發(fā)布時間：2022-02-23 03:08

　　目的探討脂肪干細(xì)胞（ADSCs）來源的外泌體（ADSC-Exosomes）是否具有肝纖維化保護(hù)作用并進(jìn)行機(jī)制探索。方法 SD大鼠原代脂肪干細(xì)胞第3～6代細(xì)胞經(jīng)無外泌體培養(yǎng)基培養(yǎng)后收集上清液,經(jīng)超速離心法分離外泌體并鑒定。200 g左右雄性SD大鼠50只,除空白組（10只）腹腔注射橄欖油外,其余40只均注射橄欖油+四氯化碳建立肝纖維化模型。造模第十周隨機(jī)處死10只進(jìn)行模型鑒定,其余30只隨機(jī)分為:ADSCs組、Exosomes組和模型組（生理鹽水）。治療干預(yù)2周后檢測血清谷草轉(zhuǎn)氨酶AST、谷丙轉(zhuǎn)氨酶ALT水平,取肝組織進(jìn)行HE染色和天狼星紅染色觀察,免疫組織化學(xué)檢測α-平滑肌肌動蛋白（α-sma）的表達(dá),Western blot檢測轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）和凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bc L-2、Caspase3的表達(dá)。結(jié)果 （1） ADSCs組和Exosomes組ALT和AST水平顯著低于模型組,均（P<0.05）;（2） HE染色和天狼星紅染色表明模型組肝細(xì)胞呈大片死亡,結(jié)締組織顯著增生,這一情況在ADSC組和Exosomes組和Exosomes組得到明顯改善;（3）α-s... 

【文章來源】：中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2020,30(07)北大核心

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 實(shí)驗動物
    1.2 主要試劑與儀器
    1.3 實(shí)驗方法
        1.3.1 脂肪干細(xì)胞原代培養(yǎng)及鑒定
        1.3.2 脂肪干細(xì)胞外泌體提取和鑒定
        1.3.3 肝纖維化模型的建立及分組
        1.3.4 病理組織切片染色
        1.3.5 肝纖維化Ishak評分
        1.3.6 血清肝功AST、ALT檢測
        1.3.7 Western blot檢測Bax、BcL-2、Caspase3、TGF-β1蛋白表達(dá)情況
        1.3.8 免疫組化檢測α-sma的表達(dá)
    1.4 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 脂肪干細(xì)胞及脂肪干細(xì)胞衍生的外泌體
    2.2 各組大鼠肝組織病理變化和肝纖維化評分
    2.3 各組大鼠血清轉(zhuǎn)氨酶活性的變化
    2.4 免疫組化檢測α-sma表達(dá)變化
    2.5 各組大鼠蛋白表達(dá)變化
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]氟染毒對大鼠皮膚成纖維細(xì)胞中SOST及DKK1蛋白表達(dá)的影響[J]. 劉曉利,劉芳盈,孟超,李平,張殿平,宋菁,劉克儉.  環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué). 2017(10)
[2]動物模型在間充質(zhì)干細(xì)胞治療慢性肝病臨床前研究的應(yīng)用[J]. 付旭鋒,陳冰冰,嚴(yán)亞萍,王宏,王峻峰,鄭冰蓉,司維.  中國實(shí)驗動物學(xué)報. 2017(01)
[3]線粒體-細(xì)胞色素C途徑在兔非酒精性脂肪肝肝細(xì)胞凋亡中的作用[J]. 吳方,余陳歡,張歡歡,馬月,俞冰,應(yīng)華忠.  中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2016(04)
[4]四氯化碳誘導(dǎo)大鼠肝纖維化進(jìn)展期和恢復(fù)期模型的建立[J]. 張磊,李俊,朱鵬里,黃成,呂雄文.  中國藥理學(xué)通報. 2011(12)
[5]肝細(xì)胞死亡的基礎(chǔ)與臨床研究[J]. 寧琴,嚴(yán)偉明,王曉晶.  中華肝臟病雜志. 2008 (09)



本文編號：3640746