC對 B細(xì)胞表面分子表達(dá)的影響
        1.2.8 ELISA法檢測MDSC對 B細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子的影響
        1.2.9 BrdU摻入法檢測B細(xì)胞、T細(xì)胞增殖
        1.2.10 流式細(xì)胞術(shù)檢測B細(xì)胞、T細(xì)胞凋亡
        1.2.11 免疫組化評估荷瘤小鼠脾臟中MDSC和 B細(xì)胞的分布
        1.2.12 流式細(xì)胞術(shù)檢測T細(xì)胞分泌的IFN-γ
        1.2.13 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 成功構(gòu)建BALB/c小鼠4T1 乳腺癌模型
    2.2 MDSC對B細(xì)胞表型的調(diào)控
    2.3 MDSC對B細(xì)胞分泌抗體的調(diào)控
    2.4 MDSC促進(jìn)B細(xì)胞的增殖,抑制B細(xì)胞的凋亡
    2.5 與MDSC共培養(yǎng)后的B細(xì)胞可以抑制T細(xì)胞增殖和IFN-γ的分泌
    2.6 與MDSC共培養(yǎng)后PD-1^-PD-L1⁺B細(xì)胞亞群比例增高
    2.7 PD-1^-PD-L1⁺B細(xì)胞具有免疫調(diào)節(jié)特性
    2.8 PD-1^-PD-L1⁺B細(xì)胞在骨髓、外周血、脾臟、淋巴結(jié)和腫瘤組織中的分布情況
    2.9 乳腺癌患者外周血中PD-1^-PD-L1⁺B 細(xì)胞明顯擴(kuò)增
3 討論
    3.1 MDSC對B細(xì)胞正常免疫功能的調(diào)控
    3.2 MDSC調(diào)控B細(xì)胞的負(fù)性免疫調(diào)節(jié)功能
    3.3 MDSC誘導(dǎo)一群新的具有較強(qiáng)免疫抑制功能的PD-1^-PD-L1⁺B 細(xì)胞…
    3.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述 調(diào)節(jié)性B細(xì)胞在乳腺癌中的研究進(jìn)展
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷



本文編號：3816047