發(fā)布時間：2022-02-23 18:45

　　目的:克隆表達(dá)家蠅的Clip-絲氨酸蛋白酶基因（Clip-serine protease gene of Musca domestica,Clip-Msp）和C型凝集素基因（C-type lectin gene of Musca domestica,Mdctl）,并對Clip-Msp在白假絲酵母菌感染后的時空表達(dá)模式進(jìn)行研究。方法:從課題組前期構(gòu)建的微生物感染后免疫相關(guān)基因文庫中篩選得到高表達(dá)基因Clip-Msp（GeneID:LOC101901626）和Mdctl（GeneID:LOC101890789）,然后依據(jù)NCBI網(wǎng)站上的預(yù)測序列設(shè)計引物,以家蠅三齡幼蟲cDNA為模板,PCR擴(kuò)增目的片段。使用生物信息學(xué)軟件對它們的序列及編碼蛋白作分析和預(yù)測。通過基因工程的方法,構(gòu)建pET-28a/Clip-Msp和pET-28a/Mdctl重組質(zhì)粒,隨后導(dǎo)入到大腸桿菌BL21-DE3中誘導(dǎo)表達(dá)。表達(dá)產(chǎn)物和Ni-IDA Agarose純化蛋白用SDS-PAGE和Western-Blot分析鑒定。以GAPDH作為內(nèi)參,運(yùn)用實(shí)時熒光定量PCR方法檢測Clip-Msp在家蠅三齡幼蟲感染白假絲酵母菌后... 

【文章來源】：貴州醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
英文略縮詞表
引言
第一部分 家蠅Clip-Msp和 Mdctl原核表達(dá)及生物信息學(xué)分析
    第一節(jié) Clip-Msp基因原核表達(dá)及生物信息學(xué)分析
        材料與方法
        結(jié)果
        討論
    第二節(jié) Mdctl基因原核表達(dá)及生物信息學(xué)分析
        材料與方法
        結(jié)果
        討論
第二部分 Clip-Msp在感染白假絲酵母菌后的時空表達(dá)模式研究
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
作者簡歷
致謝
學(xué)位論文數(shù)據(jù)集


【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3641157