冠狀病毒（Coronavirus）是一類(lèi)有包膜的、單股正鏈RNA病毒,它是目前已知基因組最大的RNA病毒,它可感染的宿主范圍較廣,包括人、鳥(niǎo)類(lèi)及多種哺乳類(lèi)動(dòng)物,可引起上呼吸道、胃腸道、肝臟及中樞神經(jīng)系統(tǒng)等疾病。由于2003年在我國(guó)局部地區(qū)爆發(fā)的嚴(yán)重急性呼吸道綜合征（Severe Acute Respiratory Syndrome,SARS-CoV）和2012年在中東地區(qū)爆發(fā)的中東呼吸道綜合征病毒（Middle East Respiratory Syndrome）,MERS-CoV)引起人們對(duì)它的關(guān)注。冠狀病毒的S蛋白（spike protein）是介導(dǎo)病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞的關(guān)鍵蛋白,本文主要從兩個(gè)方面研究S蛋白對(duì)小鼠肝炎病毒（mouse hepatitis virus,MHV）A59生活周期的影響:第一、S蛋白的穩(wěn)定性對(duì)病毒適應(yīng)性的影響;第二、MHV是如何逃逸宿主細(xì)胞無(wú)義介導(dǎo)的RNA降解（nonsense-mediated mRNA decay,NMD）實(shí)現(xiàn)S蛋白表達(dá)的。包膜病毒通過(guò)病毒和細(xì)胞膜的融合進(jìn)入細(xì)胞,這個(gè)過(guò)程是由病毒包膜蛋白和宿主受體之間的相互作用介導(dǎo)的。一般認(rèn)為,小鼠肝炎病毒... 

【文章頁(yè)數(shù)】：74 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一部分
    第一章 前言
        1.1 PH對(duì)病毒與細(xì)胞膜融合的影響
        1.2 冠狀病毒的簡(jiǎn)介
            1.2.1 冠狀病毒的分類(lèi)
            1.2.2 冠狀病毒的生物學(xué)特征
            1.2.3 冠狀病毒的危害
            1.2.4 小鼠肝炎病毒膜融合蛋白的概述
    第二章 材料與方法
        2.1.1 主要試劑及培養(yǎng)基
        2.1.2 主要儀器設(shè)備
        2.1.3 主要耗材
        2.1.4 菌株、質(zhì)粒和細(xì)胞
        2.1.5 常用溶液的配方及配制
        2.1.6 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.1.7 病毒生長(zhǎng)曲線(xiàn)實(shí)驗(yàn)
        2.1.8 空斑法檢測(cè)病毒滴度
        2.1.9 病毒競(jìng)爭(zhēng)性抑制實(shí)驗(yàn)
        2.1.10 病毒熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)
        2.1.11 RNA提取
        2.1.12 純化RNA模板后QPCR
        2.1.13 核質(zhì)分離實(shí)驗(yàn)
        2.1.14 免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)
        2.1.15 間接免疫熒光實(shí)驗(yàn)
        2.1.16 報(bào)告系統(tǒng)質(zhì)粒構(gòu)建
    第三章 H209對(duì)pH8.0誘導(dǎo)的非受體依賴(lài)的MHV-A59 S蛋白介導(dǎo)的膜融合形成的影響
        3.1 H209對(duì)于PH8.0介導(dǎo)的非受體依賴(lài)的合胞體的形成是重要的
        3.2 H209A突變的MHV A59病毒生長(zhǎng)減慢
        3.3 H209A病毒增加了MHV A59 S蛋白的熱穩(wěn)定性
        3.4 討論分析
        3.5 結(jié)論
        3.6 研究中的不足及進(jìn)一步待解決的問(wèn)題
    參考文獻(xiàn)
第二部分
    第一章 前言
        1.1 病毒感染和細(xì)胞mRNA質(zhì)量控制
            1.1.1 NMD通路
            1.1.2 NMD通路對(duì)病毒復(fù)制的影響及病毒的逃逸機(jī)制研究
            1.1.3 NMD通路對(duì)冠狀病毒復(fù)制的影響
            1.1.4 結(jié)語(yǔ)
    第二章 結(jié)果與分析
        2.1 抑制NMD通路促進(jìn)MHV的復(fù)制
        2.2 MHV A59感染抑制NMD通路
        2.3 MHV N蛋白與NMD通路蛋白UPF1和UPF3B具有RNA依賴(lài)的相互作用
        2.4 PTBP1保護(hù)MHV逃避NMD通路降解
        2.5 PTBP1的亞細(xì)胞定位在MHV感染時(shí)發(fā)生改變
        2.6 在NMD報(bào)告系統(tǒng)中PTBP1和N蛋白都可以抑制NMD通路
        2.7 討論分析
    第三章 全文總結(jié)
        3.1 結(jié)論
        3.2 研究中的不足及進(jìn)一步待解決的問(wèn)題
    參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)介及發(fā)表文章



本文編號(hào)：3703052