巢蛋白表達對基底前腦神經(jīng)元機能的影響
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【摘要】:目的 基底前腦有一群巢蛋白免疫陽性的膽堿能神經(jīng)元,但巢蛋白表達對神經(jīng)元功能的影響還不清楚。本課題通過研究側腦室秋水仙堿注射后基底前腦巢蛋白陽性和陰性膽堿能神經(jīng)元變化,探討巢蛋白表達對基底前腦神經(jīng)元機能的影響及其可能機制。方法 使用成年健康雌性SD大鼠56只,隨機分為7組,正常對照組和秋水仙堿注射24h、48h、3d、7d、14d和28d組,每組8只。秋水仙堿注射組大鼠按Paxinos和Watson的大鼠腦立體定位圖譜,在前囟后0.8mm、左側1.5mm和深4.65mm用微量進樣器將1%秋水仙堿10ul注入大鼠左側側腦室,術后分別于24h,48h、3d、7d、14d和28d多聚甲醛灌注取腦。冰凍切片,行基底前腦膽堿乙酰轉移酶(Ch AT)及巢蛋白(nestin)免疫組織化學染色。計數(shù)基底前腦內(nèi)側隔核(MS)、斜角帶核垂直支(v DB)及水平支(h DB)的Ch AT免疫陽性(Ch AT+)神經(jīng)元及nestin免疫陽性(nestin+)神經(jīng)元的數(shù)目。以Ch AT+神經(jīng)元數(shù)減去nestin+神經(jīng)元數(shù)得到nestin陰性(nestin-)膽堿能神經(jīng)元的數(shù)目,比較秋水仙堿注射后不同時間點基底前腦nestin+和nestin-膽堿能神經(jīng)元的數(shù)目變化。結果 在成年大鼠基底前腦的內(nèi)側隔核、斜角帶垂直支、斜角帶水平支均可見nestin+神經(jīng)元分布。這些nestin陽性神經(jīng)元形成一個連續(xù)的細胞帶,與Ch AT+神經(jīng)元分布一致。大鼠側腦室秋水仙堿注射后的24h,其基底前腦MS、v DB和h DB的nestin+和nestin-的膽堿能神經(jīng)元數(shù)目都急驟下降,與正常對照組相比有顯著差異(P0.01),但nestin+和nestin-神經(jīng)元數(shù)目之間無顯著差異(P0.05)。隨著時間的推移nestin+神經(jīng)元數(shù)目逐漸恢復,但nestin-膽堿能神經(jīng)元數(shù)目一直維持較低水平,至術后第14d,nestin+神經(jīng)元數(shù)目基本恢復至正常水平,與正常對照組比無顯著差異(P0.05),但與nesin-神經(jīng)元之間有顯著差異(P0.01)。秋水仙堿注射后各時間點nesin-神經(jīng)元與正常組對照均有顯著性差異(P0.01)。結論 側腦室秋水仙堿注射后,基底前腦nestin+和nestin-的膽堿能神經(jīng)元都急驟減少,但nestin+神經(jīng)元在減少后可逐漸恢復,而nestin-神經(jīng)元則不能恢復。與nestin-神經(jīng)元相比,nestin+神經(jīng)元具有更強的神經(jīng)可塑性。
【關鍵詞】:基底前腦 巢蛋白 膽堿能神經(jīng)元 秋水仙堿 免疫組織化學
【學位授予單位】:大理學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R338
【目錄】:
- 中文摘要4-6
- Abstract6-8
- 前言8-11
- 材料與方法11-17
- 1.材料11
- 2.實驗試劑11-13
- 3.實驗方法13-15
- 4.腦組織nestin和ChAT免疫組化方法步驟15-16
- 5.檢測組織觀察指標16-17
- 6.統(tǒng)計學方法17
- 實驗結果17-29
- 1.基底前腦nestin+神經(jīng)元的分布及秋水仙堿注射后神經(jīng)元數(shù)目的變化17-18
- 2.基底前腦ChAT+神經(jīng)元的分布及秋水仙堿注射后神經(jīng)元數(shù)目的變化18-26
- 3.秋水仙堿對基底前腦nestin+和nestin-膽堿能神經(jīng)元的影響26-29
- 討論29-34
- 結論34-35
- 參考文獻35-39
- 附錄39-46
- 縮略詞表39-40
- 綜述40-46
- 參考文獻44-46
- 致謝46
【參考文獻】
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本文編號:372166
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